人工诱导雌核发育牙鲆的染色体及核型证明

于1994-1996年,分别在威海海洋渔业捕捞公司（石岛）和鸿洋实业总公司龙须岛育苗场采集人工培育的3－5龄牙鲆亲鱼,采用紫外线照射法使牙鲆精子遗传物质失活,并用冷休克法抑制受精卵第二极体释放,从而获得雌核发育二倍体牙好。原肠期采用空气干燥法、Giemsa染色,得到雌核发育二倍体、正常二倍体及单倍体的染色体制片,进行染色体和核型的分析。结果表明,牙鲆的雌核发育二倍体和正常二倍体的染色体数均为2n=48,核型为48t,即48条端部着色点染色体,臂数NF=48,两者的核型设有明显差异;单倍体为24条端部着丝点染色体;在3个组别中,第一号染色体上都有一明显的次缢痕。雌核发育二倍体牙鲆的诱导率为98％。     

鱼类性别决定与分化相关基因研究进展

在脊椎动物系统进化中,鱼类处于承前启后的关键地位.与高等脊椎动物相比,鱼类的性别决定机制具有原始性、多样性和易变性,并具有所有脊椎动物的性别决定方式,存在从雌雄同体到雌雄异体的各种性别类型,性逆转在鱼类也是较为常见的现象,因此鱼类性别决定机制研究对于整个脊椎动物类群性别决定机制的形成及进化途径的揭示有非常重要的理论价值.而且鱼类的性别发育是以遗传因素为基础,并受到自身内分泌调节和外界环境的影响,是三者相互作用的结果,故其性别决定与分化没有一个普遍的模式,给性别决定与分化研究带来了一定难度.但随着分子生物学技术的迅猛发展,近20年来有关鱼类性别决定与分化机理及性别相关基因的研究已经取得了相当大的进展.作者根据现有文献资料,对鱼类性别决定与分化相关基因的研究动态和进展作一综述,并对目前存在的热点问题进行了探讨,以期为今后鱼类性别决定与分化相关基因深入研究提供参考.     

文昌鱼胚胎整装荧光原位杂交技术的建立

文昌鱼(Branchiostoma belcheri tsingtauense)是进化发育生物学研究的重要模式生物,文昌鱼胚胎整装荧光原位杂交(WFISH,whole-mounted fluorescent in situ hybridization)技术将有助于鉴定文昌鱼胚胎发育过程中具有重要调控作用的功能基因。报告了文昌鱼胚胎整装荧光原位杂交技术,用以快速灵敏分析特定基因在文昌鱼胚胎发育过程中的时空表达图式。用体外转录合成的地高辛标记文昌鱼FGFR基因的反义RNA探针,检测到FGFR在文昌鱼原肠胚中表达于发生内陷的中内胚层细胞中,而预定发育为外胚层的细胞不表达FGFR。     

牙鲆sox9基因的克隆与表达研究

通过Genome walking方法克隆得到了牙鲆(Paralichthys olivaceus)sox9的基因组全长序列,对其在成鱼各组织的差异表达进行了RT-PCR分析.结果显示:牙鲆sox9基因全长3573 bp,包含3个外显子和2个内含子,编码的蛋白全长478 aa,含有高度保守的HMG结构域;sox9基因在性腺的表达具有两性差异,精巢中的表达明显强于卵巢中的表达,属1个性别相关基因,但其在肝脏、心脏、鳃、脑、眼和胃等多种组织中也有不同程度的表达.据此进一步分析和讨论等sox9基因在牙鲆性腺发育中的作用.     

我国海水养殖鱼类生物技术的前景展望

我国海水养殖业在经过了海带、对虾、扇贝三次养殖高潮后 ,目前正遭受病害的困扰。近年来 ,虾、贝类的大规模死亡时有发生 ,个别年份在个别地区甚至出现绝产的恶性事件 ,直接影响到我国水产业的发展。有关专家认为 ,从淡水养殖业的发展历史来看 ,直到淡水鱼类形成一定的养殖规模后 ,淡水养殖业才走向稳定发展的道路。因此 ,海水鱼类养殖业的兴起 ,必将带动整个海水养殖业的发展。搞好海水鱼类的养殖 ,必须依靠科学管理和科技进步 ,尤其是要利用生物技术手段 ,提高产品的附加值 ,并为我国养殖业的可持续性发展提供可靠的保障。在未来的５～１…     

牙鲆血清中免疫球蛋白M的分离及其测定

通过提取健康养殖牙鲆(Paraliehthys olivaceus)血清中的免疫球蛋白(Ig),并测定其相对分子质量,其中重链(H链)的相对分子质量为74．2ku,轻链(L链)的相对分子质量为23．8ku。用纯化的牙鲆血清中的Ig作抗原,制备多克隆抗体,确立牙鲆血清中免疫球蛋白的最佳测定方法。     

环境因子对牙鲆精子运动能力的影响

于1997年5-6月,在山东荣成市石岛养殖场采用挤压法收集牙鲆亲鱼的精子,利用显微镜观察精子的活力,研究外界环境因子的变化对牙鲆精子运动能力的影响。结果表明,将蔗糖、NaCl、KCl、MgCl2、CaCl2等溶解于去离子水中,制成不同浓度即具有不同渗透压的溶液,不同渗透压的溶液对精子运动的诱导结果不同。EDTANa2溶液不能诱导精子运动。在人工海水中加入一定量的EDTANa2后,可使原先运动的精子静止;在该溶液中加入新的Ca2 后,将不再诱导原来受到EDTANa2抑制的精子。如用MgSO4代替溶液中的CaCl2,可诱导精子运动;而当用MgCl2代替溶液中的CaCl2,以及用CaCl2或NaCl代替MgSO4时,溶液即失去诱导精子运动的能力。在pH＝4.0-9、5的海水中,牙解精子均可正常运动。     

口服重组鲑鱼生长激素促进牙鲆生长的研究

中国科学院海洋研究所开放研究实验室调查研究报告第１９３号;中国科学院海洋研究所调查研究报告第３４９２号。收稿日期：１９９８－０７－０３;修回日期：１９９８－０９－１８生长激素（Ｇｒｏｗｔｈｈｏｒｍｏｎｅ,ＧＨ）是脊椎动物腺垂体分泌产生的一种多肽激素,在动物的生长、发育等诸多生理活动中起重要的调节、控制作用。基因工程技术的发展,使大量廉价ＧＨ的获得成为可能,为外源性ＧＨ促进鱼类生长的生物技术奠定了坚实的基础,也开辟了新的思路。外源性ＧＨ通过注射或浸泡的方式均可有效促进养殖鱼类的生长［１］,但生产实…     

红藻真江篱质粒的发现

于1992年4月一1993年4月，用液氮研磨-苯酚／氯仿抽提-异丙醇沉淀的方法提取青岛沿海产紫菜、真江蓠、龙须菜、海膜4种红藻的总DNA；利用Hoechst－CsCl密度梯度起离心法将叶绿体DNA与核DNA分开。对抽取的叶绿体DNA梯度组分电泳结果表明，真江蓠样品出现质粒的电泳条带。以透射电镜观察到闭会环状DNA图像（周长平均值为4.3×10－7m，约为1．3kb）；分子杂交结果显示，真江蓠质位与其叶绿体DNA之间没有同源性，而与核DNA之间有一定同源性。     

假雄牙鲆不同组织中溶菌酶比活性的研究

溶菌酶（Ｌｙｓｏｚｙｍｅ）是鱼类非特异性免疫系统的重要组成部分。据Ｉｎｇｒａｍ１９８０年报道 ,溶菌酶能够破坏细菌的胞壁结构 ,增强由补体介导的溶菌作用 ,同时对真菌、寄生物以及病毒也具有破坏作用 ,因此 ,溶菌酶对于鱼类抵抗各种病原体的侵袭具有重要意义 ,了解溶菌酶在鱼体内的分布 ,有助于更好地了解鱼类抵抗各种疾病的机制。以往的实验对溶菌酶在鱼体不同组织中的分布研究得较少 ,对于牙鲆体内不同组织中溶菌酶活力的比较则未见报道。本实验以１ａ龄假雄牙鲆为实验材料 ,研究溶菌酶在不同组织中的分布 ,并初步比较其比活性的差…