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61.
中国对虾6种组织cDNA文库的构建 总被引:13,自引:0,他引:13
以中国对虾血液、眼柄、卵巢、雌虾头胸部、雄虾头胸部和三倍体对虾头胸部组织为材料,采用异硫氰酸胍-酸酚法提取总RNA;用磁珠法纯化mRNA;用Uni ZAP cDNA合成试剂盒合成双链cDNA并进行修饰,将cDNA定向连接在UniZAP载体上;经Gigapack Gold Package包装试剂盒包装成为噬菌体颗粒,转染宿主XL1 Blue MRF’菌株细胞,形成初级文库.初级文库经转染进一步扩增,形成稳定的cDNA文库.6个文库的库容在0.2×106~1.3×106之间,重组率都超过90%.从各文库随机取出6~10个清晰的噬菌斑进行PCR扩增,用琼脂糖凝胶电泳检测,其插入片段长度为500~2500bp.由初步功能基因克隆获得阳性结果.多项指标表明,所构建的对虾cDNA文库质量较高,为进一步筛选目的基因、EST测序和制作基因芯片提供了有效的工具. 相似文献
62.
63.
基于转录组数据的凡纳滨对虾微卫星标记开发 总被引:2,自引:0,他引:2
对虾遗传多样性和育种研究需要大量的分子标记。作者利用凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)转录组测序数据,采用MISA软件进行微卫星序列挖掘,共获得14 767条微卫星序列。统计发现在凡纳滨对虾中微卫星出现的频率为16.76%;在所有的微卫星序列中,2碱基微卫星最多,占59.53%;其次是3碱基微卫星,占35.78%。随机选取其中74条序列设计引物,通过DNA混池扩增和分型的方法进行微卫星标记的开发,PCR扩增的显示有54对(72.97%)能扩增出清晰的目的条带,进一步分型的结果显示27条(36.49%)微卫星显示出多态性,从这些多态性的微卫星位点中选择11个位点在"科海1号"种质库材料中进行个体分型,结果显示在该群体中微卫星标记的等位基因数目为2~11个不等,期望杂合度值为0.256~0.858,观察杂合度为0.213~0.875,多态性信息含量为0.221~0.830,在11个位点中有4个位点显著偏离HWE(P0.05)。本研究结果为后续使用微卫星标记进行对虾遗传学研究,促进对虾的遗传选育和种质资源保护提供了重要基础。 相似文献
64.
随着依法治国方针的贯彻执行,行政管理相对人的法律意识日益加强,对行政部门依法行政提出了更高的要求。由于行政处罚所涉及的法律规定门类繁多,效力等级不同,给执法工作人员具体应用法律带来困难,具体在土地管理部门执法实践中执法工作人员对实体法了解比较透彻,多数能够正确运用法律,但在执法过程中往往忽视程序法的要求,导致具体行政行为违法。 相似文献
65.
66.
67.
海洋动物多倍体的诱导目前已成为海水养殖中品种改良的重要手段(楼允东,1984)。在美国,太平洋牡蛎和虹鳟的多倍体诱导已大规模应用于生产,并获得良好的经济和社会效益。我国也先后开展了鱼类(桂建芳等,1991;尤锋,1993)、中国对虾(戴继勋等,1993;相建海等,1992)、贝类(喻子牛等,1995)及中华绒螯蟹(陈立侨等,1997)等多种海洋动物多倍体诱导的研究,并取得了一些进展。6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)由于其低毒、经济和高效,目前已成为海洋动物多倍体诱导中经常使用的诱导剂,但至今,国内外尚无关于6-DMAP在卵子内的残留的报道。在环境保护和生物安全倍受关注的今天,人们非常关心多倍体诱导食物的安全性问题,本文首次利用高压液相色谱技术检测了在中国对虾和中华绒螯蟹多倍体诱导处理后,卵子和幼体内6-DMAP的残留量,并对检测结果进行了分析讨论。 相似文献
68.
天祝县华龙沟区煤炭勘查的主要任务是探明煤层在垂直与水平方向上的变化规律。为此,在其前期预查时采用了多种电法手段.其中以对称剖面法和激电测深方法确定煤层露头具体位置;以五极纵轴测深法和激电测深确定煤层埋深及厚度;以高密度电法确定煤层走向。根据电法成果,结合1:5000地质填图对测区构造及煤层赋存形态进行控制。本次电法勘探成果与地质槽探、硐探对比,其煤炭赋存形态及构造吻合,根据勘查成果估算本区煤炭资源量约5000万t。 相似文献
69.
Chinese shrimp(Fenneropenaeus chinensis)is an economically important aquaculture species in China.However,cytogenetic and genomic data is limited in the organism partly because the chromosomes are difficult to isolate and analyze.In this study,fluorescence in-situ hybridization(FISH) was used to identify the chromosomes of F.chinensis.The 5S ribosomal RNA gene(rDNA)of F. chinensis was isolated,cloned and then used as a hybridization probe.The results show that the 5S rDNA was located on one pair of homologous chromosomes in F.chinensis.In addition,triploid shrimp were used to evaluate the feasibility of chromosome identification using FISH and to validate the method.It was confirmed that 5S rDNA can be used as a chromosome-specific probe for chromosome identification in F.chinensis.The successful application of FISH in F.chinensis shows that chromosome-specific probes can be developed and this finding will facilitate further research on the chromosomes of penaeid shrimps. 相似文献
70.
大冶铁山地区河流水体及水系沉积物中重金属元素分布特征 总被引:7,自引:3,他引:7
矿产资源的长期勘探、开采和冶炼活动给大冶铁山地区的自然生态环境造成了严重破坏.对该区西港河、东港河河水和水系沉积物中重金属元素分布特征的研究结果表明,该区矿山开采和冶炼活动形成的重金属污染元素主要为Cd、As、Zn;其主要污染源为冶炼厂排放的废水,其次是采矿废弃物堆积渗漏水;重金属元素在河水与水系沉积物中的空间分布特征较相似,但水系沉积物中元素质量分数比河水中的普遍增高,元素变化的剧烈程度加剧. 相似文献