注射外源激素对养殖雄性牙鲆精巢发育的影响

雄性牙鲆在人工养殖条件下,1年可达到性成熟,精巢属于典型的叶型结构。生殖细胞经历了精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子5个发育阶段;精小叶间存在Leydig细胞,小叶内存在Sertoli细胞。牙鲆精子属于原始类型,可明显地区分为头部、中段和尾部,与大多数硬骨鱼类相似;精子头部无顶体,其内含有大小不等的囊泡,尾部具有典型的“9 2”结构。注射外源LHRH-A2或hCG,对牙鲆的精巢发育和排精没有起到促进作用,可能是由于一次注射的外源在血液内很快被清除,或操作胁迫使血浆皮质醇含量升高抑制了下丘脑-垂体-性腺轴的正常功能。建议在进行牙鲆人工催产时,最好采用激素埋植法,在对亲鱼进行操作时,应将其麻醉,增加激素的作用效果。     

环沟格特蛤生化成分的周年变化

周年逐月采集环沟格特蛤（Ｋａｔｅｌｙｓｉａｒｉｍｕｌａｒｉｓ）,分别测定软体部、性腺、足肌和消化腺的蛋白质、脂肪、糖的含量,并测定性腺甾类激素和以细胞磷推算的ＤＮＡ和ＲＮＡ含量。结果表明,其蛋白质和脂肪含量的变化与性腺发育周期一致,糖的变化与蛋白质和脂肪相反,提示该种蛤在性腺生长周期糖类向蛋白质和脂肪转化,并且随着性腺的发育,消化腺和足肌的蛋白质和脂肪转运到性腺。环沟格特蛤的甾类激素、ＤＮＡ和ＲＮＡ的含量变化与蛋白质及脂肪的含量变化有一致性,提示甾类激素是促进性腺蛋白质合成的内因之一。     

无鱼粉日粮条件下黄颡鱼生长性能和肝胰脏转录组差异表达的研究

本研究以黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)为试验对象,设计两种饲料:鱼粉组和无鱼粉组,在池塘网箱中投喂70 d,研究其生长性能和肝胰脏转录组表达的差异。同鱼粉组相比,无鱼粉组黄颡鱼特定生长率下降了30.25%(P0.05),饲料系数显著增加了83.94%(P0.05),全鱼脂肪含量显著下降(P0.05),血清甘油三酯含量显著下降(P0.05),血清转氨酶活力显著增加(P0.05)。肝胰脏转录组结果显示,总计有12 020个基因差异表达,其中差异表达上调的基因有5 020个、差异表达下调的基因有7 000个。同鱼粉组相比,无鱼粉组分别有1 013个基因表达显著上调、2749基因表达显著下调(P0.05)。将组间具有差异表达的基因进行GO Term、KEGG pathway分类,结果显示:无鱼粉组的肝胰脏细胞组成、细胞生物过程、细胞分子功能等绝大多数基因差异表达下调,提示肝胰脏的细胞组织结构和功能受到很大的影响;KEGG通路富集到15个显著差异代谢通路。本研究结果表明,日粮中鱼粉可能含有某些生理活性物质,这些物质以神经分泌、激素调控、代谢信号通路等为作用靶点,通过对这些代谢信号通路的调节,对鱼的整体生理代谢强度、细胞结构与功能、生理健康状态等产生明显积极促进影响。缺乏这些物质则会造成黄颡鱼生长性能下降、部分器官组织细胞(肝细胞、神经轴突)受到损伤、鱼体抗应激能力和免疫防御能力下降。     

海湾扇贝促性腺激素释放激素基因克隆及表达分析

促性腺激素释放激素(Gonadotropin Releasing Hormone,GnRH)是脊椎动物下丘脑-垂体-性腺轴的关键信号分子。近年来的研究显示,GnRH也存在于贝类等无脊椎动物,且在雌雄异体性别分化与繁殖中起重要作用,然而雌雄同体贝类GnRH的研究仍处于空白。本文以海湾扇贝为研究对象,利用RACE技术克隆获得GnRH的cDNA全长序列,该基因长1335 bp,编码101个氨基酸,前体包含1个由24个氨基酸组成的信号肽以及1个具有酰胺化修饰的活性肽(QNFHYSNGWQP-amide)。GnRH在脑足神经节和脏神经节中均有表达,且在2015年10月-2016年1月,GnRH在脑足神经节中的表达量显著高于脏神经节(P<0.05);GnRH在两个神经节中的表达均呈现先上升后下降的趋势,峰值出现在11月份,推测可能与性腺发育启动有关。本研究为深入理解GnRH在贝类繁殖调控中的作用奠定了基础。     

菲律宾蛤仔GnRH基因沉默对其性激素合成酶基因表达的影响

为了探究菲律宾蛤仔(Ruditopes philippinarum)GnRH基因沉默对其性激素合成酶表达的调控作用,本研究首先根据菲律宾蛤仔GnRH cDNA序列,优化设计并合成了2条dsRNA,进行了作用时间、作用浓度的筛选。研究显示,30μg/50μL的GnRH-ds1干扰链注射到实验动物血腔后48 h,菲律宾蛤仔脏神经节中GnRH基因表达量较PBS组下降了73.3%,较阴性对照组下降了71.4%,达到了对菲律宾蛤仔体内GnRH基因表达的抑制作用。对性腺发育增殖期的菲律宾蛤仔进行dsRNA注射后48 h,采用荧光定量PCR测定了对照组和GnRH表达沉默组菲律宾蛤仔性腺中性激素合成相关基因CYP17、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)和17β-HSD的mRNA表达量,发现在GnRH沉默组的菲律宾蛤仔性腺中3β-HSD的表达量与对照组相比无显著变化,而CYP17和17β-HSD的表达量与空白对照组和阴性对照组相比分别下降了86.3%和84.9%(p0.05)。实验结果初步说明菲律宾蛤仔体内GnRH可能通过调控其性腺中CYP17、17β-HSD的基因表达而影响性激素的合成并调控生殖发育。     

福建牡蛎17β-HSD基因的克隆及生殖周期表达

17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-Hydroxysteroid dehydrogenase,17β-HSD)能够还原17-酮类固醇或者氧化17β-羟基类固醇,可以催化雄烯二醇和睾酮、雌酮和雌二醇、雄烯二酮和二氢睾酮之间的相互转化。本实验基于分子克隆的方法获得了福建牡蛎(Crassostrea angulata)类固醇激素合成相关酶基因17β-HSD的全长序列(全长1149bp),可编码307个氨基酸。通过实时定量PCR(qRT-PCR)技术研究了该基因在福建牡蛎中的时空表达特征,该基因在牡蛎大多数组织中(性腺、闭壳肌、外套膜、鳃和内脏团)均有表达,其中在性腺中表达量最高(p<0.05),且在生殖周期的排放期出现较高的表达量。原位杂交结果显示该基因在卵巢滤泡细胞中表达。讨论了其在牡蛎性类固醇激素合成过程中的作用,为阐明牡蛎具有内源性类固醇激素的合成能力奠定基础,为进一步研究牡蛎生殖内分泌机理提供参考。     

裙带菜（Undaria pinnatifida）雌诱激素在有性生殖过程的作用及影响其分泌的环境条件

以大型经济褐藻裙带菜配子体为实验材料,采用活性检测法对雌诱激素在有性生殖过程中的作用进行了研究。结果表明,刚刚排出的雌配子分泌了一种或几种易挥发的激素类物质,这些激素类物质能够促进精子释放并吸引精子向其游动,完成受精作用。另外,通过显微计数释放精子数的方法对影响裙带菜雌诱激素分泌的培养时间和培养的光照强度、环境温度、光...     

条石鲷促性腺激素α亚基的克隆与表达特性分析

采用同源性克隆和cDNA末端快速扩增(RACE)方法,从条石鲷(Oplegnathidae fasciatus)垂体中获得了全长为897bp的GtHαcDNA序列,其中包含249bp的5′非编码区、399bp的开放阅读框和249bp的3′非编码区。该基因编码由132个氨基酸组成的前体蛋白,其中前38个氨基酸为信号肽,在第122和124Cys中间间隔了一个组氨酸(His),形成CXC型趋化因子的特征结构,肽链中包括10个保守Cys残基和2个N-糖基化位点。氨基酸同源性和进化分析表明,条石鲷GtHα与鲈形目鱼类的进化关系较近,与鲈形目鱼类GtHα的同源性为87%~98%,与其他脊椎动物GtHα的同源性为53%~87%。实时荧光定量PCR检测发现,GtHαmRNA在垂体、脑、性腺中的表达量较高,在心、肝脏、胃、肠、肌肉、幽门盲囊中微量表达,在脾脏、头肾、鳃、肾脏中不表达,其中在垂体中的表达量最高;周期表达发现:垂体中GtHαmRNA在卵巢发育的Ⅴ期达到最大值,卵巢中GtHαmRNA在卵巢发育的Ⅳ期达到最大值,而脑组织中GtHαmRNA在卵巢发育的Ⅴ期达到最低值,表明GtHα对卵母细胞发育的调控可能同时通过自分泌和旁分泌两种途径进行。本研究为条石鲷生殖调控机制及人工繁育技术研究提供了基础资料。     

海水和淡水适应过程中广盐性鱼类鳃氯细胞的形态与功能变化及其激素调节

广盐性硬骨鱼能够在盐度变化很大的环境中生存。淡水渗透压约为０．１×１０-３渗ｍｏｌ／ｋｇ,海水的渗透压约为１０００×１０ -３渗ｍｏｌ／ｋｇ［７］,而硬骨鱼体内的渗透压为２５０×１０-３～５００×１０-３渗ｍｏｌ／ｋｇ，因此 ,在高渗环境下 ,鱼会丢失水分 ,而当通过肠道大量吸收水分的同时又会有许多盐分随之进入体内 ,此外 ,高渗环境中各种离子也会通过鳃和皮肤被动地扩散到体内。鱼体内过多的盐分会被鳃等渗透调节器官排出体外 ,从而达到水和离子的平衡。相反 ,在低渗环境中 ,鱼会丢失盐分 ,同时又有水分扩散到体内 ,此时除了…     

温室辣椒果实生长及内源激素含量对外施α-萘乙酸钠的响应

为明确α-萘乙酸钠（α-NaNAA）对辣椒果实生长的调控作用,以陇椒2号为试验材料,研究了荒漠区日光温室辣椒果实生长及内源激素含量对α-NaNAA的响应。结果表明:喷施不同浓度的α-NaNAA能显著增加辣椒果实长度、果实直径、果皮厚度、单果重和干物质积累速率。与对照相比,喷施α-NaNAA加快了果实前期的生长速率,缩短了果实的生长期,处理后20～30 d是辣椒果实迅速增大的时段;提前了果实干重快速增大的开始时间,延缓了结束时间,使果实干重显著增大,而且以35 mg·L-1浓度效果更显著;在辣椒果实的单果重相同时,使果实的成熟期提前10 d左右。喷施α-NaNAA显著增加了辣椒果实的脱落酸（ABA）、赤霉素（GA）和玉米素（ZR）含量,而对吲哚乙酸（IAA）平均含量没有显著影响。分析表明,辣椒果实的单果重与果实生长期中ABA、GA、IAA和ZR的平均含量水平呈显著正相关。