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分光光度计是生物化学与分子生物学实验中的常用仪器,常用来测定核酸、蛋白质等生物大分子的纯度、浓度以及吸收光谱的变化特征等。其中纯度与浓度的测定对分光光度计的准确度要求较高,测量数值的细微差异都有可能影响实验结果。因此,提高分光光度计的测量准确度就显得极为重要。本文就作者在这方面的实践经验作一简单介绍。1 确认样品的检测范围在许多情况下,用分光光度计定量的结果不准,往往是因为超出了检测范围。在这里,检测范围包括两方面含义:一是指该样品是否可用分光光度法测定,二是指所测样品的浓度范围。例如,用280nm和260nm紫外… 相似文献
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在PCR实验中,PCR实验结果的好坏主要是靠引物来保证的。因此,在合成引物之前除了作人工检查外,往往需要对所设计的引物进行计算机检查。一是检查在引物内部是否有发夹结构,二是检查引物对之间是否有较多的互补碱基,三是计算引物的Tm值。这已经成了引物设计中必不可少的步骤。现在的计算机软件只能对序列确定的引物(即不含有简并碱基)进行分析,如果所要分析的是简并的引物,那么需要将每一种可能的序列写出来,逐一分析。这样一来,对于简并程度较高的引物,分析起来就相当困难。本文在文昌鱼同源框基因的PCR扩增实验所需引物的设计中,采用了… 相似文献
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于1997年6月在青岛市沙子口海域采集文昌鱼样品,采用RT-PCR方法进行青岛文昌鱼LIM类同源框基因片段的扩增研究。结果表明,用一对引物一次PCR扩增的方法未能得到特异的PCR产物,用一对引物两次PCR扩增的方法也同样未果。在对套式PCR进行研究时发现,用普遍PCR方法进行的套式PCR结果不够理想,而用三步两段法和四步两段法套式PCR则可进行成功的扩增。用这两种方法扩增的PCR产物具有高度特异性。相比之下,用简并的引物对未知的基因片段进行PCR扩增时,三步两段法和四步两段法的套式PCR应是首选方法。 相似文献
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动物细胞大规模培养研究的动力源于1950年为对付病毒性疾病而兴起的群体接种运动。1962年CapstickTelling等人采用悬浮培养法培养出小鼠肾细胞 (BHK)。1967年荷兰的VanWezel首次在贴壁依赖性动物细胞培养中使用了微载体 (Microcarrier,MC) ,此后 ,微载体系统 (MCS)迅速发展 ,并成为当前贴壁细胞培养最有工业化发展前途的一种培养方法。随着微载体开发与研究成为这一领域的热点 ,目前已出现的微载体根据其制备材料大致可分为 :葡聚糖、塑料、明胶 (Collagen)、玻璃、纤维素… 相似文献