九孔鲍养殖中的脓疱病病因分析和药物敏感性研究

在福建沿海养殖的九孔鲍不论是成鲍还是幼鲍均经常发生脓疱病,死亡率可达 50％-60％,其症状与皱纹盘鲍脓疱病相似,但对药物的敏感性却不同．研究发现: 导致福建省的九孔鲍发生脓疱病的主要致病菌为溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)而非 河流弧菌(V．fluvialis)．其对多数药物不敏感,在43种抗菌药物中只对呋喃妥因、氯霉 素、痢特灵等中度敏感,而对青霉素、复方新诺明和头孢类药物则完全不敏感．由于上述 药物已被列为禁用渔药而不宜使用,故生产中应以新研制的无公害防治药物替代．     

皱纹盘鲍肠上皮组织立克次体超微结构与细胞病理学研究

利用电镜技术对患病濒死皱纹盘鲍 (H aliotis Discus hanna Ino)进行病原体检测和病理观察 ,在肠上皮组织中发现大量立克次体。研究表明 ,皱纹盘鲍肠上皮细胞中的立克次体分为增殖型立克次体和静止型立克次体 2种类型。立克次体以皱纹盘鲍肠上皮细胞为感染的靶细胞 ,造成细胞微绒毛全部或部分破坏 ,细胞功能丧失 ,是造成养殖皱纹盘鲍病害发生和死亡的主要病原体。     

皱纹盘鲍对河流弧菌-Ⅱ苗免疫的研究

于１９９３－１９９５年，用免疫法防治皱纹盘鲍脓疱病，河流弧菌－ＩＩ分离自大连水产养殖公司，太平洋海珍品养殖公司的患脓疱病的皱纹盘鲍；健康皱纹盘鲍，由大连水产养殖公司石庙苗种厂提供，鲍血淋巴细胞的体外培养吞噬实验，取健康皱纹盘鲍的血淋巴与肝素和菌液铵一定比例混合后，置湿盒内３７℃培养３０ｍｉｎ，取一滴涂片，吕氏液染色后观察，用该病原菌制做菌苗，大量扩增病原菌，用０．１％－１．０％的甲醛洗下菌苔，处理     

东山九孔鲍病毒病病毒的分离观察

运用电镜负染和超薄切片技术，在福建东山患病的九孔鲍的肾组织细胞，肝细胞和肠上皮细胞中可见有大小为100nm的具包囊的六角形病毒颗粒，病鲍组织匀浆后，经蔗糖分步超速离心，RNA酶及DNA酶消化去除组织内DNA，RNA后，获得纯化的病毒颗粒，又经蛋白酶K消化后得到病毒的核酸，以DNaseⅠ或RNaseA分别消化，经1%（m/n)的琼脂糖凝胶电泳证实该病毒为DNA病毒。     

几种诱导物质对皱纹盘鲍幼虫变态的相互作用

本文研究用不同浓度的氯化钾（ＫＣｌ）、γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）和足粘液相结合对皱纹盘鲍幼虫变态的影响，从中找出皱纹盘鲍幼虫诱导变态的最佳条件，为人工育苗提供科学依据。     

皱纹盘鲍脓疱病病原菌──河流弧菌-Ⅱ的抗药机制的初步研究

1993年9月至1995年末，大连地区的一龄鲍至成鲍都出现了脓疱病，用常规方法从3个养殖厂的病鲍中分离到了3个菌株，分别为D株、N株和T株。经鉴定这3个菌株为同一种──河流弧菌-Ⅱ。这3个菌株来自3个不同的海区、不同的单位，并且这3个单位使用的抗生素种类和浓度也木同，所以这3个菌株对18种抗生素的敏感度也木同。D株对环丙沙星（抑菌坏直径30mm）、复方新诺明（抑菌坏直径27mm）等敏感，而对青霉素、青霉素Ⅱ、氨苄青霉素（抑菌环直径0mm）等耐药。N株除对青霉素Ⅱ、白霉素、吡哌酸等耐药外，对其它12种抗生素都敏感或中度敏感（抑菌环直径13．5－30mm）。T株对氟派酸（抑菌环直径22mm）、环丙沙星（抑菌环直径20．3mm）等敏感，而对氯霉素、复方新诺明等耐药。研究发现，经常使用同一种抗生素很容易使病原菌产生耐药性．连续3d使用单一的抗生素（青霉素）就会产生耐药的菌株。为证明上述3个菌株的抗药性是属于哪一类，以T株为例，提取总DNA，并对总DNA进行EcoRⅠ酶切图谱分析，图谱有明显的异同，说明3个菌株的抗药性不同可能与基因突变有关。不管是非遗传型还是遗传型，都是由于抗生素为细菌提供了耐药突变株的选择环境，从而使耐药菌株得以大量繁殖。     

皱纹盘鲍贝壳沉积过程的研究

利用“平珠”生成法,通过对插入皱纹盘鲍(Haliotis discus hannaiIno)外套膜外腔中的玻片上沉积物质的分析,探讨皱纹盘鲍贝壳沉积的过程。利用扫描电镜(SEM)观察玻片上沉积物质的超微结构,傅立叶红外光谱(FTIR)分析玻片上沉积晶体的晶相,透射电镜(TEM)观察与玻片接触部分的外套膜的超微结构。结果发现:在将玻片插入外套膜外腔后的4~88h内,有机质首先在玻片上规则沉积。插入玻片88h后方解石晶体开始沉积,104h后出现圆形方解石晶体单位。8d后在方解石晶体表面出现文石晶体突起,15d后出现明显的堆垛型文石片层。27d后突然转变为方解石晶体的沉积。由此可见皱纹盘鲍贝壳的沉积具有一定的周期性,即方解石→文石→方解石的转变为1个周期。透射电镜观察外套膜结构表明在不同的插片时间,外套膜的超微结构不一样。插入玻片24h后,高柱状细胞中的内质网上的核糖体消失,高尔基体数量减少。3d后,大颗粒细胞增多,细胞内充满分泌颗粒。7d后,外套膜上皮细胞新分泌的有机质染色较浅。本研究证明了“平珠”生成法能够模拟贝壳的自然沉积,外套膜细胞超微结构的变化与贝壳沉积过程所处不同阶段有关。     

6—DMAP抑制九孔鲍受精卵第二极体的释放诱导三倍体

当50％九孔鲍受精卵出现第一极体后，用6－DMAP不同的浓度进行不同的持续时间诱导三倍体。结果表明，6－DMAP的诱导浓度为300μmol/dm^3、诱导持续时间为10min时，其诱导的三倍体率为90％以上，并且胚胎的孵化率高达85％，幼体的畸形率较低，为50％－55％。用该方法多次进行了九孔鲍三倍体生产诱导和苗种培育试验。本文还对6－DMAP的作用机理以及九孔鲍三倍体诱导中的诱导因子等问题进行了讨论。     

Growth of eight Pacific abalone families at three temperatures

1 Introduction Pacific abalone, Haliotis discus hannai Ino, is one of the most important fisheries in China. However, the wild populations have been over-fished in the past decades. Aquaculture may be a possible solution to this problem. Large-scale culture started in the late 1980s, and it has been developing rapidly in the past decade. And now, the current annual production is about 5 000 tonnes worth about US$ 200 000 000. However, the abalone aquaculture suffered a lot in the mid-1990s,…     

Sequences Characterization of Microsatellite DNA Sequences in Pacific Abalone(Haliotis discus hannai)

1 Introduction Microsatellites or simple sequence repeats (SSRs) are tandemly repeated motifs of one to six bases found in all prokaryotic and eukaryotic genomes analysed to date (Zane et al., 2002). Due to their hyper-variable and co-dominant nature, relatively high abundance and random distribution in the genome, microsatellites are among the most efficient class of molecular markers. Such repeats display high polymorphism because of variation in repeat length and can be rapidly analysed t…