一株海洋放线菌发酵液抗肿瘤活性初探

用四氮唑蓝(MTT)法对96株海洋放线菌、细菌、真菌的发酵液进行细胞毒活性的筛选,结果显示13%的放线菌和3%的细菌发酵液具有细胞毒活性.其中放线菌ACMA006具有显著细胞毒活性,而且能抑制多种肿瘤细胞的生长.进一步用DNAladder电泳分析和荧光染色法观察到放线菌ACMA006发酵液能明显诱导肿瘤细胞凋亡.这株具有抗肿瘤潜力的放线菌ACMA006值得进一步开发研究.     

放线菌对旱区露天煤矿排土场红豆草根系生长及根际土壤肥力的影响

针对旱区露天煤矿排土场土壤退化问题,采用高效放线菌菌剂接种及原位盆栽试验,探究了放线菌对新疆黑山露天煤矿排土场红豆草根系生长及根际土壤肥力的影响。结果表明:(1) 干旱条件下,放线菌接种可显著促进红豆草根系形态发育及生长。与对照相比,接种放线菌红豆草总根长、平均根系直径、根表面积及根总体积较不接菌对照均显著增加(P<0.05);根鲜重、茎叶鲜重及总鲜重较对照分别增加了77.24%、130%及103.49%。(2) 接种放线菌显著增强了红豆草的抗旱性。接菌根谷胱甘肽、脯氨酸含量和根系活力分别增加了35.36%、229.23%和363.75%,降低了丙二醛含量和根细胞质膜透性。(3) 接种放线菌显著提高了红豆草根际土壤肥力。供试放线菌在红豆草根际土壤中定殖量为2.5×105 cfu/g,接种后红豆草根际土壤细菌和放线菌总数较对照分别增加了113.7%和563.64%;根际土壤多酚氧化酶、脲酶及碱性磷酸酶活性较对照均达显著性增加(P<0.05);进而显著提高了根际土壤全氮、有效磷和速效钾含量,其中土壤全氮增加量最大。(4) 相关分析表明,红豆草根生物量与根际细菌和放线菌数量、土壤脲酶活性、碱性磷酸酶活性及全氮含量呈显著正相关(P<0.01)。结果证实了土壤接种放线菌通过增强植物的抗旱性,提高根际土壤微生物数量、酶活性及肥力水平,显著促进植物根系发育及生长,为旱区煤矿植被恢复及退化土壤改良提供了科学依据。      

南麂岛海洋沉积物中抗大黄鱼(Pseudosciaena crocea)致病弧菌的放线菌分离和筛选研究

采用平板涂布法从南麂岛近海海洋沉积物样品中分得86株放线菌,用琼脂块法和杯碟法结合筛选出对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、哈维氏弧菌(V.harveyi)两种大黄鱼病原性弧菌具有不同拮抗作用的海洋放线菌5株,其中编号NJR0956的菌株对两种致病菌的抑菌圈直径均25mm,表现出较强的抑制作用;进而测定了5株活性菌株的抗菌谱。结果表明,它们对指示菌中的副溶血弧菌、哈维氏弧菌、鳗弧菌(V.anguillarum)、溶藻弧菌(V.alginolyticus)四种病原弧菌均具有较好的拮抗作用;在对NJR0956的抑菌效果研究中发现,该菌株在牛肉膏蛋白胨液体培养基中不仅能够增殖,而且能够有效地抑制病原菌的生长。     

海洋微生物培养新技术的研究进展

海洋占地球表面的70%以上,海洋微生物生活于海洋这一特殊的生境中,演化出了许多独特的代谢能力,能产生大量陆地微生物所不具备的天然活性物质 [1].     

厦门西港西南部潮间带光滩土壤微生物的数量变化

研究了厦门西港西南部潮间带无植被滩涂土壤三大类群微生物的数量,结果表明光滩土壤中平均总菌数为18．4×104个/g(dry),细菌、放线菌和丝状真菌平均数量分别为17．4×103、10.1×103和2．1×101个/g(dry),分别占总菌数的94．53％、5.45％和0．02％;不同位点的总菌数及细菌、放线菌、丝状真菌的数量与它们所占总菌数的百分比存在着差异,这与不同位点的土壤有机质含量、N含量和受污染干扰的程度相关,数量特征可作为环境监测的生物学指标之一;放线菌和丝状真菌的数量与土壤盐含量有关,放线菌在低盐份下的培养数量多、生长好,高盐份胁迫可能是丝状真菌数量少的原因之一。     

海洋真菌及其活性物质的研究概况

海洋微生物种类繁多，是筛选新药的丰富资源宝库。陆地真菌是仅次于放线菌的多产抗生素的微生物类群，而海洋真菌正在成为海洋药源微生物研究的新热点。海洋真菌产生的生物活性物质已经引起研究者的关注，并将成为海洋药物的重要来源。本文结合国内外文献报道，阐述了海洋真菌及其活性物质的研究情况。     

高效溶藻放线茵BS01发酵培养基及发酵条件优化

从漳江口红树林区采集的沉积物样品中分离到1株放线菌菌株BS01 Brevibacterium sp.,其胞外活性产物对塔玛亚历山大藻Alexandrium tamarense具有明显的溶藻作用.采用单因素及均匀设计,通过摇瓶培养对BS01产溶藻活性物质的发酵培养基及发酵条件进行优化.结果表明,在可溶性淀粉为碳源、硝酸钠为氮源、装液量为40%、起始pH值为7.5、培养温度为28℃、转速为150r·min-1、振荡培养时间为48h的条件时,BS01发酵产物的杀藻活性最强.通过均匀设计进行最佳发酵培养基及培养条件优化的结果为:可溶性淀粉为20g·L-1,硝酸钠为0.5g·L-1,pH为7.7,温度为27.2℃.研究结果为杀藻活性物质高效提取及杀藻机制研究奠定了基础.     

Distribution and generic composition of culturable marine actinomycetes from the sediments of Indian continental slope of Bay of Bengal

Actinomycetes population from continental slope sediment of the Bay of Bengal was studied. Samples were collected during two voyages of FORV Sagar Sampada in 2004 （May-June） and 2005 （July） respectively from 11 transects （each transect had ca. 200 m, 500 m, and 1 000 m depth stations）. The physicochemical parameters of overlying water, and sediment samples were also recorded. The actinomycete population ranged from 5.17 to 51.94 CFU/g dry sediment weight and 9.38 to 45.22 CFU/g dry sediment weight during the two cruises respectively. No actinomycete colony was isolated from stations in 1 000 m depth. Two-way analysis of variance showed significant variation among stations （ANOVA two-way, P〈0.05）, but no significance was found between the two cruises （ANOVA two-way, P〈0.05）. Populations in stations in 500 m depth in both cruises were higher than that of 200 m depth stations with statistically insignificant difference （ANOVA two-way, P〉0.05）. Three actinomycetes genera were identified. Streptomyces was found to be the dominating one in both the cruises, followed by Micromonospora, and Actinomyces. The spore of Streptomyces isolates showed the abundance in spiral spore chain. Spore surface was smooth. Multiple regression analysis revealed that the influencing physico-chemical factors were sediment pH, sediment temperature, TOC, porosity, salinity, and pressure. The media used in the present study was prepared with seawater. Thus, they may represent an autochthonous marine flora and deny the theory of land runoff carriage into the sea for adaptation to the salinity of the seawater and sediments.     

琼东海域珊瑚共附生放线菌的多样性

应用免培养方法与可培养方法相结合的方式对琼东海域6种珊瑚样品中的共附生放线菌进行研究,具体为滨珊瑚(Porite)、扁脑珊瑚(Platygyra)、角蜂巢珊瑚(Favites)、盔形珊瑚(Galaxea)和鹿角珊瑚(Acropora).免培养方法中,利用放线菌特异性引物对样品总DNA进行16S rRNA基因序列扩增,并将扩增产物进行Miseq高通量测序,测序结果分析表明,6种珊瑚样品中的放线菌序列属于37个分类单元,主要分布在酸微菌目、棒杆菌目、微球菌目、丙酸杆菌目和假诺卡式菌目,其中37.8%的分类单元与已有效发表菌株的序列相似性小于97%,可能代表着放线菌新的类群.可培养方法中,通过6种培养基分得137株放线菌,分属于放线菌门放线菌纲5个目11个科下的20个属,优势类群为分枝杆菌属(Mycobacterium)、考克氏菌属(Kocuria)和微球菌属(Micrococcus),其中放线孢菌属(Actinomycetospora)、柠檬球菌属(Citricoccus)和涅斯捷连科氏菌属(Nesterenkonia)是第一次从珊瑚样品中发现;琼东海域珊瑚共附生放线菌多样性丰富,新类型的放线菌资源挖掘潜力比较大.     

南麂岛海域沉积物中海洋放线菌的分离研究

采用稀释涂板法研究了南麂岛海域沉积物中海洋放线菌的分离技术,分析了真空干燥处理、热处理、海水浓度、培养基种类等因素对分离效果的影响;首次将羧甲基纤维素钠(CMC)溶液应用于海洋沉积物样品的预处理,探讨了不同浓度的CMC对海洋沉积物样品中放线菌分离结果的影响。结果表明:海洋沉积物经干燥处理、50℃热处理20 min均能有效地减少细菌数量,利于海洋沉积物中放线菌的分离;60%的海水配制的培养基对海洋放线菌的分离效果优于纯海水所配培养基,并且培养基中添加海泥浸出液能有效地增加海洋放线菌的出菌率;以质量浓度为2 g/L的CMC为分散剂时,不仅能良好地分散沉积物样品中的放线菌孢子,而且能明显地增加海洋放线菌的检出量及稀有放线菌的数量。