采用加速溶剂萃取法提高微藻油脂萃取量的优化条件研究

设计4因子5水平的正交实验方案[采用正交表L25（5＾6）],通过确定加速溶剂萃取法（ASE）处理的最优化条件,包括萃取溶剂、萃取温度、萃取时间和萃取循环次数,达到快速萃取微藻油脂并且萃取量高的效果．结果表明,除循环次数外,其他萃取条件因子均能显著影响油脂萃取量（P〈0．035）．在萃取溶剂为无水乙醇或丙酮、温度为175℃、萃取时间为16min、循环次数为3次的最优处理条件下,微藻油脂萃取量最高（19．20％～21．36％）．与常规的索氏萃取法相比,萃取量可提高39．08％～47．09％．采用ASE法在最优化条件下萃取微藻油脂可以达到良好效果．     

苏丹黑B染色处理细胞技术在快速检测微藻油脂含量中的应用

探讨了采用苏丹黑B染料染色处理微藻细胞技术估测微藻油脂含量的可行性.结果表明,微藻细胞经苏丹黑B染色处理后在645 nm光波长处有最大吸收峰值A645,微藻油脂含量与经苏丹黑B染色处理后微藻细胞的吸光值A645呈明显的相关性.建立了考察的7种微藻油脂含量与吸光值A645的线性回归方程,线性关系显著（p〈0.01）.基于藻湿重,微藻油脂含量的线性范围为1.79~39.63 mg/g,估算的相对偏差〈10%.因而,采用苏丹黑B染色处理微藻细胞技术适宜用来检测微藻的油脂含量.     

利用两种活体荧光技术分析北极微藻对光照变化的响应

采用调制叶绿素荧光技术（脉冲-振幅-调制：Pulse-Amplitude-Modulation,简称为PAM技术）和荧光光谱两种技术研究不同光照下的两种北极微藻（北极异帽藻（Heterocapsa arctica）和红胞藻（Rhodomonas sp.）的荧光特性,发现（1）两种藻在三个不同光照水平下（5 000 lux、15 000 lux、25 000 lux）光合生理变化特征相似：随着光照强度增加,光量子产量越低,光合效率越低;在15 000 lux和25 000 lux两个较强光照条件下,最大光合电子传递速率（rETRmax）没有提高,且捕光能力下降;25 000 lux光照强度下,均处于胁迫状态,但对强光的耐受能力增强;（2）两种藻在15 000 lux条件下Chl a荧光强度最高,25 000 lux条件下的Chl a荧光强度都显著降低,受到不同程度的光损伤;类胡萝卜素和多甲藻素是维持北极异帽藻15 000 lux下种群生存的有效色素;藻胆素和Chl c则分别为维持红胞藻5 000 lux和15 000 lux条件下的种群的生存起了积极作用。     

海洋微藻的无菌化处理及对其生长特性和生化组成的影响

利用常用抗生素(氨苄青霉素、链霉素、氯霉素和卡那霉素)对4株海洋微藻(1株金藻和3株小球藻)进行了无菌化处理,并对这4株微藻在带菌和无菌培养时的生长特征和生化组成进行了比较。结果表明:中高浓度(≥100 mg/dm3)的单种抗生素或抗生素组合可抑制微藻的生长,个别低浓度(50 mg/dm3)的抗生素或抗生素组合可促进微藻的生长;氨苄青霉素、链霉素和卡那霉素各200 mg/dm3联合使用处理球等鞭金藻,氯霉素100, 50, 50 mg/dm3单独使用分别处理小球藻C95, CV和C146,可获得这4株微藻的无菌藻系;无菌培养的4株海洋微藻的稳定期持续时间由除菌前的4~5 d延长到15~20 d,藻液悬浮性增强,藻细胞不易老化;除菌后微藻的主要生化成分发生明显变化,球等鞭金藻的叶绿素A、叶黄素和总脂含量显著增加,小球藻C95和CV的总蛋白含量显著增加,3株小球藻的脂肪酸组成如EPA, PUFA等的含量发生显著变化。     

毛木耳（Auricularia polytricha）种质资源的ISSR分析

山区开矿和城镇建设使毛木耳资源日益匮乏，为了合理保护利用毛木耳资源，为新品种选育提供理论依据。也为毛木耳DNA指纹图谱的构建奠定基础，从分子水平上探讨毛木耳种间、品种间遗传关系，用ISSR标记分析毛木耳种质资源。结果表明：从27条ISSR引物中筛选出适合毛木耳种质分析的17个ISSR引物。17个引物共扩增出155条带，多态性位点155；多态性位点比率100％。基于扩增条带数据库建立了Jaccared遗传相关系数矩阵。构建了相似的分子树状图，将55个供试菌株分为5类群：Ⅰ类群含12个菌株，Ⅱ类群含11个菌株，Ⅲ类群含2个菌株，Ⅳ类群含24个菌株，Ⅴ类群含6个菌株。55个菌株的平均遗传相似系数为0．4109。同时类群的划分与菌株来源的地理分布没有关系。菌株间的遗传多样性十分丰富。用ISSR标记技术能将以传统形态特征为分类依据定名的菌株全部分开。     

基于FlowCam影像和YOLOv3深度学习模型的多纹膝沟藻检测

海洋中的有害藻华,包括微藻形成的赤潮和褐潮以及大型藻类形成的绿潮和金潮,已成为一类突出的海洋生态灾害问题。2021年11—12月,山东半岛东北部海域发生多纹膝沟藻(Gonyaulax polygramma)形成的大规模赤潮,导致海带养殖严重受损,亟待构建有针对性的赤潮监测预警体系。本文以多纹膝沟藻为对象,尝试应用流式影像仪(FlowCam)结合卷积神经网络模型YOLOv3,分别对含有多纹膝沟藻的浓缩海水样品、含有多纹膝沟藻和链状亚历山大藻(Alexandrium catenella)的浓缩海水样品,以及含有多纹膝沟藻活细胞及空壳的浓缩海水样品进行了检测实验,探究了基于藻种影像的深度学习模型在赤潮原因种检测方面的应用潜力。结果表明,在以FlowCam获取的影像数据集训练3万次后,YOLOv3对多纹膝沟藻表现出较好的识别能力,对浓缩海水样品中目标藻种识别的平均精度为88.2%;当样品中存在与多纹膝沟藻形态相似的链状亚历山大藻时,模型对多纹膝沟藻识别的平均精度下降为76.6%,对两种微藻同时进行训练和检测,可将对多纹膝沟藻识别的平均精度提高至84.6%。对于低温下出现脱壳现象的多纹膝沟藻,模型对海水中活细胞识别的平均精度为86.7%,对空壳识别的平均精度87.8%,将多纹膝沟藻活细胞与空壳分别识别的平均精度均值(87.3%)高于将两者统一作为多纹膝沟藻进行检测的识别精度(84.2%),整体识别精度提升3.1%。综合相关结果可以看出,FlowCam与深度学习模型相结合在赤潮监测和研究中具有重要应用潜力。     

海洋微藻中脂肪酸的气相色谱分析

本文以正十九碳酸作内标,用ＨＣＩ－ＣＨ３ＯＨ对海洋微藻进行抽提酯化后做毛细管气相色谱分析。方法的重现性各脂肪酸的相对偏差为０．３％－１１．６％,回收率为８５．７％－１０３．３％,仪器稳定性的相对偏差为０．２－３．１％。。     

三种北极微藻对不同温度的适应性研究

为了研究北极微藻对不同环境温度的适应性,对分离自北极王湾地区的三种微藻-玛氏骨条藻(Skeletonema marinoi)、小球藻(Chlorella sp.)和衣藻(Chlamydomonas sp.)在不同温度条件下(0℃、4℃和8℃)的生长曲线和抗氧化酶系统进行了测定.结果表明微藻对温度的适应性因种而异:玛氏骨条藻在4℃具有最快生长速率,最高的超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)酶活性,及最低的丙二醛(MDA)含量;小球藻的最快生长速率及酶活均在8℃时,MDA含量最低值出现在0℃;衣藻生长情况相差不大,MDA含量的最低值出现在8℃.抗氧化酶系统变化规律也因藻种及温度而异--在0℃与4℃变化时,玛氏骨条藻抗氧化酶系统的三个指标的差异极显著(P<0.01);在0℃与8℃变化时,玛氏骨条藻与小球藻的SOD活性的差异显著(P<0.05),其余两个指标差异不显著;衣藻在三个温度下的三个指标差异均不显著.总体而言,三种藻对三个温度的适应性均较好:其MDA的含量均较低,三种藻各自具有独特的生理代谢机制来适应不同的温度环境.     

有机磷农药对海洋微藻致毒性的生物学研究：Ⅷ.久效磷对二种海洋微藻的 …

在久效磷的毒性胁迫下,扁藻和三角褐指藻细胞的生长严重地受到了抑制（其７２ｈ半抑制浓度分别为１．４６ｍｇ／Ｌ和９．７４ｍｇ／Ｌ）,藻细胞内自由基产生与清除间的平衡被打破。在自由基过量产生的同时,伴随有核酸和蛋白质含量的降低;与藻细胞清除自由基有关的二种关键性酶－过氧化物酶（ＰＯＤ）和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的活性也出现下降趋势,因此,作者认为自由基参加了久效磷对藻细胞的伤害。ＰＯＤ和ＳＯＤ活性的降低