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克隆分离了长石莼(缘管浒苔)光合作用第一关键酶Rubisco大亚基全长基因(rbcL)。首先应用PCR和RT-PCR方法扩增rbcL大片段DNA序列和大片段cDNA序列,结果表明,获得的2个克隆序列完全相同,该rbcL大片段基因不存在内含子。其次应用基因步移方法分别对rbcL基因的5′上游未知序列和3′下游未知序列进行扩增,在此基础上,将3个片段序列进行拼接,获得了rbcL全长基因序列(NCBI登陆号:DQ813497)。序列全长2124bp,其中编码区序列长1425bp,为单外显子基因,编码474个氨基酸;5′非翻译区序列长225bp,转录起始位点为位于翻译起始密码子ATG上游第47个核苷酸G,在距离转录起始位点-9bp—-48bp的范围内有推测的类似原核生物的启动子序列(-10区:TAAAAT、-35区:TTGAAA);3′非翻译区序列长474bp,在距离转译终止密码子TAA下游54—98bp处有一段较长的回文序列,可形成一个22bp的茎结构。密码子偏好性分析结果表明,长石莼(缘管浒苔)rbcL基因偏向使用第三位核苷酸碱基为A和T的密码子。 相似文献
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The spatial distribution of ammonia-oxidizing Betaproteobacteria ( β AOB) was investigated by FISH (fluorescence in situ hybridization) and DGGE (denaturing gradient gel electrophoresis) techniques in the sediment off the Changjiang River Estuary.Sediment samples were collected from eight stations in June before the formation of hypoxia zone in 2006.The abundance of β AOB ranged from 1.87 × 10 5 to 3.53 × 10 5 cells/g of sediment.β AOB abundance did not present a negative correlation with salinity,whereas salinity was implicated as the primary factor affecting nitrification rates.The DGGE profiles of PCR-amplified amo A gene fragments revealed that the β AOB community structure of sample S2 separated from other samples at the level of 40% similarity.The variations in composition of β AOB were significantly correlated with the salinity,temperature,absorption ability of sediments and TOC. The statistical analysis indicates that the β AOB abundance was a main factor to influence nitrification rates with an influence ratio of 87.7% at the level of 40% biodiversity similarity.Considering the good correlation between β AOB abundance and nitrification estimates,the abundance and diversity of β AOB community could be expected as an indirect index of nitrification activity at the study sea area in summer. 相似文献
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日本七鳃鳗外周血细胞显微结构及类淋巴细胞体外培养 总被引:1,自引:0,他引:1
以日本七鳃鳗(Lampetra japonica)为研究对象,观察其外周血细胞显微结构和探讨类淋巴细胞原代培养条件。采用Wright氏和Giemsa氏染色法对日本七鳃鳗外周血液有形成分进行显微观察,可鉴别出红细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞;未发现嗜碱性粒细胞。通过Ficoll密度梯度离心法和流式细胞仪分选获得高纯度的七鳃鳗类淋巴细胞。经条件优化后确定最适培养液L15+20%FBS(5%七鳃鳗血清)+0.46%NaCl,在18℃,pH 6.8-7.0的条件下对日本七鳃鳗类淋巴细胞进行体外培养,大多数类淋巴细胞半贴壁生长,细胞状态较好,最长可以存活近一个月。类淋巴细胞的原代培养为日本七鳃鳗细胞体外培养的深入研究提供了实验依据。 相似文献