珠母小核果螺形态结构的系统观察

对珠母小核果螺 [Drupella margariticola （Broderip）] 的外部形态和内部结构进行系统观察.结果表明：珠母小核果螺壳高12.92 - 31.74 mm,平均26.17±4.31 mm,壳宽8.10 - 18.46 mm,平均15.34±2.48 mm,螺体质量0.36- 5.30 g,平均2.99±1.14 g;消化系统由口、吻、嗉囊、食道、胃、肠、直肠及肛门等消化道,以及唾液腺、食道腺和肝脏等消化腺组成;成螺肉食性,摄食时将吻伸出,吻管内有齿舌,齿舌上有齿3 列,每列有齿3 枚,对称排列,齿式1.1.1,齿舌在齿舌软骨表面产生运动,切刮食物;雌雄异体,外形上难以区别,雄性生殖系统由精巢、前列腺、储精囊、输精管和阴茎组成,雌性生殖系统由卵巢、输卵管、蛋白腺、缠卵腺、交接囊和阴道组成.     

珠母贝人工育苗技术的初步研究

2002年3月1日于海南陵水县黎安港湛江海洋大学珍珠试验站 ,在珠母贝年龄偏小、性腺发育尚未十分饱满的情况下 ,选取雄性2只、雌性10只 ,通过人工催产的方法 ,促使2雄8雌排放精卵 ,受精率为86.36 % ,受精后20h胚胎发育为直线绞合幼虫。在水温23.5～29.7℃ ,盐度30.6,pH8.1的条件下 ,幼虫经66d的培育 ,共出池3mm±0.3mm的珠母贝苗126.8万只 ,初步取得了珠母贝人工育苗试验的成功。     

合浦珠母贝基因组微卫星富集文库的构建与分析

采用生物素标记的(AC)_(15)探针和磁珠富集法构建合浦珠母贝(Pinctada fucata)基因组DNA微卫星富集文库。随机挑选2097个克隆进行筛选,得到483个候选克隆(23.03%),对其中135个阳性克隆测序分析发现122个克隆含有微卫星重复单元(90.37%)。进一步通过序列比对,最终得到65个具有特异微卫星序列的阳性克隆(53.28%),其中包含85个微卫星DNA结构域,其中完美型(perfect)70个,占82.36%;非完美型(imperfect)7个,占8.24%;混合型(compound)8个,占9.41%,重复次数主要分布在5~20(95.74%),平均重复次数为7.83,(AC/GT)n重复所占比例最高(75.53%)。基于微卫星两端的侧翼序列,利用Primer Premier 5.0设计引物,获得11对具有多态性的微卫星引物。本研究为开展合浦珠母贝分子育种及资源评价分析提供了基础资料。     

不同温度和盐度条件下马氏珠母贝选系F_2与对照群体滤食率比较

以马氏珠母贝选系F2和对照群体为材料,比较了不同温度和盐度条件下选系F2大个体组(SL)、选系F2小个体组(SS)、对照群体大个体组(CL)和对照群体小个体组(CS)的滤食率的差异。结果表明:在15,20,25和30℃条件下,SL组的滤水率显著大于CL组(P0.05),SS组的滤水率显著大于CS组(P0.05);在20,24和28‰盐度条件下,SL组的滤水率显著大于CL组(P0.05),SS组的滤水率显著大于CS组(P0.05);在32‰盐度条件下,CL组的滤水率大于SL组,CS组的滤水率大于SS组,但两者的差异均不显著(P0.05)。本结果说明选系F2的快速生长与其较高的滤食率相一致。     

马氏珠母贝二次插核的研究

为探索珍珠培育的新途径 ,提高珍珠养殖的经济效益 ,利用马氏珠母贝(PinctadamartensiiDunker)进行第二次插核育珠 ,结果表明 :二次插核珠的珍珠层6个月就达418μm±105μm ,明显高于对照组 ,且优质珍珠的产生率达40% ,育珠贝的存活率达95% ,在每只贝插一珠核的情况下留核率仍高达0.95 ,二次插核对马氏珠母贝的重复利用率为34%。因此 ,马氏珠母贝二次插核培育珍珠技术 ,能重复利用贝体 ,缩短育珠期 ,提高珍珠的产量和质量。     

基于FIASCO技术的合浦珠母贝微卫星标记分离与筛选研究

用FIASCO(Fast Isolation by AFLP of Sequences Containing Repeats)技术开展了合浦珠母贝Pinctada fucata基因组微卫星标记的分离与筛选研究.合浦珠母贝基因组DNA经限制性内切酶MseI酶切后与接头连接, 用生物素标记的(CA)15探针与其杂交, 然后用磁珠富集、洗脱获得单链目的片段, 经PCR扩增后形成双链, 最后进行克隆转化, 构建微卫星富集文库.挑选克隆用探针引物(CA)15 和载体引物进行第2次筛选, 获得阳性克隆357个, 测序结果表明, 297个克隆(83.2%)含有微卫星序列, 包括479个微卫星DNA结构域.其中完美型微卫星有370个(77.3%), 非完美型95个(19.8%), 复合型14个(2.9%).合成引物49对, 有31对(63%)扩增出目的产物, 其中9 对在种群中(n=32)具有扩增多态性, 其多态信息含量PIC值在0.375―0.809之间, 平均为0.536;等位基因数在2―9个之间, 平均为4.889个;观测杂合度介于0.200―0.600之间, 平均为0.415;期望杂合度的变化范围为0.454―0.844, 平均为0.598.表明FIASCO技术适合于合浦珠母贝微卫星标记的分离与筛选.     

合浦珠母贝超氧物歧化酶组织表达的特异性

采用聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳技术,对合浦珠母贝4种组织（肝脏、外套膜、闭壳肌、鳃）中的超氧物坡化酶（SOD）电泳图谱进行分析。结果表明：SOD具有明显的组织特异性。在肝脏中SOD由3个位点编码,其中Sod-2、Sod-3座位具有多态性;外套膜中SOD由3个位点编码,其中Sod-2、Sod-4座位具有多态性;闭壳肌中SOD由4个座位编码,其中Sod-2、Sod-2、Sod-4座位具有多态性,肝脏Sod-3座位及壳肌Sod-1座位分别具有一“0”等位基因;鳃中SOD至少由7个以上位点编码,并出现三等位基因编码的SOD同工酶谱。     

珠母贝人工苗养殖研究

在不同海区、不同水层养殖珠母贝人工苗，及用不同方法进行养殖小贝。结果表明：在开放性、半开放性、内湾性海区养殖11个月后．珠母贝壳高分别为64．5、51．4、69．8mrn．成活率分别为6．4％、0．8％、0．5％，其生长和成活率具有显著差异（P〈0．05）；同海区中3m、6m、9m、12m、15m水层养殖11个月后．珠母贝壳高分别为64．5、67．4、62．8、56．9、51．9mm．成活率分别为6．4％、6．8％、8．1％、11．7％、13．9％．随着水层的加深．珠母贝的生长变慢．成活率提高且差异显著（P〈0．05）；6个月龄小贝用穿耳法、片笼法、锥型笼法养殖5个月后．壳高分别长成56．1、55．7、51．7mm．成活率分别为72．6％、59．9％、51．7％，其生长和成活率具有显著差异（P〈0．05）。     

马氏珠母贝经济性状对体重决定效应分析

采用通径分析方法研究了不同养殖区马氏珠母贝各分性状对体重的决定效应。结果表明:流沙养殖群体分性状壳长、壳高、壳宽、铰合线长、软体部重和闭壳肌重与体重间呈正相关(P<0.01),对体重的直接决定效应分别为0.091、0.072、0.029、0.002、0.089和0.001,间接决定效应分别为0.319、0.284、0.183、0.03、0.304和0.004,总决定效应分别为0.41、0.356、0.212、0.032、0.393和0.005;6个经济性状与体重间的关系在抽样断面上可用线性回归模型拟合,复相关系数达0.939(P<0.01)。6个性状3类决定效应按大小排列均为壳长>软体部重>壳宽>壳高>铰合线长>闭壳肌重。迈陈养殖群体作为验证群体,各效应值与前者有差异,但3类决定效应大小排序与前者完全相同。基于决定效应大小及性状易测性,育种目标性状的选择策略为首选壳长,二选壳高,三选壳宽。研究还发现壳宽对软体部重具有最大的决定效应,提出加大壳宽选择强度以培育大型珍珠新观点。