PHYLOGENETIC RELATIONSHIPS AMONG PUFFERFISH OF GENUS TAKIFUGU BY RAPD ANALYSIS

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＰｕｆｆｅｒｆｉｓｈｅｓｏｆｔｈｅｇｅｎｕｓＴａｋｉｆｕｇｕ (Ｔｅｔｒａｏｄｏｎｔｉｆｏｒｍｅｓ,Ｔｅｔｒａｏｄｏｎｔｉｄａｅ)ａｒｅｍａｉｎｌｙｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄａｌｏｎｇｔｈｅｃｏａｓｔａｌｒｅｇｉｏｎｓｏｆＣｈｉｎａ ,ＪａｐａｎａｎｄＫｏｒｅａａｎｄａｒｅｃｏｍｍｅｒｃｉａｌｌｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｔｏｔｈｅｓｅｃｏｕｎ ｔｒｉｅｓ .Ｏｖｅｒ 2 0ｓｐｅｃｉｅｓｈａｖｅｂｅｅｎｒｅｃｏｒｄｅｄｉｎｔｈｅＹｅｌｌｏｗＳｅａａｎｄｔｈｅＥａｓｔＣｈｉｎａＳｅａ (Ｃｈｅｎｇ…     

中华绒螯蟹颤抖病研究进展

中华绒螯蟹俗称河蟹，是中国著名的淡水蟹，具有重要的经济价值，从80年代以来河蟹养殖业发展迅速，已成为水产养殖支柱产业之一。但随着河蟹养殖规模的不断扩大。病害问题日趋严重，造成了巨大的经济损失。在河蟹众多病害中，颤抖病是最为常见、危害最严重的一种。此病又称抖抖病、环爪病、宽爪病、抖脚病等，因发病时病蟹步足呈间歇性痉挛状抖动而得名。河蟹颤抖病为爆发性疾病，死亡率很高，     

中华绒螯蟹三倍体群体早期生长及营养的研究

将中华绒螯蟹三倍体大眼幼体群体 (三倍体率 64.38% )在池塘中养殖 ,对其早期生长及营养进行测定。结果表明 ,从三倍体群体自身的生长状况看 ,放养后 68— 78天是整个测量期间三倍体群体生长最快的阶段 ,其中壳长增长显著 (P <0 .0 5 ) ,壳宽和体重的增加极显著 (P <0 .0 1 )。与二倍体群体相比 ,放养后 68— 1 0 6天 ,三倍体群体在壳长、壳宽、体重上都表现出明显的生长优势 (P <0 .0 1 )。三倍体幼蟹蟹体氨基酸总量高于正常二倍体幼蟹 ,必需氨基酸中苏氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、精氨酸、异亮氨酸、组氨酸和赖氨酸的含量高于二倍体 ,而蛋氨酸的含量则低于二倍体幼蟹。蟹体中不饱和脂肪酸所占比例三倍体幼蟹低于正常二倍体 ,EPA、DHA及多不饱和脂肪酸所占的比例也低于二倍体。结果表明 ,三倍体幼蟹的生长比正常二倍体具有优势 ,并且在营养组成上也和二倍体有所差异。     

温度骤升对中华绒螯蟹( Eriocheir sinensis) 几种免疫化学指标的影响

以中华绒螯蟹为材料，将水体温度从14℃骤然升到28℃，然后在升温后9h内测定中华绒螯蟹肝胰腺中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量以及血细胞的吞噬能力，比较温度变化对这些指标的影响。结果表明，肝胰腺中CAT和SOD的活性在温度升高后马上出现显著降低，在6h后开始趋于稳定；MDA的含量在升温后随时间的延长逐步增加；血细胞的吞噬力和吞噬指数在温度升高后有所增加并于3h时达到最高，然后逐渐下降到温度升高前的水平。该结果表明，温度的骤然升高会影响机体的生理功能和机体的免疫防御能力，导致自由基代谢的紊乱，这可能是诱导病害发生的环境因素之一。     

海水养殖环境细菌耐药性的危害

为解决人口、资源、环境等人类面临的重大问题，海洋作为地球上尚未充分开发的重要疆域而备受重视。中国以海水养殖业为基础的“蓝色农业”在缓解人口增长对陆地农业的压力，促进沿海地区经济的发展中正发挥着重要作用。然而，近10年来，世界范围内海水微生物流行性和暴发性病害相继发生，严重制约了海水养殖业的健康发展(相建海，2003)。为了防治细菌性病害，大量的抗生素药类被应用于养殖过程的各个阶段，巨大的选择压力导致了海水养殖水域耐药细菌的种类和数量的显著增加，养殖生物耐药病原菌病害的发生也越来越频繁，微生物病害防治的难度越来越大。更严重的问题是这样培养的水产养殖品往往携带耐药细菌，通过食物链传递，将对人类健康和生命安全直接构成威胁(Sorum et al.，2002)。一些海产生物病原菌本身也是人类病原菌，如一些海洋弧菌(French et al.，1989；Wong et al.，2000)，这些水陆两栖人畜共患病原菌耐药性的获得及这种病害的发生和流行将会给人类带来灾难性的后果。另外，由于大多耐药因子的可传播性，海水养殖环境中正常菌群的耐药性同样是一个不可忽视的严峻问题(Sorum et al.，2002)。大多数抗性决定子(耐药基因)是在可移动和传递的遗传载体，如质粒或接合转座子上，可在不同菌株甚至是不同种属细菌间相互传递(Ferber，1998；OBrien，2002)。再加上养殖水体的半封闭性(池养中的定期或不定期的换水)或全开放性(滩涂或近海的网箱或筏式养殖)，耐药细菌有可能被潮汐和海流带入近岸的非养殖区及海滨旅游区，通过菌间遗传物质的传递，耐药基因有可能被传入环境中的人体病原菌，大大增加了人体耐药病原菌病害发生和流行的可能性及危害程度(Miranda et al.，2001；Thayumanavan et al.，2003)。大量抗生素的使用还改变了养殖海域及临近自然海区细菌群落的结构及种类和功能多样性，破坏了生态平衡和海洋正常的生命过程(Chelossi et al.，2003)。养殖水域作为可能的抗药因子的孳生地、储藏库和扩散源(Miranda et al.，2002；Rhodes et al.，2000)，已引起了全球性的关注。世界上一些水产养殖国家相继开展了养殖水体耐药细菌的调查研究，并有一些国家已对养殖中抗生素的种类、使用方法、使用剂量、残存量及检测标准进行了行政化的规范和管理(李爱华，2002)。目前我国对海水养殖水体细菌耐药危害的认识明显不足，许多需要进行的研究尚未开展，为更有效地防治耐药细菌病害，避免耐药基因在海洋环境中的广泛传播扩散，保护海洋生态环境及资源，提高养殖产品卫生质量，保护海滨旅游环境及人民群众身体健康，在我国开展海水养殖环境耐药细菌及其抗性机理的调查研究已是刻不容缓，这项工作的重点应在于查清耐药因子的源及其传播途径和动态，并在此基础上寻找治理的科学办法，以达到防患于未然的目的。20世纪滥采乱捕导致的近海渔业资源的严重衰竭是一个非常深刻的教训，希望这种急功近利、涸泽而渔的状况不会再度在海产养殖业中出现。我们应该把海洋细菌耐药性的研究提升到直接关系到人类生存和发展的环境和资源问题的高度来对待，避免海洋成为耐药因子孳生、繁衍、传播和扩散的潘多拉魔盒。     

栉孔扇贝不同种群杂交效果 Ⅲ.中国种群与俄罗斯种群及其杂种1~2龄的生长发育

在对栉孔扇贝中国养殖种群(CC)、中国野生种群(CW)与俄罗斯种群(RW)及其杂交种群早期(2,3,4月龄)和中期(6,8,10,12月龄)生长发育研究的基础上,进行了各种群的1~2龄(14,16,19,21,24月龄)生长发育测定比较研究.结果表明,3个亲本群体各个性状的后期生长性能表现以中国养殖种群最好;2个杂交组合CC雌(♀)×RW雄(♂)和CW雌(♀)×RW雄(♂)的杂种群体各个性状的后期生长性能均高于纯种亲本种群,杂种优势均较大,其范围在3.16%~37.18%之间,以CC雌(♀)×RW雄(♂)杂交效果最好,是理想的杂交组合;壳长、壳宽、壳高、活体重4个生长发育指标在后期各个阶段均表现出不同程度的杂种优势,杂种优势在性状间存在明显差别,体重的杂种优势远大于壳宽、壳长和壳高,变化趋势为体重大于壳宽大于壳长大于壳高;栉孔扇贝各个性状的生长率受生长发育季节的影响较大,12~16月龄生长迅速,到16月龄(11月份)生长速度达到高峰,到下一年度的2月下旬(19月龄)几乎没有增长,仅能维持生命,开春以后增长也不大,这说明,栉孔扇贝在来年秋季完成了强度生长,是水产养殖的最佳收获时节,应当尽量避免跨越第二个冬季,以减少越冬损失.     

GENETIC DIFFERENTIATION WITHIN ERIOCHOIR SINENSIS(MILNE,EDWARDS) REVEALED BY ALLOZYME AND RAPD

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＥｒｉｏｃｈｏｉｒｓｉｎｅｎｓｉｓｉｎＣｈｉｎａｉｓｃｏｍｍｏｎｌｙｃａｌｌｅｄｍｉｔｔｅｎｃｒａｂ .Ｉｔｉｓａｎａｄｒｏｍｏｕｓ,ｗｉｔｈｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓｍｏｖｉｎｇｆｒｏｍｆｒｅｓｈｔｏｍａｒｉｎｅｗａｔｅｒｔｏｓｐａｗｎ .Ｔｈｅｒｅａｒｅｔｗｏｃｏｍｍｅｒｃｉａｌｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ:ＣｈａｎｇｊｉａｎｇＲｉｖ ｅｒ (ＣＲ)ａｎｄＬｉａｏｈｅＲｉｖｅｒ (ＬＲ) .Ｔｈｅｓｅｔｗｏｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓａｒｅｖｅｒｙｄｉｆｆｉｃｕｌｔｔｏｉｄｅｎｔｉｆｙｆｒｏｍｔｈ…     

海湾扇贝(Argopecten irradians)金属硫蛋白基因的克隆与分析

金属硫蛋白是一种普遍存在于生物体内的低分子量、半胱氨酸含量丰富、易于被外界刺激诱导的金属结合蛋白。采用表达序列标签法,结合cDNA末端快速扩增技术,首次获得了海湾扇贝金属硫蛋白(AiMT)的全长cDNA序列。该序列全长787bp,5′UTR(UntranslatedRegion)为79bp,3′UTR为270bp,开放阅读框(OpenReadingFrame,ORF)长度为438bp,可编码145个氨基酸。在其编码的氨基酸序列中半胱氨酸含量丰富,甘氨酸含量也较高,芳香族氨基酸含量低,不含组氨酸,存在有无脊椎动物和软体动物金属硫蛋白的特征序列CKCXXX-CXCX,C-末端的氨基酸序列也符合软体动物金属硫蛋白标签序列C-x-C-x(3)-C-T-G-x(3)-C-x-C-x(3)-C-x-C-K。序列特征分析表明,该序列具备金属硫蛋白的典型特征,是金属硫蛋白家族的成员。     

海湾扇贝样品不同保存条件下DNA的提取及RAPD扩增比较

以海湾扇贝为材料，研究了鲜活样品以及采用冷冻保存、70％乙醇固定和10％福尔马林固定等方法保存的闭壳肌样品用于DNA提取的不同效果，并分析了不同保存条件下所提得DNA用于RAPD扩增的结果，研究表明，鲜活样品以及采肜冷冻保存和70％乙醇固定的样品可以得到很好的DNA，其质量和得率没有显著差异，利用上述DNA模板进行RAPD分析，可以获得一致性很好的扩增结果。10％福尔马林休固定样品则没有得到可用的DNA模板。采用70％乙醇固定保存海洋生物组织，是用于DNA提取及相关的分子生物学研究的快速、简易和有效的方法。     

PHYLOGENETIC RELATIONSHIPS AMONG PUFFERFISH OF GENUS TAKIFUGU BY RAPD ANALYSIS

AmpLifications with 300 10-base primers under predetermined optimal reaction yielded 2762 reproducible amplified fragments ranging from 200 to 3000 bp. Genetic distances among five species of Takifugu and Lagocephalus spadiceus as outgreup were calculated based on the presence/absence of the amplified fragments. Topological phylogenie trees of the 5 species of Takgfugu and the outgroup were gen-erated by Parsimony and Neighbor-Joining analysis based on RAPD data set. The genetic distance between T. rubripes and T. pseudommus was almost the same as that between individuals within each species, but was much smaller than that among T. rubripes, T. pseudommus and the other species. The molecu-lar data from RAPD analysis convincingly showed that T. rubripes and T. pseudommus should be the same species.