褐牙鲆卵黄原蛋白免疫胶体金技术的开发及其在环境雌激素检测中的应用

为快速检测海洋环境雌激素,本研究利用20 nm胶体金颗粒和褐牙鲆(Paralichthys olivaceus) Vtg单/多克隆抗体开发了夹心法免疫胶体金检测试纸条,并对胶体金标记条件、T线和C线抗体浓度等参数进行了优化,构建了褐牙鲆Vtg的快速检测技术。实验结果表明该胶体金试纸条工作范围为15.7～1 000 ng·mL^-1(R²>0.98),检出限为7.8 ng·mL^-1。本研究制备的胶体金试纸条检出限与目前常用的多种Vtg的ELISA方法相近,但是检测时间仅为15 min,比常规方法节省了约14 h。此外,该试纸条在存放30和90 d后,对Vtg的检测结果并无明显偏差,表现出较好的稳定性和可重复性。最后,通过测定多种常见环境雌激素(双酚A、雌二醇、乙炔雌二醇)暴露对雄性成年褐牙鲆血浆中Vtg的诱导情况,进一步验证了该试纸条在海洋环境雌激素活性检测中的应用。     

海洋生物C型凝集素研究进展

C型凝集素是指一类依赖钙离子的糖结合蛋白,是凝集素家族中种类和数量最多的一个家族,广泛存在于脊椎动物和无脊椎动物中。当外界病原微生物侵入机体后,C型凝集素便可迅速识别和清除病原微生物,在先天性免疫中发挥重要作用,所以C型凝集素一直是免疫学研究领域的热点。本文从结构特征、表达图式和免疫功能等方面对代表性海洋生物的C型凝集素研究现状进行综述,期待可以为深入探讨海洋生物C型凝集素的功能提供参考。     

四种免疫促进剂对日本蟳酚氧化酶和血细胞的影响

为查清免疫促进剂对日本蟳（Charybdis japonica）（俗称石蟹）自身免疫力的增强作用及机理,对脂多糖（LPS）、β葡聚糖（β—1,3-glucan）、灭活鳗弧菌和灭活哈维氏弧菌对日本蟳酚氧化酶（po）的产量与活性以及血细胞的数量与超微结构的影响进行了研究。结果表明,经4种免疫促进剂处理后,日本蟳PO产量和总酶活性都有显著增加,但PO的比活性与对照相比没有显著差异。日本蟳血细胞超微结构观察显示,多糖处理组小颗粒细胞和大颗粒细胞的糙面内质网和线粒体数量增加,颗粒数量减少、体积增大,而透明细胞的超微结构没有显著变化;灭活弧菌处理组小颗粒细胞中的颗粒数量明显减少,透明细胞中线粒体的数量显著增加。由此可见。多糖类和灭活弧菌类免疫促进剂对日本蟳非特异性免疫系统的影响不同,多糖类免疫促进剂主要提高酚氧化酶原激活组分PO的产量,进而提高PO总酶活性,而灭活弧菌类免疫促进剂主要提高透明细胞和小颗粒细胞的吞噬活性。     

大口黑鲈肌肉生长抑制素前肽真核表达载体的构建及其在肌肉组织中的表达

将大口黑鲈(Micropterus salmoide)肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)前肽(MSTN-Pro)的cDNA定向克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)/mycHisB中,双酶切检测和测序鉴定证实,插入pcDNA3.1(-)/mycHisB载体中的片段为目的基因的核苷酸序列,MSTN基因前肽cDNA为正向插入,且重组质粒无错配或插入移位等突变。采用肌肉注射法将重组表达质粒注入大口黑鲈背部肌肉组织,在注射后第2天经RT-PCR检测到MSTN前肽基因mRNA的表达,第6天经免疫组化学检测到MSTN前肽蛋白的表达,第8天蛋白表达强度增强,对照组始终未检测到MSTN前肽基因的表达。     

南极超微细菌ANT52(Alteromonas stellipolaris)外膜蛋白和脂多糖的提取物对黑鲷的免疫活性研究

从南极超微细菌ANT52(Alteromonas stellipolaris)提取粗外膜蛋白(Outer membrane protein,OMP)和粗脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS),分不同处理(OMP、LPS、OMP+LPS)免疫注射黑鲷,在免疫后的第1、7、14、21、28、35天时检测试验鱼的白细胞吞噬活性、溶菌酶活力、抗菌活力以及酚氧化酶活力等非特异性免疫指标的变化.结果表明,自南极超微细菌ANT52提取的LPS及OMP 均能够显著提高黑鲷的白细胞吞噬活性(P<0.05),增强黑鲷血清中的抗菌活力、溶菌酶的活力和酚氧化酶活力(P<0.05).各免疫处理对黑鲷免疫活性的影响效果不同,LPS、OMP单独注射的免疫促进效果优于组合注射(LPS+OMP);且LPS、OMP单独注射的黑鲷各免疫指标基本上在接种后的第28天时最高,而组合注射LPS+OMP在接种后的第21天最高.上述物质表现的免疫作用机理有待于进一步研究.     

马尾藻多糖的抗肿瘤作用及其免疫功能的研究

分别以马尾藻多糖(SP)、环磷酰胺对H22荷瘤NIH小鼠灌胃给药,通过建立H22:实体瘤小鼠模型和H22腹水瘤小鼠模型,测定其抑瘤率、胸腺指教、脾指数、免疫球蛋白及T淋巴细胞数量等指标,观察马尾藻多糖在H22腹水瘤小鼠体内的抗肿瘤作用及其机理、对H22腹水瘤小鼠生命延长的影响和体内T淋巴细胞数量的变化.结果表明,马尾藻多糖对H22荷瘤小鼠有明显的抑瘤作用,其质量比为100 mg/kg时的抑瘤效果最好,抑瘤率达到61.3%;H22腹水瘤小鼠经SP灌胃后,胸腺指数、脾指数、T淋巴细胞数和白细胞数均有明显升高;SP能显著提高H22腹水瘤小鼠的平均生存时问,SP质量比为100 mg/kg时效果最好,H22腹水瘤小鼠生命延长率为69.87%.     

植物提取物对凡纳滨对虾生长、消化酶及免疫因子的影响研究

将凡纳滨对虾(O.68±4-0.14)g放养在15个80cmx 80cm×100cm水池中,分别投喂添加0.0、0.5、1.0、2.0和4.0 g·kg-1植物提取物的饲料,检测其对凡纳滨对虾生长、消化酶及免疫因子的影响.结果显示,实验第29天:第2组的特殊生长率、饲料系数和蛋白质效率比显著大于对照组(P0·05).实验第58天:第2组的日生长速度与对照组差异极显著(P0.05);第2组的超氧化物歧化酶活性与对照组差异显著(P相似文献   

有机污染对中国对虾体内外环境影响的研究

于１９９４－１９９５年分二批人工配合饵料作为有机污染源，进行有机污染对中国对虾体内外环境影响的研究，结果表明：１．经１０ｄ，试验池水中的ＤＯ含量明显降低，而ＣＯＤＮＨ３－Ｎ，ＮＯ２－Ｎ等迅速增加，分别是对照的２．５，２．１，１１．３倍，Ｈ２Ｓ含量轻２８ｄ后为对照组２．１倍，同时，试验组各菌群的密度也分别比对照组增加２－３个数量级，２．试验且虾的超氧化物歧化酶，酚氧化酶及溶菌酶的活性比对照组显著下降     

免疫多糖对养殖南美白对虾作用的研究

于１９９５年６月在威海市水产开发公司对虾育苗场采集南美白对虾,经暂养后,选取体长６－７ｃｍ的个体,利用由海藻中提取的与微生物多糖有类似结构和性质的免疫多糖作为饵料添加剂,以口服形式对南美白对虾进行免疫,刺激其免疫系统。     

饲料添加多维对花鲈生长、非特异性免疫指标及消化酶活性的影响

本试验旨在研究饲料中不同水平的多维含量对花鲈（Lateolabrax japonicus）生长性能、非特异性免疫指标及消化酶活性的影响。以初始体质量为（38.54±0.05） g的花鲈为试验对象,随机分为6组（每组3个重复,每个重复30尾鱼）,基础饲料中分别添加不同水平（0.5%、1%、2%、3%、4%、5%）的多维,在室内循环养殖系统中饲喂28 d。结果表明:多维添加量对花鲈的体成分、存活率、肝指数、饲料系数和肥满度均没有显著影响（P>0.05）;当多维添加量为2%时,花鲈的增重率（WGR）和特定生长率（SGR）均最大,与多维添加量为2%相比较,随着多维添加量继续增多,花鲈的WGR和SGR显著降低（P<0.05）;当多维添加量为5%时,花鲈的肠蛋白酶活性较0.5%和1%添加量组显著提高（P<0.05）,而多维添加量为0.5%时,花鲈的肠淀粉酶活性显著高于其余任意一组（P<0.05）,各组之间肠脂肪酶活性无显著差异（P>0.05）;与多维添加量为0.5%相比,多维添加量为5%时,能够显著提高花鲈血清中超氧化物歧化酶、碱性磷酸酶活性以及血清中总蛋白含量（P<0.05）,而血清溶菌酶活性没有显著变化（P>0.05）。结果表明:饲料中添加多维含量为5%时,能够明显提高花鲈的非特异性免疫指标及肠道蛋白酶活性,而在含量为2%时,能够明显提高花鲈的生长性能。