不同去污剂对裙带菜和石莼色素蛋白复合物分离的影响

以褐藻裙带菜(Undaria pinnatifida)和绿藻石莼(Ulva pertusa)为实验材料,利用SDS,Dig,Triton X-100三种去污剂,分别与叶绿素按不同比例增溶类囊体膜,采用蔗糖密度梯度超速离心的方法分离色素蛋白复合物,蔗糖密度梯度为60%,50%,40%,30%,20%,15%和10%。实验结果表明:当SDS与叶绿素质量比为20∶1时,能够从裙带菜类囊体膜中分离得到5条含蛋白质复合物带。对于石莼类囊体膜的增溶,当SDS与叶绿素的质量比为10∶1,Triton与叶绿素质量为20∶1时,同样能够分离得到5条含蛋白质复合物带。褐藻和绿藻色素蛋白复合物对去污剂的敏感程度有很大差别。     

裙带菜种内杂交研究─—幼孢子体形态和生长速度的变异

于1995年3月在日本Tokushima的裙带菜养殖基地分离和培养若干单倍体克隆并利用新近发展起来的单倍体丰富培养技术将分离的单倍体进行丰富培养。1996年3月,以不同来源的裙带菜雌雄单倍体克隆进行不同组合的种内杂交实验,并利用多个单倍体克隆作为种源的对照。杂交所得到的不同幼孢子体在室内被培养在15℃,L：D（光暗比）＝16：8,光强255μmol／（m2·s）。在培养的过程中对幼孢子体进行了形态和生长的测定。生长的测定是利用计算机支持的生物图像自动测定系统（computer－aidedbioimagesystem）对完成的。这套系统可以准确的利用自动成像装置结合相应的软件来测定幼孢子体的面积的增长或连续的相对生长速度,这样可以克服只测量长度的增长而忽视宽度和整个面积的增长的缺点。结果表明：（1）利用裙带菜单倍体克隆交配所得到幼孢子体（0．8－1．5cm）的形态具有高度的相似性,其生长速度也具有同步性;（2）不同单倍体克隆交配所得到幼孢子体的形态和生长速度具有显著的差异。因而,单倍体克隆交配所得到孢子体具有高度相同的形态特征在幼孢子体阶段得到证实。这一结果的意义在于可以通过筛选生长速度较快的杂交组合作为品系培育的基础材料,并结合具有其它的优良经济性状的单倍体克隆进行新品种的培     

裙带菜(Undaria pinnatifida)配子体对氨态氮和硝态氮的吸收利用比较

本文对裙带菜(Undaria pinnatifida)配子体丰富培养的氮源进行了研究,结果发现裙带菜配子体能够有效利用氨态氮和硝态氮进行扩增,在30μmol/L氮离子浓度条件下,裙带菜配子体的日生长率能达到25%,可以满足配子体快速扩增的需要。裙带菜配子体在同时含有硝态氮和氨态氮的培养液中培养时,同时吸收两种氮源,并没有出现相互抑制的现象;配子体对氨态氮的吸收速率略大于硝态氮的吸收;对裙带菜配子体的氮吸收速率进行了测定,吸收速率最高分别可达24.3μmol/(g·h)和20.73μmol/(g·h),吸收速率随着氮浓度的增加而升高。     

去污剂对裙带菜色素-蛋白质复合物电泳分离效果及其性质的影响

于1998年3月在青岛市太平角采集裙带菜孢子体，通过破碎、离心制备类囊体膜，用去污剂SDS、DOC、DMG和DIG增溶裙带菜类囊体膜，经PAGE分离色素-蛋白质复合物，并测定其光谱特性，结果表明，电泳分离效果与所用的去污剂的种类有关。去污剂不同，分离到的同一类型复合物的吸收光谱有差异，捕光色素-蛋白质复合物的数目、种类及吸收光谱明显不同，电泳中产生的游离色素的多少也随去污剂种类而异，在4种去污剂中，以光谱明显不同，电泳中产生的游离色素的多少也随去污剂种类而异，在4种去污剂中，以DMG和DIG增溶的效果最好，经SDS-PAGE分出6种色素-蛋白质复合物，游离色素较少，DMG和DIG增溶的效果最好，经SDS-PAGE分出6种色素-蛋白质复合物，游离色素较少。     

INTRASPECIFIC CROSSINGS OF UNDARIA PINNATIFIDA (HARV.) SUR.-A POSSIBLE TIME-SAVING WAY OF STRAIN SELECTION

ImODUcrONUndariaPinnatofdapearv.)Sur.inJapanisdividedintoanorthemtypewithdeeplydividedpinnatebladesandasoutherntypewithlighhydividedpinnateblades(Saito,l972,0hno,l994).Butinrmtyears,themutualtIansplantationsbeweensouthandnorthtendedtornakethecIJltivatalsporophpebeudrirminrnorphology.InChina,UndariaisaIsodhadedintoanortherntypeandasoutherntypemeng,l936).Theques-tionofWhetherthemorphologicalcharaedthaofdtaphentypesaredetenninedbygeneticfactorsoraresbolyinflUenaxlbyenvbonmentalfactorsdrewt…     

STUDY ON GAMETOPHYTE VEGETATIVE GROWTH OF UNDARIA PINNATIFIDA AND ITS APPLICATIONS

When cultured under certain environmental coriditions (25℃, light intensity 80 μmol/m~2 ·s, LD12/12, in enriched seawater medium with 7 × 10~(-4)mol/L NO_3,-N, 1.56× 10~(-4)mol/L, PO_4-P and supplementsof other elements like Mn, Fe, I, etc.), mate and female gametophytes of U pinnatifida keptgrowing vegetatively and propagated fast at average daily fresh weight increase rate of about 20%. Theempirical formula G_m=G_o. 3~m was established to estimate the output of vegeative gametophytes. Vigorousvegetative gametophyte cells began to form reproductive structures (oogonium and spermatangium, whenthe tmperature was lower than 25℃ and other environmental factors wrre kept optimal. The sufficientsupply of gametophyte cells provided enough seeds for raising Undaria sporelings on prodiction scale.Controlled cross-breeding experiments using selcted male and female gametophyte clones which increasetheir cell number by mitosis instead of meiosis were also carried out in vitro. Juvenile sporophytes fromthe cro     

日光照时数对裙带菜配子体发育的影响

于１９９２年４月在青岛前海栈桥湾采集野生的裙带菜，并在室内分离和培养雌，雄配子体克隆，利用营养生长的配子体材料研究光照时数（ＤＨ）对配子体发育的影响，结果表明，连续光照可以有效地阻配子体发育，配子体只进行营养生长（ＶＧ），形成卵囊的配子体细胞占的比例为零，雌配子体细胞呈不规则圆形，多个细胞聚集成簇状，雄配子体则长成丝状体，随着ＤＨ的减少，发育的配子体细胞数比例逐渐上升，至ＤＨ为１２时达最高，为６３     

Circadian rhythms in the growth and reproduction of the brown alga Undaria pinnatifida and gametogenesis under different photoperiods

Circadian growth rhythm of the juvenile sporophyte of the brown alga Undaria pinnatifida was measured with the computer-aided image analysis system in constant florescent white light under constant temperature (10 ℃). The growth rhythm persisted for 4 d in constant light with a free-running period of 25.6 h. Egg release from filamentous gametophytes pre-cultured in the light-dark regime was evaluated for six consecutive days at fixed time intervals in constant white light and 12 h light per day. Egg release rhythm persisted for 3 d in both regimes, indicating the endogenous nature. Temporal scale of egg release and gametogenesis in 18, 16, 12 and 8 h light per day were evaluated respectively using vegetatively propagated filamentous gametophytes. Egg release occurred 2 h after the onset of dark phase and peaked at midnight. Evaluation of the rates of oogonium formation, egg release or fertilization revealed no significant differences in four light-dark regimes, indicating the great plasticity of sexual reproduction. No photoperiodic effect in gametogenesis in terms of oogonium formation and egg release was found, but fertilization in short days was significantly higher than in long days. Results of this investigation further confirmed the general occurrence of circadian rhythms in intertidal seaweed species.     

裙带菜(Undaria pinnatifida)配子体对四种抗生素的敏感性研究

采用显微计数的方法获得潮霉素、氯霉素、卡那霉素、硫酸链霉素等抗生素对裙带菜雌、雄配子体的致死率，通过统计分析研究了雌雄配子体对这些抗生素的敏感性。结果表明，裙带菜雌雄配子体对潮霉素和氯霉素敏感，482．7μg／ml潮霉素分别在第9、10天使雄配子体、雌配子体全部致死；雌雄配子体对氯霉素的敏感性还存在明显的差异，第8天氯霉素对雌雄配子体的半致死剂量分别是218．78μg／ml和371．54μg／ml。配子体对卡那霉素，硫酸链霉素相对不敏感，6000KU／L卡那霉素和800μg／ml的硫酸链霉素作用10天后雌雄配子体均无明显死亡现象。潮霉素和氯霉素可以作为裙带菜配子体的筛选试剂。     

青岛裙带菜孢子体野生种群遗传多样性的AFLP分析

采用优化的基因组总DNA提取方法,按照经典的AFLP分析路线,对30株青岛近海野生裙带菜(Undaria pinnatifida)孢子体种群内遗传多样性进行了AFLP分析.利用1对引物扩增出38条清晰可重复的带,其中32条呈现多态性,多态位点比例为84.21%,根据引物扩增的指纹图谱,计算出的种群内部平均观测等位基因数(Na)为1.8421、平均有效等位基因数(Ne)为1.375 4、平均基因多样性指数,即Nei's基因多样性指数(H)为0.235 1,Shannon's 多样性信息指数(I)为0.368 4.该种群内遗传距离的分布范围从0.026 7～0.804 4,结果显示,野生种群内个体间各项遗传指数水平均较高,种群内遗传变异丰富.聚类分析表明,在遗传距离为0.21的阈值处,30个个体划分为2大类群,推测青岛野生裙带菜进化上在遗传距离为0.21时发生第一次分化.