杂色鲍(Haliotis diversicolor)硒结合蛋白1基因的克隆及其应激表达

硒结合蛋白1(selenium-binding protein 1,SBP1)是一种高度保守的蛋白,广泛参与了机体的多个理化过程。本研究首次获得了杂色鲍(Haliotis diversicolor)SBP1基因的全长c DNA序列2269 bp,并命名为Hd SBP1,ORF为1494 bp,共编码497个氨基酸。荧光定量PCR结果显示,Hd SBP1基因在杂色鲍各组织中均有表达,其中在鳃和肾中的表达量相对较高。缺氧处理后,Hd SBP1在鳃组织和血细胞中的表达量分别在处理24 h和192 h后显著升高(P0.05);高温应激之后,在鳃组织中,Hd SBP1的表达量在第1时相与第3时相显著升高(P0.05),而在血细胞中只有在第3时相表现出显著性差异;缺氧和高温联合应激之后,鳃组织中Hd SBP1的表达量在192 h显著上调(P0.05),在血细胞中Hd SBP1的表达量在0 h、4 h和24 h时均显著升高(P0.05);副溶血弧菌注射感染之后,在鳃组织中Hd SBP1的表达量在6 h和24 h时显著性上调(P0.05),而血细胞中Hd SBP1基因的表达量在每个时相的实验组都显著高于对照组(P0.05)。以上不同的应激条件均会导致Hd SBP1在不同组织中的表达量的显著变化,说明Hd SBP1在杂色鲍的免疫反应中可能扮演着重要的角色。     

浙江省养鲍业的探索

面对目前浙江省养鲍业停滞的现状,对适宜于浙江沿海养殖的鲍鱼品种和养殖技术进行了探讨,提出浙江省应选择盘鲍为主要养殖对象,以海陆交替养殖为主要养殖模式,走产业化道路。     

皱纹盘鲍对河流弧菌-Ⅱ苗免疫的研究

于1993-1995年，用免疫法防治皱纹盘鲍脓疱病。河流弧菌-Ⅱ分离自大连水产养殖公司、太平洋海珍品养殖公司的患脓疱病的皱纹盘鲍;健康皱纹盘鲍，由大连水产养殖公司石庙苗种厂提供。鲍血淋巴细胞的体外吞噬实验:取健康皱纹盘鲍的血淋巴与肝素和菌液按一定比例混合后，置湿盒内37℃培养30min，取一滴涂片，吕氏液染色后观察。用该病原菌制做菌苗，大量扩增病原菌，用0.1％-1.0％的甲醛洗下菌苔，处理24-120h，用生理盐水反复清洗，除掉甲醛;再用生理盐水稀释到所需浓度。通过反复传代降低毒性，制成活菌苗。用两种菌苗在稚鲍、一龄鲍（2-3cm）和成鲍（6-8cm）上实验。结果表明，鲍的血淋巴细胞约有三种，三种细胞都有吞噬细菌的能力，有的细胞象变形虫样变形，在细胞膜上吸附着很多细菌，有的细菌已被吞到细胞内;该病原菌可同鲍的血清发生凝集反应;菌苗的效果明显，可提高成活率约50％以上。由上述结果可见，皱纹盘鲍的血淋巴细胞具有吞噬细菌的能力，在菌苗的作用下，血淋巴细胞增殖并活跃地吞噬异源致病菌，同时鲍血液中的免疫因子也被激活，参与免疫的过程，使皱纹盘鲍成活率明显提高。     

长岛皱纹盘鲍育苗用水中的有害元素分析

随着养殖规模的扩大,鲍的育苗、养成和工厂化蓄养发生严重的异常现象,造成大面积减产。１９９５年１月,受长岛县政府和有关部门委托,我们承担皱纹盘鲍病因和病害防治研究项目。本文着重讨论养鲍用水的水质状况及水质处理技术。１材料与方法１．１样品的采集采样地点和时间。１９９５年７月１３日取长岛鲍鱼育苗厂附近海水、育苗用沙滤水和排放的育苗废水;１９９５年７月１６日取青岛第一海水浴场码头涨潮水。１．２样品的处理和分析步骤取自长岛的水样,沉淀后取上清液,使用原子吸收分光光度法分析。因需分析元素总量,所以未经过滤。…     

皱纹盘鲍血细胞吞噬发光的研究

于１９９８年７月从大连碧龙海珍品有限公司购得人工养殖的皱纹盘鲍,运用化学发光法研究在体外条件下利用６种活性氧清除剂ＳＯＤ（超氧化物歧化酶）、ＣＡＴ（过氧化氢酶）、苯甲酸钢和ＤＭＦ（二甲基呋喃）、ＮＢＴ（硝基四唑蓝）及金属螯合济ＥＤＴＡ（乙二胺四乙酸）等试齐对皱纹盘鲍血细胸吞噬活动中化学发光的产生和影响。结果表明,活性氧清除剂对皱纹盘鲍血细胞的吞噬发光都有掏作用,说明皱纹盘鲍血细胞在吞噬活动中能够释     

日本盘鲍×皱纹盘鲍子代杂种优势的RAPD分析

本文通过对日本盘鲍 (D)、皱纹盘鲍 (H)及其二者的正反杂交子代 D♀× H♂ (DH)、D♂× H♀ (HD)四样本的基因组 DNA进行 RAPD标记分析。探讨了杂种优势产生的分子遗传机制。从 4 0个随机引物 (OPK,OPV系列 )中筛选出 12个引物进行扩增 ,共得到 113条清晰稳定的扩增带 ,多态率占 4 3.3%。其中四群体各有其特异扩增位点。另外 D与 DH,H与 HD及 D与 DH,HD等间亦存在共享片段。四群体内相似性指数各自为 0 .798(H)、0 .799(D)、0 .777(HD)、0 .788(DH)。可见正反杂交子代群体内相似性指数皆低于两亲本 ,这表明杂种子代基因组发生的变异更大些。皱纹盘鲍与其正反杂交子代的相对遗传距离分别为 0 .0 76 ,0 .0 95,而日本盘鲍与其正反杂交子代的相对遗传距离分别为 0 .0 31,0 .0 33,前者明显大于后者 ,这表明杂交子代与两亲本的遗传距离不是对等的 ,而是更偏向日本盘鲍。     

鲍养成阶段养殖环境中的浮游纤毛虫

在使用表层海水作养殖水的杂色鲍(Haliotis diversicolor)养成池,整个养成阶段共检测到浮游纤毛虫33种,其中寡毛目(Oligotrichida)的种类最多,为14种。在一个使用沙井水作养殖水的杂色鲍养成池周年研究中,共观察到浮游纤毛虫24种。2类养成池的纤毛虫优势种都是尾丝虫(Uronema sp．)、钟虫(Vorticella sp．)和具沟急游虫(Strombidium sulcatum)。虽然后者养殖用水为沙井水,但养殖密度较大,水体交换量稍低,养殖水体中有机质含量高,嗜污性纤毛虫得以大量繁殖,其密度较前者高一倍。在养殖用水取水海区——红海湾近岸表层海水中,共检测到浮游纤毛虫27种,其中砂壳亚目(Tintinnina)纤毛虫16种。受水环境中二氧化碳浓度变化影响,养成池与取水海区砂壳虫的种类组成和密度有较大区别。     

杂色鲍血细胞的分类及显微与超微结构研究

对杂色鲍血细胞进行了显微、亚显微及超微观察,根据细胞大小、特性等将其分为颗粒细胞和无颗粒细胞,颗粒细胞的特征是细胞较大,大多数细胞呈圆形或略呈椭圆形,细胞核呈圆形或卵圆形,细胞大小为11.79±1.09μm,核质比为0.56,细胞内具有均质的大颗粒;无颗粒细胞的特征为细胞圆形或卵圆形,细胞较小,核质比为0.71,包含一个或两个明显的透明细胞质区域,细胞大小为6.37±0.49μm.     

一个皱纹盘鲍人工群体内个体大小遗传变异的RAPD分析

从以日本野生皱纹盘鲍(Haliotis discus hannui Ino)为亲本进行群体繁殖所得人工群体的子1代中分别选择大(BI)、中(ME)、小(SM)等3个子群体各20个个体，进行RAPD分析。用11条随机引物及7个双引物组合共扩增出153条DNA片段，其中总群体多态性片段数为110条，多态性片段的比例为72．37％。根据扩增片段的共享度用TFPGA软件进行计算，结果表明：(1)SM与ME的遗传距离较近，而与BI的遗传距离相差较大；(2)子群体间遗传分化系数为7．64％，表明各个子群体间在遗传上存在一定的差异，对子群体进行选择将有一定的意义；(3)各子群体表现出了丰富的遗传变异，子群体BI、ME、SM的遗传多样性分别为0．2063、0．2358和0．2363，表明BI子群体具有相对较高的纯合度，在选择育种中有较高价值。     

金属离子和pH值对九孔鲍几种消化酶活力的影响

研究了金属离子对九孔鲍(Haliotis diversicolor supertepla)褐藻酸酶、琼脂酶及纤维素酶活力的影响。结果表明，3种酶的最适pH不同。分别为褐藻酸酶8．8、琼脂酶4．2、纤维素酶4．5-5．0。MgSO4为褐藻酸酶的激活剂、BaCl2为琼脂酶的激活剂、MnCl2是纤维素酶的激活剂。