产重组别藻蓝蛋白类荧光蛋白的重组大肠杆菌发酵条件的优化

对重组别藻蓝蛋白类荧光蛋白基因工程菌在装有150 mL液体培养基的250 mL摇瓶中的发酵条件进行优化.对起始pH值、接种量、诱导起始时间、诱导温度和时长以及IPTG浓度对重组荧光蛋白表达量进行了分析.结果表明,在装有150 mL液体培养基的250 mL摇瓶中,在起始pH值为7.5,6%接种量,培养温度为37℃,培养时长为3～5 h,诱导温度为22℃,IPTG浓度为0.2 mmol/L,诱导时长为7～8 h的条件下发酵重组别藻蓝蛋白类荧光蛋白,其表达量最高.     

红藻真江离质粒的发现

于１９９２年４月－１９９３年４月，用液氮研磨－苯酚／氯仿抽提－异丙醇沉淀的方法提取青岛沿海产紫菜，真江离，龙须菜，海膜４种红藻的总ＤＮＡ；利用Ｈｏｅｃｈｓｔ－ＣｓＣｌ密度梯度超离心法将叶绿体ＤＮＡ与核ＤＮＡ分开。对抽取的叶绿体ＤＮＡ梯度组分电泳结果表明，真江离样品出现质凿的电泳条带。以透射电镜观察到闭合环状ＤＮＡ图像；分子杂交结果显示，真江离质粒与其叶绿体ＤＮＡ之间没有同源性，而与核ＤＡＮ之间有一     

Erratum to: Molecular diversity of Enteromorpha from the coast of Yantai: a dual-marker assessment

<正>Erratum to:Chinese Journal of Oceanology and Limnology Vol.31 No.6,P.1210-1215,2013http://dx.doi.org/10.1007/s00343-013-3045-7The supporting grant information on the footnote of the original version of this article needs to be altered and updated.The new information is given below.     

一株高效褐藻酸降解菌的筛选、鉴定及其发酵条件的优化

以褐藻酸钠为唯一碳源,从腐烂海带中筛选得到褐藻酸钠降解能力较强的菌株H4,经生理生化和16S rDNA序列分析鉴定该菌株属于交替单胞菌属(Alteromonas)。对菌株H4的发酵条件优化研究表明,H4的较优培养基组成为(w/v):褐藻酸钠0.6%、酵母粉0.5%、蛋白胨0.25%、NaCl 3%;较优培养条件为:培养温度28℃,初始pH7.5,接种量1.5%(v/v),培养时间48 h。Fe3+对交替单胞菌H4的产酶有明显的促进作用,这在其他褐藻酸裂解酶生产菌株中未见报道,而Cu2+对褐藻酸裂解酶的抑制作用高达45.78%。在优化后的培养条件下,粗酶液酶活达到146.45 U/mL,较优化前提高了39.4%。     

Genetic transformation of marine cyanobacterium Synechococcus sp. CC9311 (Cyanophyceae) by electroporation

Synechococcus sp.CC9311 is a marine cyanobacterium characterized by type IV chromatic acclimation(CA).A genetic transformation system was developed as a first step to elucidate the molecular mechanism of CA.The results show that Synechococcus sp.CC9311 cells were sensitive to four commonly used antibiotics:ampicillin,kanamycin,spectinomycin,and chloramphenicol.An integrative plasmid to disrupt the putative phycoerythrin lyase gene mpeV,using a kanamycin resistance gene as selectable marker,was constructed by recombinant polymerase chain reaction.The plasmid was then transformed into Synechococcus sp.CC9311 via electroporation.High transformation efficiency was achieved at a field strength of 2 kV/cm.DNA analysis showed that mpeV was fully disrupted following challenge of the transformants with a high concentration of kanamycin.In addition,the transformants that displayed poor growth on agar SN medium could be successfully plated on agarose SN medium.     

响应面法优化酶法制备藻蓝蛋白抗氧化肽的实验研究

为优化碱性蛋白酶酶解藻蓝蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,采用响应面分析法,以超氧阴离子自由基清除率为响应值,研究了[E]/[S]、酶解温度和时间对制备抗氧化肽工艺的影响.结果表明,制备藻蓝蛋白肽的最佳酶解条件为:温度为44.9℃、时间为6.4 h和[E]/[S]为3.6%,此时对超氧阴离子自由基清除率达到75.39%.在该条件下制备的藻蓝蛋白酶解产物(0.5 g/L)还原能力的吸光度为1.03,并达到稳定.     

利用多功能裂合酶CpcE/F合成非天然重组藻胆蛋白

藻胆蛋白裂合酶是催化藻胆色素与脱辅基藻胆蛋白亚基共价连接的裂合酶,在藻胆蛋白的生物合成途径中发挥着重要作用。本实验以藻蓝蛋白裂合酶Cpc E/F为研究对象,采用基因工程组合表达技术,构建了pCDFDuet-apcA-cpcE/F-hox1-pebS、pCDFDuet-pecA-cpcE/F-hox1-pebS等重组质粒,并导入大肠杆菌中,在IPTG的诱导下,成功表达得到两种非天然藻胆蛋白ApcA-PEB和PecA-PEB,这表明Cpc E/F不仅可以催化藻蓝胆素和脱辅基藻蓝蛋白的结合,还可以催化藻红胆素(PEB)与别藻蓝蛋白α-亚基(ApcA)和藻红蓝蛋白α-亚基(PecA)的结合,因此是一种多功能的裂合酶。根据重组产物的光谱特征峰分析发现,ApcA-PEB和PecA-PEB作为两种非天然存在的重组藻胆蛋白,具有与对应天然藻胆蛋白有着相近的特征吸收光谱和荧光发射峰,但同时具有明显的波长偏移并伴有色素异化现象,其光谱学性质主要由其所携带的色素基团决定。另外,荧光寿命衰减分析发现,不同脱辅基蛋白对于重组藻胆蛋白的光谱稳定性具有重要的影响。     

海藻提取液对小油菜和韭菜生长、产量和品质的影响

采用温室大棚内露地种植的方式,研究了叶面喷施海藻提取液对小油菜和韭菜生长、产量及品质的影响。结果表明,海藻提取液能一定程度上促进小油菜和韭菜生长发育,提高小油菜和韭菜的产量,改善小油菜和韭菜的品质,其中海藻提取液稀释200倍处理对小油菜的增产效果最明显,稀释400倍处理对韭菜的增产效果最明显,可明显提高其光合色素含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量以及维生素c含量。     

基因工程与海洋药物研究

海洋药物的历史可以追溯到两千多年前,《黄帝内经》中记载有以乌贼骨为丸,饮以鲍鱼汁治疗血枯。《神农本草经》、《本草纲目》等收集的海洋药物达百余种。近30a来,海洋天然产物化学的研究取得了令人注目的成果,从种类丰富的海洋生物中分离出许多结构新颖、功能独特,具有抗肿瘤、抗病毒、抗菌、降压和抗凝血等生物活性的物质,使得海洋这一人类保健品的天然宝库更加引起世人的瞩目。与陆地生物相比,海洋生物往往具有许多独特的优点。不仅许多新颖的化学结构是陆地生物所不具有的,而且一种海洋生物常含有多种活性物质。如海绵中含有多种萜类、…