法螺G型溶菌酶重组蛋白的原核表达及抑菌活性探究

G型溶菌酶(G-type lysozyme,G.lys)是一种富含半胱氨酸的天然免疫因子,在无脊椎动物的免疫防御过程中起重要作用。本研究旨在通过揭示法螺(Charonia tritonis)G型溶菌酶(CtG.lys)重组蛋白的抑菌功能,为进一步认识法螺的分子免疫机理及病害防治提供新思路。首先对CtG.lys序列进行了分析,利用实时荧光定量PCR检测CtG.lys的组织分布,然后以pGEX-4T-1为表达载体,构建重组质粒pGEX-4T-1-CtG.lys,进行重组蛋白表达,并检测了重组蛋白的抑菌活性。结果显示:1)CtG.lys cDNA的5''非翻译区(UTR)为66bp,3''UTR为186bp,开放阅读框为789bp,编码262个氨基酸,有1个可溶性转糖苷酶(SLT)结构域(72~255aa),包含6个半胱氨酸残基和3个酶活性催化位点(Glu⁷²、Asp⁸⁵、Asp⁹⁶);2)多序列比对及系统发育分析表明,CtG.lys与亲缘关系较近的福寿螺G型溶菌酶氨基酸的同源性最高;3)CtG.lys在所有被检测组织中均表达,其中在肝脏、外套膜表达量较高;4)16℃,0.5mmol/L IPTG诱导表达10h后,重组蛋白在上清液和包涵体均表达分子量约为51.91kDa,纯化后得到浓度为1.2mg/mL的重组蛋白;5)抑菌实验表明,重组蛋白pGEX-4T-1-CtG.lys具有抗金黄色葡萄球菌Staphyloccocus aureus、藤黄微球菌Micrococcus luteus、施罗氏弧菌Vibrio shilonii的活性,对革兰氏阳性细菌的抑菌作用大于革兰氏阴性细菌。研究结果为进一步解析法螺免疫防御的分子机理提供了参考数据和科学依据。     

嗜琼胶华美菌芳基硫酸酯酶的克隆表达及在琼胶脱硫中的初步应用

芳基硫酸酯酶具有断裂硫酸酯键的功能,并可应用于酶法脱除琼胶上的硫酸基,提高凝胶强度,改善琼胶性能.为了发掘能用于琼胶脱硫的新型芳基硫酸酯酶,本研究根据嗜琼胶华美菌(Formosa agariphila)KMM 3901的基因组注释信息,筛选出了一段芳基硫酸酯酶编码序列OUC-FARS6,并在大肠杆菌中对其进行异源表达,研究该酶的酶学性质,初步探究其在琼胶脱硫中的作用.研究表明,该酶的分子量大小为63 kDa,以对硝基苯硫酸酯(pNPS)为底物反应90 min时的最适温度为45℃,最适pH为9.0.Na+和K+对酶活有促进作用,大部分金属离子、SDS和Na2 EDTA都可抑制该酶酶活.动力学结果显示,该酶的Km值为32.63μmol/L,Vmax值为9.25μmol/(L·min).将琼胶与该芳基硫酸酯酶共同孵育后,琼胶内部空隙变小,呈现出较好的空间网状结构.本研究成功发掘了一个新型芳基硫酸酯酶,该酶具有应用于琼胶脱硫的潜力,同时建立了利用该酶进行琼胶脱硫的催化体系.     

岩性物性联合反演系统设计与实现

本文介绍了岩性物性联合反演软件系统的功能需求、设计和实现,并按功能将系统分成6个部分:工区管理、多格式数据采用了统一的存取、模块添加机制、现场保留、参数定义和地震数据可视化.根据不同模块的需求,研究了混合语言编程,设计了不同算法模块在系统中的挂接方式,并通过几个已有模块进行了检验和应用.本研究成功地应用数据工厂的方法实...     

地理分析导向的虚拟地理环境：框架、结构与功能

针对目前虚拟地理环境侧重表达、忽略地理分析的现状,从现代地理学研究与发展前沿需求出发,探讨了可支撑地理分析与模拟的虚拟地理环境的框架、结构与功能.围绕虚拟地理环境的构建理论和实现技术,分析了面向地理分析的虚拟地理环境的建设目标,构建了虚拟地理环境整体框架;将虚拟地理环境分为数据环境、建模环境、表达环境与协同环境四个子环境,深入解析了各子环境的功能、关键技术与研究思路,为虚拟地理环境进一步发展及虚拟地理环境平台研制与开发提供参考.     

基于地形数据库的地图产品开发中图例系统的设计与制作

在基于国家基础地理信息数据库生产国家基本比例尺地形图数据产品的过程中,图例系统的设计和制作是重要的基础工作.在实践的基础上,总结出图例系统的设计思想、处理技巧、关键技术、实现方法等,并在1:50000地形图制图数据生产中得到了很好的检验.     

点群多尺度表达不确定性评估方法研究

空间数据的不确定性评估是保证数据质量的重要手段.由于点群多尺度表达的不确定性非常复杂,评价指标和评估模型是点群多尺度表达不确定性评估需要亟待解决的关键问题.本文围绕点群的多尺度表达和空间分析流程,确立了点群多尺度表达不确定性的评估内容为位置不确定性和空间分析结论的不确定性,建立了点群及其多尺度表达位置不确定性的评价指标...     

期刊博览

互联网地图搜索引擎的模糊评价与可视化分析 随着信息时代步入“服务”时代,地图不再是单纯反映地理环境的图形表达,而转为向公众提供位置信息等相关服务的视觉载体。其中,互联网地图搜索引擎整合了网络搜索引擎技术和在线地图平台,可按用户需求提供所匹配的兴趣点的方位、周边设施、实地景观以及交通路线路况等。     

多尺度陆地国界电子地图规范化表达技术研究

陆地国界电子地图中国界线的表示应该具有规范性.目前,我国还没有正式形成电子地图显示标准,电子地图中涉及到国界线的部分大多存在问题.文中研究多尺度陆地国界电子地图规范化表达技术,构建了9个尺度的我国陆地国界线标准画法电子地图,为我国陆地国界线在不同尺度电子地图上的规范化表达提供标准和依据.     

基于GIS技术的征地统一年产值标准测算方法

合理的征地统一年产值标准的测算方法是完善征地补偿机制和保护农民土地权益的基础和保障.通过遴选出具有代表性的修正因素和构建GIS空间聚类模型来优化修正和相关测算,并采用基于GIS的图、数、库一体化的数据组织方法,实现了征地统一年产值标准测算.测算结果体现了征地补偿的空间分布及差异规律,为征地统一年产值标准测算提供了新的思...