哈维氏弧菌溶血素基因vhhA在大肠杆菌中的表达及活性研究

哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）是水产养殖动物（鱼、虾）的重要致病菌。已发现哈维氏弧菌对鱼类的致病性与其分泌的胞外产物中的溶血素相关，致病力最强的菌株VIB645有2个碱基序列非常相似的溶血素基因，vhhA和vhhB。本研究将vhhA克隆于pET-24d（＋）表达质粒，VHH溶血素蛋白作为1种带6组氨酸的融合蛋白在大肠杆菌BL21（DE3）中得到了过量表达。重组菌在鱼血平板上表现出很强的溶血活性，并且在卵磷脂平板上表现出磷脂酶活性。SDS-PAGE分析表明，表达蛋白的分子量约为43kDa。在17，25和37℃时重组的VHH溶血素蛋白都能得到很好的表达，达到最大表达量的时间分别为9,6和3h。在25℃进行诱导时，分泌到上清液中的表达蛋白的量最多。     

乳山湾的污染与异养微生物的调查分析

于1985年5—10月定期采取了乳山湾内和岸边养虾池的水样及底泥进行了异养微生物的分析。菌数的平均值池内高于湾内,其最高值和水中COD的最高值同时出现在养虾旺季的8月份。在湾泥和池泥中的硫酸盐还原菌数均高达10~6个/克以上,与同期内硫化物的最高含量(326mgS/kg)相一致。并发现病原性弧菌也广泛存生。异养菌种群的组成,假单胞杆菌占有最大的比值,反映出该水域为污染类型。上述结果表明该湾的水质条件已远超出国家渔业水质标准,呈现高度的有机物污染状态,其污染源与湾边周围开展大面积的养虾有关。     

红假单胞菌的分离鉴定与生长特性

由青岛沿岸潮间带表层沉积物分离出４株光合细菌，经鉴定属于荚膜红假单胞菌（Ｐｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｃａｐｓｕｌａｔａ）（菌株ＨＤ３、ＲＳ、ＭＤ２）和球形红假单胞菌（Ｒｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐｈｅｒｏｉｄｅｓ）（菌株ＰＳ２－２）。光照厌氧培养生长实验表明ＨＤ３的最适盐度为Ｓ＝１５～２５，ＰＳ２－２为一淡水菌株。菌株ＨＤ３的最适ＰＨ范围为６．３５～８．３。ＨＤ３、ＲＳ均不能利用硫化物且其生长受较高浓度的硫化物抑制。     

日本对虾血细胞分类、密度及组成

对日本对虾(Penaeus japonicus)血细胞进行超显微结钩观察,提出血细胞分为无颗粒细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞3类。血细胞密度因蜕皮期不同而异,C期较低,D_2期较高平均密度3.896～8.66×10~4cell/ml/ind。3类细胞比例为0.6～2.7,79.2～84.4,14.8～20.1％。当镰刀菌感染时,血细胞密度下降为对照组的54.3％,小颗粒细胞比例减少,大颗粒细胞增加。当养殖密度增加及水温降低时,血细胞密度不同程度下降,组成比例也发生变化。     

海洋沉积物中生物扰动对微生物降解石油烃的影响

室内试验研究小头虫的生物扰动作用对沉积物油污降解的影响。实验在混加定量20~#柴油的小生境中进行6个月。期间对氧化还原电位不连续展(RPD)深度,Eh,烃类氧化菌菌量以及油浓度等参数做了连续测定。结果表明,小头虫的生物扰动作用通过改善沉积物次表层氧含量水平而促进了烃类氧化菌的生长,并因此使得沉积物中油污的生物降解提高了15％。     

产蛋白酶益生菌Y2-2和Y1-13对牙鲆幼鱼生长促进作用的研究

分别用含1.6×109～2.0×109 个/kg的产蛋白酶益生菌Y2 -2,Y1 -13,Y2 -2和Y1 -13的混合菌剂及枯草芽孢杆菌饲料投喂4月龄的牙鲆幼鱼30d ,检测的结果 :(1)体质量增长实验中,Y2 -2组体质量增长最大 ,为19.16g±0.38g(P<0.05) ,体质量增长率最高为153.16 % ;Y1 -13组与对照组差异不显著;(2)在盲囊和小肠后段 ,Y2 -2组蛋白酶活性分别为81.52U±3.10U(P<0.05)和63.20U±5.99U(P<0.05) ,酶活性增加率分别为10.8 %和21.1 %;在小肠前段和后段 ,Y2 -2组脂肪酶活性分别为255.06U±18.84U(P<0.05)和243.30U±15.00U(P<0.05) ,酶活性增加率为27.8 %和28.2 %;在小肠前段 ,枯草芽孢杆菌组淀粉酶活性为23.49U±0.96U(P<0.05) ,酶活性增加率为12.8 %;(3)Y2 -2组的肠道产蛋白酶菌数最高为6.87±0.37(P<0.05) ,增加52.5倍 ;Y1 -13组的乳酸菌数最高为3.74±0.36(P<0.05) ,增加7.6倍 ,其次为混合菌剂组 ;Y1 -13组有抑制弧菌作用 ,弧菌量降为3.91±0.37(P<0.05),抑制率为89 % ;实验组的肠道好养性异养菌数均与对照组差异不显著(P>0.05)。     

胶州湾及邻近水域曼氏无针乌贼的生长和季节分布

报告了胶州湾及邻近水域曼氏无针乌贼的生长和季节分布的调查结果。所用材料为１９８０年８月－１９８１年７月渔业资源调查所获得的资料。曼氏无针乌贼是５月上旬进入胶州湾生殖洄游，乌贼在胶州湾生长很快，８，９月间日增长量可达１．１３ｍｍ。整个胶州湾均为曼氏无针乌贼的产物卵场。１１月曼氏无针乌贼离开胶州湾，开始越冬洄游。     

菌-藻相互作用下胞外酶活性变化研究

报道了在实验室培养条件下塔马亚历山大藻 (Alexandriumtamarense)与几株海洋细菌之间的生态关系。实验表明 ,在培养前期 ,培养液中的营养成分尚足以维持藻类和细菌的生长 ,细菌的加入是胞外酶活性升高的主要原因所在 ;在培养的后期 ,混合培养液和藻对照培养液中胞外酶活性持续升高。A.tamarense在单独培养下 ,其胞外酶活性从第12天起才有明显的提高 ,第16天增加较快,达到0.104μmol/(L·h);至第20天藻体衰败时 ,胞外酶活性达到最高水平 ,为0.385μmol/(L·h)。Z7 细菌单独培养时 ,其胞外酶活性在单独培养的2d后有一个高峰值0.133μmol/(L·h) ,随着培养时间的延长 ,其酶活性逐渐降低。细菌Z7 和Z10 与A.tamarense共培养下 ,两者胞外酶活性变化趋势相似。     

牙鲆迟缓爱德华氏菌急性感染实验:4种不同方法的比较

为了检验疫苗对牙鲆免疫效果，探讨有效的注射途径尤为重要，本文通过采用迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)对牙鲆（Paralicthys oliwaceus)进行感染实验，对口腔、肌肉、腹腔和腹腔加肌肉４种注射方法了评价比较，其半致死浓度（ＬＤ５０）分别为口腔灌注法１０^8.38 CFU/ml、肌肉注射法１０^7.54CFU/ml、腹腔注射法１０^6.70CFU/ml和腹腔加肌肉注射法１０^6.09CFU/ml。结果表明牙鲆对迟缓爱德华氏菌敏感，在这４种注射方法中，以腹腔注射法这种人工方式最佳。