复合免疫药物对中国对虾血淋巴抗菌溶菌活力的影响

中国对虾口服复合免疫药物“虾康素”后,于第1,3,5．7天分别测定了中国对虾血清中抗菌活力、溶菌活力和酸性磷酸酶(ACP)活力。结果表明,血清中抗菌、溶菌活力和ACP活力在第1,3,5,7天时均为实验组高于对照组,并且均差异极显著。     

久效磷对中国对虾血淋巴酚氧化酶活力影响的初步研究

初步研究了低浓度久效磷胁迫对中国对虾胁迫对中国对虾血淋巴酚氧化酶（ＰＯ）活力的影响,结果表明,低浓度久效磷短时间胁迫,对中国对虾血淋巴的ＰＯ活力有刺激增强的作用;增大药物浓度和延长胁迫时间,可使其活力降低,且随药物浓度的增加和胁迫时间的延长,这种降低作用逐渐增强。因此认为,久效磷胁迫会抑制机体识别和清除病原体的能力,将可能导致对虾疾病的发生,是虾病暴发的可能诱因。     

口服免疫药物后中国对虾某些血淋巴因子的测定及方法研究

于１９９１年４－９月，以海捕中国对虾亲虾及养殖中国对虾为材料，运用单向免疫扩散（ＳＲＩＤ）方法测定对虾血淋巴免疫因子，并采用经改进后的Ｈｏｒｏｗｉｔｚ等人的方法测定对虾体内的酚氧化酶（ＰＯ）活性，目的在于运用该两种方法对口服不同免疫药物的养殖对虾的血淋巴免疫因子及ＰＯ活力进行测定。对亲虾和养殖对虾口服不同免疫药物前后的测定结果表明，几种情况下的对虾血淋巴中均存在类似ＩｇＭ的因子，血细胞中存在酚氧化     

凡纳滨对虾在盐度变化下免疫机能评价的研究

研究凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)在盐度变化下免疫机能的评价指标。结果表明:盐度变化对凡纳滨对虾血细胞数量、吞噬率和血淋巴酚氧化酶、溶菌、α2-巨球蛋白活力的影响显著(P<0.05),而对照组各免疫指标无明显变化。凡纳滨对虾在盐度变化1d内3类血细胞和总血细胞数量明显下降,1d后趋于稳定,且与盐度值呈正相关;血细胞吞噬率和血淋巴酚氧化酶、溶菌和类α2-巨球蛋白活力在3d内呈峰值变化,其中血细胞吞噬率、溶菌活力均于0.5d时达到最小值,血淋巴酚氧化酶、类α2-巨球蛋白活力分别于0.5d或1d时达到最大值,同时各免疫指标与盐度变化呈明显的正、负相关性,3d后均恢复至对照组水平。结合凡纳滨对虾在盐度变化下的免疫响应机制和免疫适应性,提出血细胞吞噬率和血淋巴溶菌活力可作为衡量对虾在盐度变化下免疫健康水平的指标。     

脂多糖对栉孔扇贝血清和血细胞中7种酶活力的影响

实验于１９９８年１￣１０月进行。栉孔扇贝注射脂多糖后,分别于１,１５和３０ｈ测定了其血清和血细胞中７种参与免疫防御的水解酶、氧化酶和抗氧化酶的活力。结果表明,血清实验组的酸性磷酸酶（ＡＣＰ）活力在１,１５和３０ｈ时,血细胞实验组在１ｈ时显著高于对照组。血清和血细胞实验组的碱性磷酸酶（ＡＫＰ）活力仅在１ｈ时,溶菌酶活力分别在１ｈ和１５ｈ时显著高于对照组。血细胞中无酚氧化酶（ＰＯ）活性。血清实验组的Ｐ     

中国对虾复合疫苗的初步研究

于１９９６年１１月－１９９７年５月,运用差异离心,蔗糖梯度离心、柱层析等方法从发病中国对虾分离出杆状病毒并纯化;分别用冷乙酸处理法、十二烷基硫酸钠－苯酚法提取纯化该病毒的结构蛋白与核酸、λＤＮＡ;分别用十二烷基硫酸钠煮沸法、三氯乙酸法纯化孤菌的肽菊聚糖和鸡卵粘蛋白;配制出小牛血清白蛋白、蜗牛凝集素两溶液。然后从超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力和溶菌活力两种免疫指标分析灭活病毒和以上提取、纯化的７种大分     

氨氮对中国对虾抗病力的影响

１９９６年５月２４日－６月１４日,８月１－１９日,分别在青岛的两个养殖场采集海捕产卵后中国对虾亲虾和养殖中国对虾,采用人工添加氨氮并检测对虾和抗菌有关因子的活力的方法,进行氨氮对中国对虾抗病力影响的实验。结果表明,在氨氮浓度较高的实验组,对虾血细胞数目减少,其结构也有变化;酚氧化酶,超氧化物歧化酶和过氧化物酶活力,以及溶菌和抗菌活力都较对照组有明显下降;对病原菌的易感性明显提高。     

盐度、pH突变对2种养殖对虾免疫力的影响

本文研究了盐度、p H突变对中国对虾、南美白对虾免疫力的影响。结果表明 :盐度、p H突变对 2种养殖对虾抗菌活力、酚氧化酶活力的影响是显著的 (P<0 .0 5)。而盐度突变对溶菌活力的影响显著 (P<0 .0 5) ,对低 p H突变影响明显 (P<0 .0 5) ,对高 p H突变影响不明显。随着盐度突变值和向低 p H、高 p H突变梯度的增加 ,2种养殖对虾的抗菌活力逐渐减小 ,酚氧化酶活力逐渐增大 ,而溶菌活力则随着盐度突变值和向低 p H突变梯度的增加呈逐渐下降。在同一实验梯度中 ,中国对虾的抗菌活力和溶菌活力要比南美白对虾的低 ,而其酚氧化酶活力则比南美白对虾的高。     

久效磷对中国对虾体内SOD活力影响的初步研究

通过研究久效磷对中国对虾体内超氧化物歧化产（ＳＯＤ）活力的影响,从免疫毒理学方面初步探讨了的有机磷对中国对虾的致毒作用。结果表明,久效磷胁迫可降低中国对虾体内ＳＯＤ活和,且随药物浓度的增加和胁迫时间的延长,降低作用不断增强;几种组织的ＳＯＤ活力对久效磷胁迫的敏感性,肥肝胰腺最高,血淋巴的次之,从组织相对较低,ＳＯＤ活力的降低可使机体超氧阴离子效磷胁迫的敏感性,以肝胰腺最高,血淋巴的次之,肌肉组织相     

凡纳滨对虾对多巴胺免疫响应的研究

研究凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)对多巴胺的免疫响应。结果表明:注射多巴胺对凡纳滨对虾血细胞数量、吞噬率和血淋巴酚氧化酶、溶菌、类α2-巨球蛋白活力影响显著(P<0.05),而对照组各免疫指标无明显变化。在实验时间内,多巴胺处理组各指标均呈峰值变化,3类血细胞、总血细胞数量和血淋巴类α2-巨球蛋白活力在3h时分别达到最小值和最大值,而血淋巴酚氧化酶、血细胞吞噬率和血淋巴溶菌活力于6h时分别达到最大值和最小值,同时各免疫指标变化与多巴胺的注射剂量具有明显的负、正相关性;其中颗粒细胞、半颗粒细胞数量和血淋巴酚氧化酶、类α2-巨球蛋白活力在12h后趋于稳定,透明细胞、总血细胞数量和吞噬率于18h后保持稳定,而溶菌活力在24h后保持平稳,稳定后各免疫指标均恢复至对照组水平。这说明多巴胺对凡纳滨对虾血细胞具有明显的调节作用,能在短时间内引起对虾免疫力的显著下降,并表现出明显的剂量效应性。     

盐度胁迫对锯缘青蟹血清及组织、器官中PO和SOD活性的影响

采用酶学方法测定了盐度(5、15、25、35)胁迫下锯缘青蟹血清中酚氧化酶(PO)及其肌肉和肝胰腺中超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化.结果表明,盐度胁迫显著影响青蟹血清PO活性(p＜0.05).S5、S15低盐度处理组青蟹血清中PO活性显著高于S25、S35高盐度处理组(p＜0.05),同一处理组青蟹血清中PO活性除S15处理组随胁迫时间延长而持续下降外,其余各组呈现出有升有降的变化.各处理组在盐度低于或高于25时,青蟹肌肉中SOD活性升高,且胁迫至72h前,随着胁迫时间延长,SOD活性下降;青蟹肝胰腺中SOD活性随着盐度升高而降低,且同一处理组青蟹肝胰腺中SOD活性则随着胁迫时间的延长而呈现出先降后升的趋势.这表明环境盐度胁迫对青蟹体内SOD活性影响显著,且表现出明显的时间效应性.由此可见,盐度胁迫显著影响青蟹的PO、SOD活性,进而影响青蟹免疫力.     

菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)漆酶型酚氧化酶的纯化及特性分析

采用非变性电泳结合特异性底物发色方法从菲律宾蛤仔血细胞中分离出一种酚氧化酶,研究了该酶的酶促反应动力学参数,金属离子、抑制剂对酶活的影响。结果表明,分离获得的酚氧化酶分子量约为563kDa;对底物邻苯二酚、左旋多巴(L-DOPA)、多巴胺、对苯二酚的米氏常数Km分别为0.42、1.60、1.79和1.76mmol/L;酶的活性在Mg2+、Zn2+、Mn2+、Fe2+、Cu2+和Ca2+浓度为5、10、20、30mmol/L时受到抑制;酶的活性可被抑制剂抗坏血酸、二乙基二硫代氨基甲酸钠(DETC)、半胱氨酸、亚硫酸钠、柠檬酸、乙二胺四乙酸二钠(EDTA)、叠氮钠和硫代尿素等抑制。根据底物特异性、抑制剂等结果,所分离获得的酚氧化酶属于漆酶型的含铜酚氧化酶。     

复合免疫药物对中国对虾血淋巴氧化酶和抗氧化酶活力的影响

中国对虾口服复合免疫药物“虾康素”后，于第1，3，5，7天分别测定了中国对虾血清中髓性过氧化物酶（MPO），酚氧化酶（PO）、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活力，结果表明，血清中MPO，SOD和CAT活力在第1，3，5，7天时均与实验组高于对照组，并且差异极显著。血清中PO活力仅在第1天时，血细胞中PO活力则仅在第1天和7天时，实验组高于对照组，且差异极显著。     

皱纹盘鲍经诱导后血淋巴中一些因子变化的研究

于１９９５年１１月在山东荣城大鱼岛鲍养养殖厂采集皱纹盘鲍，以大肠杆菌，弧菌为诱导物，将鲍分为三组分别进行注射，在注射后的５，１８，３２，５０ｈ分别取鲍血淋巴，测定其抗菌，溶菌，酚氧化酶和超氧化物歧化酶活力，并研究注射组各项活力的变化规律。实验结果表明，适当的刺激可增加皱纹盘鲍的抗病能力。     

96孔酶标板法测定对虾血淋巴的过氧化物酶相对活性的初步研究

过过氧氧化化物物酶酶（（ＰＰＯＯＤＤ））广广泛泛存存在在于于真真核核生生物物体体内内 ,,在在清清除除自自由由基基 ((ＯＯ - - )) ,,防防止止生生物物分分子子损损伤伤方方面面有有十十分分重重要要的的作作用用。。因因此此通通过过测测量量对对虾虾血血淋淋巴巴的的过过氧氧化化物物酶酶活活性性大大小小可可以以推推测测对对虾虾的的生生理理状状态态 ,,甚甚至至可可用用其其辅辅助助检检测测或或诊诊断断对对虾虾病病害害的的生生理理指指标标。。丁丁美美丽丽等等采采用用改改良良的的连连苯苯三三酚酚自自氧化化法法测测定定中…     

Effects of temperature on cellular and biochemical parameters in the crab Carcinus aestuarii (Crustacea, Decapoda)

The effects of temperature on cellular and biochemical parameters of the crab Carcinus aestuarii were evaluated. Crabs were kept for 7 days at 4, 17 (reference value) and 30 °C (salinity of 35 psu), and total haemocyte count (THC), haemocyte volume, haemocyte proliferation, phenoloxidase (PO) activity in both haemocyte lysate (HL) and cell-free haemolymph (CFH), CFH total protein and glucose levels, superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activities in both gills and digestive gland were evaluated. The lowest and the highest temperature significantly decreased THC, whereas haemocyte volume and haemolymph glucose concentration did not differ significantly among experimental conditions. Haemolymph protein concentration significantly reduced in crabs maintained at 30 °C, when compared with that of animals kept at 4 and 17 °C. Haemocyte proliferation increased significantly in crabs kept at 4 and 30 °C, when compared with that of crabs held at 17 °C. Likewise, a significantly higher PO activity was recorded in CFH from crabs kept at 4 and 30 °C, than in control crabs. Conversely, PO activity did not vary significantly in HL. With regard to antioxidant enzyme activities, a significant decrease in CAT activity was observed in gills from crabs kept at 4 °C, when compared to that of crabs kept at 17 °C and 30 °C. Results obtained demonstrated that the highest and lowest temperature tested influenced crab biological responses, and indicated that C. aestuarii modulated its cellular and biochemical parameters (mainly haemocyte proliferation, CFH protein concentrations and CFH PO activity) in order to cope with temperature.     

光棘球海胆(Strongylocentrotus nudus)酚氧化酶氧化产物的抗菌特性研究

本文通过线性连续梯度非变性电泳结合邻苯二酚发色法分离纯化了光棘球海胆(Strongylocentrotus nudus)体腔液上清中的酚氧化酶(PO),然后通过生长曲线测定法进行了光棘球海胆PO氧化产物的抗菌特性分析。结果显示:(1)光棘球海胆体腔液上清中存在3种PO(Sn PO1,Sn PO2,Sn PO3),在聚丙烯酰胺凝胶中与邻苯二酚反应分别呈现褐色、黄色和紫色;(2)以多巴胺为底物时,Sn PO1的氧化产物对灿烂弧菌Vibrio splendidus、哈维氏弧菌Vibrio harveyi和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus有抗菌作用,Sn PO2氧化产物对哈维氏弧菌、金黄色葡萄球菌和拟诺卡式菌Nocardiopsis sp.有抗菌作用,Sn PO3氧化产物仅对哈维氏弧菌和拟诺卡式菌有抗菌作用;(3)以左旋多巴为底物时,仅Sn PO2氧化产物对拟诺卡式菌有抗菌作用;(4)光棘球海胆PO氧化产物对假交替单胞菌Pseudoalteromonas nigrifaciens、希瓦氏菌Shewanella baltica和溶壁微球菌Micrococcus lysodeikticus的生长无明显影响。上述结果表明,在光棘球海胆中,PO氧化产物具有窄谱抗菌活性,多巴胺氧化产物的抗菌活力高于左旋多巴氧化产物,并且不同PO亚型的氧化产物具有不同的抗菌谱和抗菌特性。