浒苔多糖的分级纯化及保湿活性研究

用DEAE-Sepharose FF离子交换凝胶层析柱对浒苔(Enteromorpha)多糖进行分级纯化,利用HPLC色谱分析了单糖组成,并以甘油和透明质酸为对照,研究其吸湿和保湿活性。结果表明,浒苔多糖主要为葡萄糖醛酸-鼠李糖-木糖-甘露糖聚合物;浒苔多糖主要由两种组分组成,其一组分木糖和鼠李糖含量摩尔比为1.11:1,另一组分木糖和鼠李糖含量比为1:3.28;浒苔多糖具有与透明质酸相似的吸湿和保湿能力。     

絮凝剂-树脂联合法从琼胶中制备琼脂糖工艺研究

琼脂糖是一种具有高凝胶特性的天然高分子红藻多糖,具有良好的物理、化学和热稳定性,在医学和科研方面具有广泛的用途。在琼脂糖制备工业中,传统生产技术的局限性造成了国内琼脂糖尚未规模化生产。因此,有必要开发新的成本可控的琼脂糖制备方法。本文采用一种聚丙烯酰胺和弱碱性苯丙烯系阴离子交换树脂联用的方法来分离制备琼脂糖,以江蓠琼胶为原料,通过单因素试验优化琼脂糖的制备参数并对琼脂糖的理化指标进行测定。所得琼脂糖硫酸根含量为0.22%、凝胶强度为1 524 g/cm²、透明度为58.9%,凝固温度为39.7℃、融化温度为87.6℃,表明其具有相对较高的质量。该工艺简单经济,对发展琼脂糖工业具有一定的参考价值。     

海带中岩藻黄素异构体的分离纯化及其体外抗肿瘤活性研究

海带采用乙醇提取色素,通过柱层析分离纯化其中的岩藻黄素,并最终通过高效制备液相色谱制备了三种岩藻黄素的异构体。通过紫外光谱(UV)、核磁共振氢谱(1H-NMR)以及质谱(MS)对岩藻黄素及其异构体进行了结构表征和鉴定。采用乳腺癌细胞MDA-MB-231模型,对岩藻黄素的体外抗肿瘤活性进行了研究。结果表明,岩藻黄素对乳腺癌细胞生长有显著的抑制作用,其中13-顺和13′-顺岩藻黄素组分对癌细胞的抑制活性最强, IC50值达到23.71μg/mL。全反式岩藻黄素和9′-顺岩藻黄素两种异构体IC50值分别为45.30和27.09μg/mL。qPCR试验表明岩藻黄素各异构体可以通过抑制癌细胞NF-κB家族基因表达而抑制乳腺癌细胞生长。     

不同分子量的角叉菜(Chondrus ocellatus)λ-卡拉胶的抗氧化活性

从角叉菜中提取λ-卡拉胶,利用密闭微波法进行降解,得到5种不同分子量的产品:650、240、140、15、9.3kDa。红外、紫外和化学分析结果表明,这些卡拉胶样品具有相似的组成和结构,这表明微波法不会改变多糖的组成和结构。体外实验结果表明,角叉菜λ-卡拉胶及其降解产物对超氧阴离子(O2?)、有机自由基DPPH、H2O2诱导的小鼠红细胞氧化溶血以及小鼠肝匀浆脂质过氧化作用均有不同程度的抑制作用,其中对小鼠肝匀浆脂质过氧化作用的抑制作用最显著,不同分子量的角叉菜λ-卡拉胶对多种自由基均有较好的清除作用,其中对小鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制作用最显著,分子量对抗氧化活性有较显著的影响。     

Immunosuppressive Activities of Fucoidan from Laminaria japonica

Effects of fucoidan from Laminariajaponica on 2,4-dinitrochlorobenzene induced de-layed-type hypersensitivity (DTH) reaction and the serum levels of IgG, IgM, complement C3 and C4 were investigated in the present study. Results showed that oral administration of fucoidan atdose of 1.50 and 300 mg/(kg*d) for 9 days before the hapten challenge significantly inhibited 2,4-dinitrochlorobenzene induced delayed-type hypersensitivity reaction; and also inhibited the humoral immunity. Serum C3 and C4 levels were markedly reduced by fucoidan at dose of 1.50 and 300 mg/kg; and serum IgG and IgM levels were reduced by fucoidan at dose of 300 mg/kg. The inhibitory effects of fucoidan on delayed-type hypersensitivity suggested that it may be potential medication for chronic inflammatory diseases in the future.     

Microanalysis and preliminary pharmacokinetic studies of a sulfated polysaccharide from <Emphasis Type="Italic">Laminaria japonica</Emphasis>

A rapid, sensitive and reproducible high performance liquid chromatography (HPLC) method with post-column fluorescence derivatization has been developed to determine the amount of low-molecular-weight sulfated polysaccharide (GFS) in vivo. The metabolism of GFS has been shown to fit a two component model following its administration by intravenous injection, and its pharmacokinetic parameters were determined to be as follows: half-time of distribution phase (t _1/2α)=11.24±2.93 min, half-time of elimination phase (t _1/2β)=98.20±25.78 min, maximum concentration (C _max)=110.53 μg/mL and peak time (T _max)=5 min. The pharmacokinetic behavior of GFS was also investigated following intragastric administration. However, the concentration of GFS found in serum was too low for detection, and GFS could only be detected for up to 2 h after intragastric administration (200 mg/kg body weight). Thus, the bioavailability of GFS was low following intragastric administration because of the metabolism of GFS. In conclusion, HPLC with postcolumn derivatization could be used for quantitative microanalysis and pharmacokinetic studies to determine the presence of polysaccharides in the serum following intravenous injection.     

莫氏马尾藻多糖的分离及理化性质评价

以莫氏马尾藻(Sargassum maclurei)为原料,分别采用热水和稀酸两种提取方式提取莫氏马尾藻多糖,通过DEAE-Sepharose FF柱层析进行分级纯化,利用化学分析方法并结合高效液相色谱法(HPLC)、红外谱图、核磁共振谱图对分离到的莫氏马尾藻多糖及其分级组分的理化性质及基本结构进行分析,并对其主要组分的抗氧化与抗凝血活性进行研究。研究结果表明:莫氏马尾藻多糖是以岩藻糖为主,且含有少量硫酸根和糖醛酸的酸性多糖;莫氏马尾藻多糖清除自由基能力较强,具有良好的抗氧化活性;同时,该多糖可以通过抑制内源性凝血途径起到抗凝血作用,具有一定的开发前景。     

低硫酸化杂多糖水解单糖高效液相色谱指纹图谱研究

低硫酸化杂多糖(UF)是从海洋褐藻中分离的一种单糖组成复杂的硫酸化杂多糖,在细胞和动物实验中均表现出显著的神经保护活性,对帕金森病具有显著作用。本研究采用水提-醇沉-DEAE-Sepharose Fast Flow交换层析柱制备UF,经三氟乙酸(TFA)水解和1-苯基-3-甲基-5吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazalone,PMP)衍生化,通过对水解条件、衍生化试剂使用量、衍生时间的考察,确定最佳衍生条件,通过高效液相色谱(HPLC)法测定UF的单糖组成,并建立UF的指纹图谱。在UF水解单糖的指纹图谱中,共标示出8个特征共有峰,经鉴别主要色谱峰8个,分别是D-甘露糖、D-甘露糖醛酸、L-鼠李糖、D-葡萄糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖及L-岩藻糖,其中岩藻糖含量最高,其次是半乳糖。该方法操作简便、快速、灵敏度高、重复性好,可作为UF检查和鉴别的方法,建立实验室UF质量控制标准,为临床用UF质量标准的建立奠定基础。     

南海细菌胞外多聚物的神经保护活性筛选

本文采取传统的醇沉水溶的工艺提取了深海细菌的胞外聚合物(extracellularpolymericsubstance,EPS),使用过氧化氢作为损伤剂建立SH-SY5Y人神经母细胞瘤体外氧化损伤模型。在安全剂量下评价EPS的体外神经保护活性,确定16种活性良好(细胞活力>90%)的EPS。16种EPS的成分分析结果如下:1)16种EPS的分子量分布呈三段式,分别为>200 kDa, 10～200 kDa和<10 kDa; 2)16种EPS单糖组成中除甘露糖、葡萄糖外,还有稀有单糖氨基葡萄糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、氨基半乳糖、半乳糖、岩藻糖; 3)EPS的总糖含量为14.06%～21.40%,蛋白含量为10.66%～31.05%,硫酸基含量为2.91%～26.53%。通过对相应菌株进行16SrDNA全序列分析并与GenBank比对,完成了活性菌株的鉴定,通过MEGA7.0和Figtree构建系统进化树。鉴定结果表明,16株深海细菌归属于3门8科9属16种,分布在三个门类:厚壁菌门(Firmicutes, 9/16),变形菌门(Proteobacteria, 6/16)和...