Influence of temperature on glutathione level and glutathione-related enzyme activities of Antarctic ice microalgae Chlamydomonas sp.ICE-L

GSH system plays a role in the control of the redox balance state,anti-oxidation and protecting life from injury of ROS(reactive oxygen species).In present paper,the possible GSH system of Chlamydomonas sp.ICE-L has been investigated by evaluating GSH and GSH-related enzymatic responses at different temperatures using spectrophotometer methods.The results showed that the GSH system is correlated positively to low temperature,and other factors but GR are correlated negatively to high temperature.So GSH and GSH-related enzymes play an important role in the adaptation of Antarctic ice microalgae to low temperature.     

中国鲎在冬季的发现及观察

THEDISCOVERYANDOBSERVATIONOFTachypleustridentatus自然界现有4种鲎,分布于中国的中国鲎（Tachypleustridentatus,又叫亚洲鲎）是其中的一种,每年的4~9月,成年雌、雄鲎双双到沙滩的高潮位产卵繁殖后代。但在隆冬的元月,一般认为鲎已去深海越冬[2]。有关中国鲎的越冬,目前研究得很少,在中国从未发现过有关的报道。人类对冬季中国鲎的形态、内部结构（主要是性腺的发育）及毒理还很不清楚。作者的观察有助于了解中国鲎生殖周期的周年变化及对中国鲎的生态进行周年分析。1材料来源1．1中国鲎的发现1998年1月1日（农历1997…     

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)呼肠孤病毒(GCRV)VP6相互作用蛋白的筛选

为筛选与草鱼呼肠孤病毒GCRV096 VP6发生相互作用的宿主蛋白,先将VP6基因的PCR扩增产物,克隆至酵母表达载体p GBKT7以构建其诱饵质粒(p GBKT7-VP6);再将酵母菌Y2HGold(含p GBKT7-VP6)与酵母菌Y187[含草鱼肾脏细胞(CIK)c DNA文库质粒]进行人工诱导融合,然后经选择培养筛选阳性克隆。结果共筛选到4株阳性克隆,经测序、生物信息学分析,分别属于两条不同的核苷酸序列,其中之一所编码的产物与GAPDH(3-磷酸甘油醛脱氢酶)同源性较高。可见,该酶极可能在GCRV096侵染宿主的初期发挥着重要作用。     

南极衣藻（Chlamydomonas sp.ICE-L）谷胱甘肽还原酶基因的原核表达及其条件优化

采用RT-PCR技术克隆南极衣藻GR基因ORF全长cDNA,然后经酶切、连接等步骤构建其原核表达载体;并对其表达的诱导时间、IPTG浓度、温度进行了优化,以期获得较大量的酶蛋白。结果表明,将构建的原核表达载体pET-GR导入大肠杆菌BL21,可以高效表达融合蛋白;且表达的蛋白均以包涵体的形式存在;经SDS-PAGE电泳...     

利用酵母双杂交系统筛选草鱼呼肠孤病毒NS38相互作用蛋白

采用酵母双杂交技术,对草鱼呼肠孤病毒096(GCRV096)非结构蛋白NS38相互作用的蛋白进行了筛选,并对阳性克隆中的插入序列进行测序与生物信息学分析。结果表明,含有重组质粒pGBKT7-NS38的酵母菌Y2HGold与含有草鱼肾脏细胞(CIK)cDNA文库质粒的酵母菌Y187融合成功,并筛选得到3株阳性克隆;发现两条不同的插入序列,其中一条序列编码的蛋白与40S核糖体蛋白S16亚基的同源性高达99%,而另一序列相应的蛋白不存在匹配的蛋白。该结果为进一步深入研究NS38蛋白在GCRV096复制过程中的生物学功能奠定了基础。     

Effect of high salinity on cell growth and protein production of Antarctic ice microalgae Chlamydomonas sp. ICE-L

Antarctic ice microalgae Chlamydomonas sp. ICE-L can survive and thrive in Antarctic sea ice. In this study, Chlamydomonas sp. ICE-L could survive at the salinity of 132‰ NaCl. SDS-PAGE showed that the density of 2 bands (26 and 36 kD) decreased obviously at the salinity of 99‰ NaCl compared to at the salinity of 33‰ NaCl. The soluble proteins in Chlamydomonas sp. ICE-L grown under salinity of 33‰ and 99% NaCl were compared by 2-D gel electrophoresis. After shocking with high salinity, 8 protein spots were found to disappear, and the density of 28 protein spots decreased. In addition, 19 protein spots were enhanced or induced, including one new peptide (51 kD). The changes of proteins might be correlated with the resistance for Chlamydomonas sp. ICE-L to high salinity.     

中国对虾复合疫苗的初步研究

于１９９６年１１月－１９９７年５月,运用差异离心,蔗糖梯度离心、柱层析等方法从发病中国对虾分离出杆状病毒并纯化;分别用冷乙酸处理法、十二烷基硫酸钠－苯酚法提取纯化该病毒的结构蛋白与核酸、λＤＮＡ;分别用十二烷基硫酸钠煮沸法、三氯乙酸法纯化孤菌的肽菊聚糖和鸡卵粘蛋白;配制出小牛血清白蛋白、蜗牛凝集素两溶液。然后从超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力和溶菌活力两种免疫指标分析灭活病毒和以上提取、纯化的７种大分     

甲状腺素对斜带石斑鱼卵黄囊期仔鱼生长发育的影响

用4种不同浓度的甲状腺素(T4)分别浸泡斜带石斑鱼卵黄囊期仔鱼,研究T4对仔鱼发育、生长和存活的影响。结果表明,在孵化后24 h内,T4对仔鱼发育的促进作用不明显;在孵化24 h后,T4对仔鱼消化道的发育有促进作用。在孵化后72 h,0.01 mg·L-1 T4处理组仔鱼小肠管径、直肠管径、全长与对照组相比差异均不明显;0.10 mg·L-1和1.00 mg·L-1 T4处理组仔鱼小肠和直肠管径显著比对照组大(P<0.01),1.00 mg·L-1 T4处理组仔鱼全长显著比对照组短(P<0.01),而0.10 mg·L-1处理组仔鱼全长与对照组相比无明显差异(P>0.05)。在孵化后第8天,0.10 mg·L-1 T4处理组仔鱼存活率明显比对照组高(P<0.01),而0.01 mg·L-1 T4组和1.00 mg·L-1 T4组与对照组之间存活率差异不明显(P>0.05)。结果提示0.10 mg·L-1 T4处理能促进斜带石斑鱼卵黄囊期仔鱼的消化道发育并提高其存活率。     

哈维氏弧菌GST核酸疫苗制备及其对斜带石斑鱼的免疫保护作用

通过同源引物从致病性哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)ZJ0603基因组中克隆GST的开放阅读框(ORF),构建真核表达质粒pcDNA-GST。大量抽提重组质粒后,于背鳍基部肌肉注射重组质粒免疫斜带石斑鱼(Epinephelus coioides),分析重组质粒的免疫效果。通过核酸水平检测重组质粒在鱼体肝、肌肉、头肾和脾脏组织的分布;用ELISA法检测鱼体血清的抗体水平,用Western-blot检测目的蛋白的表达情况。结果表明:该序列全长615 bp;免疫7 d后,鱼体中均有质粒分布;斜带石斑鱼血清中产生抗GST的高效抗体(1∶4 096);相应的目的蛋白也在鱼体中成功表达。攻毒后,疫苗免疫保护率达80%,表明GST可作为防治哈维氏弧菌病有效候选抗原。     

SE对甲胺磷─小菜蛾颗粒体病毒复合杀虫剂的增效作用

从５０年代开始,病毒性生物杀虫剂引起人们的关注,至今已得到较大发展［１］。它的特点是宿主单一、对天敌人畜无害、难产生抗药性、使用方便、作用持久。但它的致命弱点是杀虫谱窄、见效慢,一般与微量化学农药联合使用制成复合杀虫剂,提高杀虫效果［２］。复合杀虫剂的使用,为了进一步减少农药量和提高杀虫能力,可以添加具有增效作用的辅助剂。我们研究了辅助剂ＳＥ在甲胺磷－小菜蛾颗粒体病毒复合杀虫剂中的作用,结果报告如下。１　材料和方法１．１　材料小菜蛾幼虫（ＰｌｕｔｅｌｌａｘｙｌｏｓｔｅｌｌａＬ．）　武汉大学昆虫病…