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壳聚糖酶基因在解脂耶氏酵母中的表达及重组酶性质研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为构建高效表达壳聚糖酶工程菌株,以Microbacteriumsp.基因组为模板扩增壳聚糖酶基因,目的基因与表达载体pINA1317连接构建重组质粒,重组质粒NotⅠ酶切线性化后转化解脂耶氏酵母Y.liPolytica Po1h。所得结果为PCR扩增得到约1000bp的特异性片段,序列分析表明含有壳聚糖酶全长基因,开放阅读框801bp,编码266个氨基酸残基。转化子酶活力为10.4U/mL,是原菌株酶活力的3.15倍。重组蛋白经DEAE-Sepharose FF分离纯化,达到电泳纯,SDS-PAGE显示单一条带,分子量约41kDa。重组酶反应最适温度为45℃,最适pH为5.6,Km和Vmax分别是0.926mg/mL和6.15U/mL。质谱分析酶解产物主要为三糖和五糖。实现了壳聚糖酶在解脂耶氏酵母中的分泌表达,为壳聚糖酶的工业化生产奠定了理论基础。 相似文献
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磷酸甘露糖异构酶基因(phosphomannose isomerase,PMI)编码磷酸甘露糖异构酶(PMI),可逆催化甘露糖-6-磷酸和果糖-6-磷酸之间的相互转化,在GDP-D-甘露糖的合成中起重要的作用,后者是生物体合成糖蛋白和糖脂必需的前体物质。本文根据在Genbank中已经登录的部分藻类PMI基因序列,与部分细菌、真菌、植物和动物的PMI基因序列做比较,研究其进化趋势和规律及其基因结构,为以后在大型藻类中研究该基因奠定基础。系统进化分析表明,藻类的PMI基因有2个进化方向,绿藻类的PMI基因与高等植物的进化趋势一致;而杂色藻类(硅藻和褐藻)则单独形成一个进化分支。多序列比对表明,磷酸甘露糖异构酶蛋白有3个保守区,其中有4个氨基酸残基位点是金属离子结合位点,分别为2个Glu和2个His。对部分藻类的PMI基因进行结构分析表明:在比较低等的藻类中,PMI基因没有内含子插入,而较高等的藻类中则有不同数目和长度的内含子插入。对部分藻类PMI基因的生物信息学分析结果显示,PMI基因编码的蛋白为酸性蛋白,分子量在40到60kDa之间;二级结构中均以α-螺旋和无规则卷曲为主;三级结构与二级结构相吻合。 相似文献
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基于二维水动力模型,在仅考虑潮流作用条件下,通过计算欧拉余流和拉格朗日余流并结合粒子追踪方法研究了辽宁大连—朝鲜龙渊郡连线北侧的北黄海北部海域的潮余流结构和粒子运移的趋势。结果表明:欧拉余流和拉格朗日余流流速整体较小,呈现由南向北的流向,但在獐子岛及长山群岛的附近岛屿和朝鲜半岛沿岸的海域欧拉余流和拉格朗日余流流速较大。对比粒子追踪计算的结果与欧拉余流和拉格朗日余流的结果表明,流向与粒子运移路径基本一致。该海湾的余流及粒子运动规律特点对辽东半岛东岸及朝鲜半岛西侧海域的排污及污染控制有重要的借鉴意义。 相似文献
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为了获取足够的目标信息,充分利用中波红外和长波红外的光谱信息,建立了谐衍射中、长波红外超光谱成像系统.利用谐衍射元件独特的色散特性,将谐衍射透镜应用于中、长波红外超光谱成像系统中,使系统在中波红外3.7—4.8 μm和长波红外8—12 μm的2个红外大气窗口内获取数百个光谱图像.设计结果表明,中波红外波段,在18对线/mm处光学系统的调制传递函数(MTF)大于0.55;长波红外波段,在13对线/mm处光学系统的MTF大于0.5;光学系统的衍射环绕能,在中波红外波段30 μm半径范围内大于85%,在长波红外 相似文献
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三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)作为重要的海洋经济动物,其常见体色(头胸甲)为茶绿色。近年来在我国沿海海域海捕三疣梭子蟹中开始出现体色为紫色的一类梭子蟹,除体色不同外,二者表型特征并无显著差异。对两种体色三疣梭子蟹不同个体的线粒体COI和16S rRNA基因进行了序列比对分析以判定二者之间的亲缘关系。结果发现COI和16S rRNA基因在两种体色三疣梭子蟹群体中的核苷酸序列一致性分别为99.87%和99.88%,表明紫色三疣梭子蟹并未发生亚种的分化,即紫色和茶绿色群体属于同一个种。并利用GenBank数据库检索了梭子蟹科其他15种海产蟹的16S rRNA序列,进行了序列同源性比对分析和分子系统学方面的探讨,为梭子蟹种属分类学研究提供分子依据。 相似文献
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三疣梭子蟹作为重要的海洋经济动物,其常见体色为茶绿色。近年来在我国东部沿海海域海捕三疣梭子蟹中开始出现体色为紫色的一类梭子蟹,除体色不同外,二者表型特征并无显著差异。为确定两种体色三疣梭子蟹之间的关系,本文对两种体色三疣梭子蟹不同个体的线粒体COl和16srRNA基因进行了比较分析以判定体色的差异是否由于种属的差异引起的。通过对以上两个基因部分序列的SSCP和相关序列测定分析,发现在紫色和茶绿色群体中这两个线粒体保守序列基因的SSCP电泳条带图谱相似,序列分析表明COl和16srRNA基因在两种体色三疣梭子蟹群体中的核苷酸序列相似度分别为99.81%和99.91%。以上结果表明,紫色三疣梭子蟹并未发生亚种的分化,即紫色和茶绿色群体属于同一个种。此外,紫色梭子蟹群体的线粒体DNA序列在进化关系上较茶绿色群体更为保守。 相似文献
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The economic development, living standard of residents and carbon emissions in Northwest China are lower than the national average. However,with the favorable policies the economic development is being improved and the household living standard is gradually raised up which will lead to an increase of the residents living carbon emissions, and the emission pattern will also be affected. This is detrimental to the fragile ecological environment of the Northwest China. At present, most of the researches on residents' carbon emissions are focused on the eastern and southern regions of China where there are frequent and significant human activities and high carbon emissions, and less attention has been paid to the northwest region, but the increase of carbon emissions and the increase of environmental costs have a more far-reaching impact on the less developed areas. In addition, when researchers pay attention to the prediction of residents' carbon emissions, they usually focus on the quantitative prediction and ignore the spatial pattern prediction, which is not conducive to the coordinated development between regions. Based on the data of energy consumption and consumption expenditure in the five provinces of Northwest China, including Shaanxi, Gansu, Qinghai, Ningxia and Xinjiang from 1997 to 2016, this paper firstly used the direct coefficient method to measure the residents' direct carbon emissions, and the input-output method to calculate the indirect carbon emissions of the residents and analyzes the present situation of residents' carbon emissions in the northwest region. Secondly, based on standard deviation ellipse and Autoregressive Integrated Moving Average Model, the carbon emissions of residents in Northwest China were predicted in terms of quantity and spatial pattern from 2017 to 2021. Major results are listed as follows: From 1997 to 2016, household carbon emissions in Northwest China showed a rising trend with an initial slow pace followed by a quick pace. The direct carbon emissions were stabilized in the range from 0. 3 × 108 t to 0. 4 × 108 t,and the indirect carbon emissions reached 2. 38 × 108 t. The spatial distribution of household carbon emissions in Northwest China was generally steady with a direction pattern from northwest to southeast. And the moving trend of standard deviation ellipse was from northwest to southeast to northwest, and the center of standard deviation ellipse moved around the point of (99. 07 °E,38. 19°N). From 2017 to 2021, the direct household carbon emissions in Northwest China reach to 0.543 × 108 t and the indirect carbon emissions are 3. 631 × 108 t by 2021. With the development of the western region in China and the promotion of poverty alleviation,Xinjiang Province had a lower emission than Shaanxi,but it had the higher growth rate than Shaanxi. These factors are all driving the main areas of carbon emission northwestward. The purpose of this paper is to recommend how to coordinate between the population and consumption and the environment, leading citizens to establish the value of low-carbon consumption. © 2019 Science Press (China). All rights reserved. 相似文献