PROPERTIES OF PROTEOLYTIC TOXIN OF VIBRIO ANGUILLARUM FROM DISEASED FLOUNDER

Extracellular products(ECP)produced by Vibrio anguillarum strain M3 originally isolated from diseased flounder(Paralichthys olivaceus)were prepared.ECP of M3 showed gelatinase,casinase,amylase and haemolytic activity on agarose plates.High protease activity against azocasin was detected.Bacterium M3 showed highest growth and protease activity at 25℃。The Protease present in ECP showed maximal activity at pH 8 and 55℃；was completely inactivated by application of 80℃ heat for 30 min;was completely inhibited by EDTA and HgCl2,and was partially inhibited by PMSF,SDS,MnCl2 and iodoacetic acid;but not inhibited by CaCl2 and MgCl2.The ECP was toxic to flounder fish at LD50 values of 3.1 μg protein/g body weight.The addition of HgCl2 and application of heat at 50℃ decreased the lethal toxicity of ECP.When heated at 100℃,ECP lethality to flounder was completely in-hibited.After intramuscular injection of ECP into flounder,it showed evident histopathological changes including necrosis of muscle,extensive deposition of haemosiderin in the spleen,dilated bolld vessels congested with numerous lymphocytes in the liver.These results showed that ECP protease was a lethal factor produced by the baterium V.anguillarum M3.     

激光共聚焦扫描显微检测技术在大庆探区储层分析研究中的新进展

激光共聚焦扫描显微镜（Laser Confocal Scanning Microscope）分析技术是20世纪80年代末、90年代初兴起的一项新的光学显微测试方法，它具有普通光学显微镜和扫描电子显微镜不具备的很多优点，如样品制备十分简单、分层扫描和三维立体图像重建、清晰分辨有机和无机质等。我们将该技术应用到大庆探区的储层研究中，进行了储层孔隙和微裂缝的三维结构重建，对储层中原油形态进行了详细研究，其中原油形态观察对薄差水淹层的研究有重要意义，研究了裂缝中次生包裹体特征及形成期次，此外，该方法应用于微体古生物化石研究在大庆探区发现了以前本区未见的孢子化石种类。在原油乳化机理研究方面，首次应用共聚焦观察了乳化油的内部结构，通过动态分析可以确定其稳定性，这为乳化油乳化机理研究提供了科学可靠的依据。激光扫描共聚焦显微检测技术在大庆探区储层分析研究中取得了前所未有的效果。     

我国温石棉与其4种代用品致V79细胞肿瘤蛋白谱表达的影响

将中国仓鼠肺细胞(Chinese Hamster Lung Cell, V79细胞)分别暴露于不同浓度的温石棉及代用品粉体悬液中48 h后,MTT检测细胞存活率;免疫组化法检测V79细胞中Survivin、Cap43、Bcl-2、p16和p53肿瘤相关蛋白的分布及表达,分析我国两大主产区的温石棉及4种主要人工代用品对V79细胞的增殖抑制率与肿瘤相关蛋白谱的影响,以探讨我国温石棉及人工代用品是否是导致肿瘤的高危因素之一。结果表明: ① 在6种粉体中,四川新康及陕西陕南温石棉对细胞生长抑制最强,岩棉纤维粉体对细胞生长抑制最弱。各粉体对V79细胞的存活率影响不同,随着暴露粉体浓度的增加,细胞的存活率降低,呈现剂量效应关系。②各染毒组细胞的癌基因Survivin、Cap43、Bcl-2表达的蛋白上调,抑癌基因p16和p53表达的蛋白下调,以胞浆阳性为主。综合以上结果,发现我国不同地区温石棉及其代用品均不同程度抑制V79细胞生长,上调肿瘤相关蛋白Survivin、Cap43及Bcl-2,下调p16和p53,从而诱导癌症的发展。     

海洋浮游植物对磷的响应研究进展

磷是海洋浮游植物赖以生存的一种必需营养元素.海洋浮游植物对磷的响应,与初级生产力、碳循环以及固氮作用密切相关.总结了浮游植物可利用的磷源:优先吸收溶解无机磷;在寡磷海域,可通过相关酶类协助利用溶解有机磷来抵御无机磷的缺乏.对比了不同种类浮游植物对不同形态磷源利用方式的差异并从浮游植物生理学角度阐述了存在差异的根本原因.探讨了浮游植物对低磷环境的响应机制.近期的研究发现浮游植物细胞表面可以吸附磷,该发现有利于更加准确地衡量浮游植物承受的营养盐限制问题,进一步完善对海洋磷储库及其生物地球化学循环的认识.最后提出了今后需进一步研究的关键科学问题:浮游植物细胞表面吸附磷的机制;对不同结构有机磷化物的利用机理;浮游植物对磷的海洋生物地球化学循环的响应及反馈作用.     

基于网络药理学与体外细胞实验探讨复方清痹片治疗类风湿性关节炎的作用机制

目的：基于网络药理学与体外细胞实验探讨复方清痹片治疗类风湿性关节炎(RA)的作用机制。方法：基于TCMID、TCMSP和DrugBank数据库筛选复方清痹片的活性成分并预测潜在活性成分靶点;基于GeneCard、OMIM等数据库筛选RA疾病靶点;明确复方清痹片活性成分与RA的共同潜在靶标;利用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络,并通过DAVID数据库进行基因本体（GO）功能及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析,RT-PCR检测复方清痹片对肿瘤坏死因子（TNF-α）诱导的人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞（HFLS-RA）模型白介素6（IL-6）、TNF-α、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1（AKT1）和血管内皮生长因子A（VEGFA）mRNA表达的影响。结果：筛选出217种潜在活性成分以及158个潜在靶点;IL-6、TNF、AKT1、白蛋白（ALB）、VEGFA等是复方清痹片治疗RA的关键靶点;复方清痹片主要通过炎性因子、趋化因子、免疫调控等信号通路来发挥治疗RA的作用。复方清痹片能够抑制HFLS-RA增殖,下调IL-6、TNF、AKT1和VEGFA mRNA的表达,这与网络药理学预测的结果相一致。结论：本研究揭示了复方清痹片治疗RA“活性成分-靶点-通路”的复杂关系,为后续该药的临床应用提供了研究基础。     

血根碱对鼻咽癌CNE2细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨血根碱（SAN）对鼻咽癌细胞（CNE2细胞系）增殖和迁移的影响及其可能的作用机制。方法：采用MTT法检测SAN对CNE2细胞增殖的影响,采用细胞划痕实验研究SAN对CNE2细胞迁移能力的影响,采用Western Blot技术检测SAN对CNE2细胞增殖细胞核抗原（PCNA）和上皮-间质转化（EMT）相关蛋白E-钙黏蛋白（E-Cadherin）、N-钙黏蛋白（N-Cadherin）、波形蛋白（Vimentin）表达水平的影响。结果：MTT法检测结果显示,与阴性对照组比较,SAN可以抑制鼻咽癌CNE2细胞的增殖,而且SAN浓度越高,其抑制效应越显著（P<0.05）。细胞划痕实验结果显示,与溶剂对照组比较,SAN可以抑制鼻咽癌CNE2细胞迁移,而抑制效应与药物浓度相关（P<0.05）。Western Blot检测结果显示,与溶剂对照组比较,SAN能降低CNE2细胞中增殖相关蛋白PCNA和EMT相关蛋白N-Cadherin、Vimentin的表达水平,提高E-Cadherin的表达水平（P<0.05）。结论：血根碱能抑制鼻咽癌细胞增殖和迁移,可作为治疗鼻咽癌的潜在药物开展进一步研究。     

利用14C标记技术测定海洋初级生产力的绉议

<正>海洋初级生产力是指海洋中初级生产者(主要是浮游植物)通过光合作用或化学合成生产有机物的能力或速率[1-2],它是海洋生态系统中其他异养生物的生存基础,并从根本上影响着全球生物地球化学循环[3]与气候变化[4]。研究表明,海洋浮游植物通过光合作用不仅贡献了生物圈内的一半净初级生产力(以碳计约为5×1013 kg/a)[4],提供了生态系统中其他有机体生长与新陈代谢所需要的初级有机物能源,限制     

沙蜇和白色霞水母刺丝囊毒素的细胞毒性比较研究

分别自沙蜇和白色霞水母提取刺丝囊毒素蛋白,以小鼠皮下结缔组织细胞(A9)和人横纹肌瘤细胞(A-673)为受试对象,比较两种水母的刺丝囊毒素蛋白对其的细胞毒性,以期为评估和管理两种水母的毒害风险提供科学依据。结果显示:沙蜇和白色霞水母刺丝囊毒素对培养中的A9和A-673细胞存活率都具有抑制作用,且该抑制作用呈显著的时间和剂量依赖性。白色霞水母刺丝囊毒素对A9和A-673细胞毒性的半数效应浓度(如:对A9和A-673的EC50-24h分别为49.8μg/mL和43.6μg/mL)低于沙蜇刺丝囊毒素的半数效应浓度(如:对A9和A-673的EC50-24h分别为78.0μg/mL和70.1μg/mL);两种水母毒素对A-673或A9的细胞毒性强于已报道的根口类和旗口类水母毒素对哺乳动物肺、肝、血管平滑肌、神经、乳腺等的细胞毒性。由此可见,白色霞水母刺丝囊毒素的细胞毒性更强,横纹肌、结缔组织对水母刺丝囊毒素作用敏感。研究结果对于评估水母毒害风险和制定防护对策有重要意义。     

A new identification method for five species of oysters in genus Crassostrea from China based on high-resolution melting analysis

The high phenotypic plasticity in the shell of oysters presents a challenge during taxonomic and phylogenetie studies of these economically important bivalves. However, because DNA can exhibit marked differences among morphologically similar species, DNA barcoding offers a potential means for oyster identification. We analyzed the complete sequences of the cytochrome oxidase subunit I （COI） of five common Crassostrea species in China （including Hong Kong oyster C. hongkongensis, Jinjiang oyster C. ariakensis, Portuguese oyster C. angulata, Kumamoto oyster C. sikamea, and Pacific oyster C. gigas） and screened for distinct fragments. Using these distinct fragments on a high-resolution melting analysis platform, we developed an identification method that does not rely on species-specific PCR or fragment length polymorphism and is efficient, reliable, and easy to visualize. Using a single pair of primers （Oyster- COI-1）, we were able to successfully distinguish among the five oyster species. This new method provides a simple and powerful tool for the identification of oyster species.     

重庆焦石片区岩溶水动力水化学及其动态特征分析

在对焦石片区岩溶水系统的水动力特征分析的基础上对水化学类型进行了总结,并结合降雨资料与典型泉域流量或水位动态关系的研究,得出了岩溶水系统分为汇合流型和分散流型两种水动力;其主要的水化学类型为重碳酸盐型水;岩溶水的动态变化对降水反映极为灵敏,主要受降水量大小的控制。