真鲷和黑鲷的染色体组型研究

本文首次报道了真鲷和黑鲷的染色体组型:真鲷二倍体数2n=48,除第l对为亚端部着丝点染色体外,其余全部为端部着丝点染色体,臂数NF=48;除第2对与第3对染色体之间、第20对与第2l对染色体之间差异显著外,其余每相邻两对染色体间均无显著差异。黑鲷二倍体数2n=48,3对为中部、2对为亚中部着丝点染色体,其余全部为端部着丝点染色体,臂数NF=58;前5对染色体中,每相邻两对染色体之间有显著差异,在第6对至第24对端部着丝点染色体中,除第23与第24对染色体之间有显著差异外,其余每相邻两对间无显著差异。     

真鲷、黑鲷及其杂交子代的染色体构成与AFLP分析

采用核型分析和AFLP技术对真鲷、黑鲷及其杂交子代进行遗传差异分析。结果显示真鲷、黑鲷和杂交子代均含有48条染色体,核型分别为2n=2st+46t,NF=48、2n=4m+4sm+2st+38t,NF=56和2n=30m+8sm+2st+8t=48,NF=86,杂交子代核型与其父、母本种均不一致。两对AFLP选扩引物组合在真鲷、黑鲷和杂交子代中共扩增到278个条带,其中黑鲷特异性条带93条、真鲷特异性条带108条;杂交子代中分别出现了21条父本种(黑鲷)特异条带和67条母本种(真鲷)特异条带,另出现了15条非双亲条带。杂交子代与真鲷、黑鲷的遗传相似系数和遗传距离分别为0.113、0.350和2.180、1.050,表明杂交子代总体上更偏向于母本种。染色体核型和AFLP条带分析结果表明真鲷(♀)×黑鲷(♂)所获得的杂交子代为含有48条染色体的异源二倍体,且父、母本遗传物质在杂交中发生了部分重组,杂交子代表现出一定的偏母系遗传特性。     

真鲷(Pagrosomus major)杆状病毒超微结构与细胞病理学初步研究

1995年电镜检测患病真鲷肠上皮组织,在细胞质中发现了一种新的病毒粒子及其发生基质.病毒呈杆状外形为(130～200)×(360～400)nm,具囊膜,囊膜与核心间有10～12nm低密度间隔.病毒以溶酶体为载体形成病毒包涵体并进行病毒粒子装配;形态学上暂定为真鲷杆状病毒(Pagrosomus major Baculovirus,PMBV).细胞病理变化呈现粗面内质网核糖体脱落,部分线粒体溶解,溶酶体膨大,有大量包涵物,核膜有轻微膨胀变形等病变.     

鲬Platycephalus indicus（Linnaeus）的核型和Ag─NOR带研究

采用ＰＨＡ体内注射肾细胞直接法和银染法研究的核型及Ａｇ－ＮＯＲ带。提出的核型公式为２ｎ＝４８，２ｍ＋８ｓｍ十２ｓｔ＋３６ｔ，ＮＦ＝５８。核型中第二对端部着丝点染色体（ｔ染色体）为典型的具次缢痕染色体。银染结果显示次缢痕部位为银集核仁组织者区（Ａｇ－Ｎｕ－ｃｌｅｏｌｕｓｏｒｇａｎｉｚｅｒｒｅｇｉｏｎ，Ａｇ－ＮＯＲｓ），并表现出数目和结构多态性。此外，还讨论了的不同群体间核型的差异，认为不同群体间存在明显的多态性。     

黑鲷（Sparus macrocephalus）成熟精,卵和精子入卵早期过程的初步观察

黑鲷精子入卵早期发育迅速。精、卵相遇的3－5sec左右,卵孔管出现一种能引诱精子入卵的物质;精卵相触约10－15sec左右,即精子进入卵孔管后,管内又涌出另一种能阻止多余精子继续入卵的物质;同时,受精锥形成。约15-54sec左右,受精膜发生;约90sec左右受精膜举起,围卵腔雏成;约180sec左右受精锥开始退缩,精子头部和颈部被俘入卵内;约300sec左右出现第二极体。文中对卵孔管出现的这两种物质进行了浅析。     

真鲷能量收支和氮与碳收支的初步研究

以真鲷 (起始体重 :1 1 .5～ 1 4.8g)为实验对象 ,在平均水温 2 4.5 7℃下 ,进行饱食状态下的真鲷幼鱼摄食 -生长实验 ,饵料为玉筋鱼 ;对其摄食量、生长及粪便进行直接测定 ,对能量收支、氮和碳收支各组份进行估计和计算。结果表明 ,真鲷幼鱼的能量分配对策是 ,需较多的能量维持其代谢需求 ,同时 ,有较多的氮和碳随代谢产物排出体外 ,从而导致较低的能量生长及物质生长。     

黑鲷、真鲷及其杂交子代基因编码区微卫星序列及密码子偏好性分析

本研究采用生物信息学方法分析比较了黑鲷、真鲷及其两种杂交子代基因编码区(Coding sequence.CDS)中微卫星序列(简单重复序列.SSR)的分布规律及密码子偏好性。结果表明:(1)黑鲷、真鲷及其两种杂交子代微卫星序列均以三碱基重复类型为主,其次为二碱基重复,片段长度大多数在12—20bp之间。(2)黑鲷与反交(黑鲷♀×真鲷♂)在三、五碱基中优势基元类型相同,真鲷与正交(真鲷♀×黑鲷♂)在三碱基中优势基元类型相同,而黑鲷与正交在四碱基中优势基元类型相同。(3) UUC、UAC等28个密码子为黑鲷、真鲷及其两种杂交子代基因编码区的偏好性密码子,偏爱使用以C或G结尾的密码子,且第三位密码子碱基的GC含量(GC3s)均高于基因编码区平均GC含量。(4)真鲷与正交的密码子使用的偏好性相似,一定程度上说明黑鲷、真鲷杂交子代偏母系遗传。分析结果将为研究鲷科鱼类微卫星标记、研究其群体遗传多样性、构建转基因表达系统和开展分子遗传育种提供理论基础。     

丁香酚对真鲷(♀)×黑鲷(♂)杂交子一代麻醉效果的研究

为探索丁香酚对真鲷(Pagrosomus major)(♀)×黑鲷(Acanthopagrus schlegelii)(■)杂交子一代的麻醉效果,作者研究了麻醉剂浓度、温度、鱼体规格对鱼体麻醉和复苏的影响,不同麻醉浓度下鱼体呼吸频率的变化,以及麻醉时间和空气中暴露时间对鱼体复苏的影响。结果表明,丁香酚质量浓度为30 mg/L时,对杂交鱼具最佳麻醉效果;温度对丁香酚麻醉效力具有促进作用;麻醉和复苏时间受鱼体规格的影响较小,小规格杂交鱼对丁香酚耐受性稍强;丁香酚质量浓度≤20 mg/L对呼吸频率没有明显影响,质量浓度≥30 mg/L,呼吸频率迅速下降;鱼体在30 mg/L的丁香酚溶液中麻醉时间不宜超过14 min;深度麻醉状态下,空气中暴露9 min以内不会引起鱼死亡。研究将为杂交鱼活体操作和转移运输提供参考。     

真鲷(Pagrosomus major)肠上皮组织中类立克 次体的超微形态与细胞病理学的初步研究

运用电镜技术对青岛地区患病真鲷进行了病原体检测,在肠上 皮组织细胞中发现一种类立克次体病原体。研究表明,该病原体具有完整的细胞包膜, 内部 具有低电子密度拟核,在胞浆中以两种类型存在-繁殖型和静止型;繁殖型类立克次体呈圆 形、椭圆、哑铃、长棒状,其长轴为0.2～0.8μm,形成包涵体,以分裂方式进行增殖;静止 型类立克次体为圆形,中等电子密度,直径为40～70nm,由繁殖型类立克次体出芽增殖形成 ;线粒体参与了包涵体的形成和类立克次体的增殖过程。细胞病理变化为上皮细胞肿胀并部 分解体,微绒毛破坏,线粒体变形,部分内嵴溶解;内质网膨胀,核糖体脱落。类立克次体 是导致鱼类病害的重要病原体。     

杂交鲷和黑鲷幼鱼的代谢率及排泄率比较

杂交鲷是以真鲷为母本,黑鲷为父本的杂交F1代品种,为了比较杂交鲷与黑鲷的代谢特征,采用静水密闭式呼吸仪测定了13、18、23、28、33℃（32℃）5个温度下杂交鲷和黑鲷幼鱼的代谢率及排泄率.结果表明：13~28℃温度下,杂交鲷和黑鲷幼鱼的代谢率、排泄率均随温度的升高而升高,28℃时杂交鲷和黑鲷幼鱼的代谢率、排泄率分别为14.22±0.95、0.39±0.02 J/（g.h）和17.47±0.14、0.43±0.02 J/（.gh）,分别是其13℃时的5.69、4.05倍和4.01、3.73倍;且各温度下黑鲷的代谢率始终高于杂交鲷,前者是后者的1.23~1.73倍;杂交鲷和黑鲷幼鱼分别在32℃和33℃时代谢率比28℃下跌了22.23%和3.83%,证明该温度已分别超出了这2种幼鱼的最高适温;杂交鲷和黑鲷幼鱼28℃时的窒息点溶解氧含量分别为1.94、1.40 mg/dm3,低于真鲷21℃时的窒息点溶解氧含量（2.30 mg/dm3）;O∶N原子比值结果显示,28℃时蛋白质供能比最低,生长积累速度最快,是2种幼鱼的最适温度.综合分析认为,杂交鲷幼鱼具有代谢率显著低于亲本的优点,也继承了父本耐低温的特点,但同时失去了亲本耐高温、耐低氧的特点,并出现了应激反应大等不良性状.     

黑鲷视网膜结构与视觉特性研究

黑绸Ｓｐａｒｕｓｍａｃｒｏｃｅｐｈａｌｕｓ（Ｂａｓｉｌｅｗｓｋｙ）视网膜中存在视杆、单锥和孪生双锥三种光感受细胞，视杆与视锥的比例较大，为６７：１。每一双极细胞接受约５—８个视杆的输入，每一神经节细胞接受约１７—２５个双极细胞输入，表明神经节细胞有较大的感受野。视网膜细胞这种形态组合有利于提高视网膜对光的敏感性，与黑鲷生存的浅海底层弱光环境相适应。黑鲷的视杆色素经测定为视紫红质ＶＰ４８５１（吸收光谱峰值为４８５ｎｍ），其吸收光谱与黑鲷栖息水层中日光能量分布相对应，也与该水层中的生物光场相适应。黑鲷暗视光谱敏感曲线峰值与视紫红质吸收光谱曲线相一致，均在４８５ｎｍ处。此外，黑鲷光谱敏感曲线存在普氏位移，表明黑鲷具有辩色力。     

黑鲷和青石斑鱼对气泡幕反应的比较

在室内水池中观察了黑鲷（Ｓｐａｒｕｓｍａｃｒｏｃｅｐｈａｌｕｓ）和青石斑鱼（Ｅｐｉｎｅｐｈｅｌｕｓａｗｏａｒａ）对孔径０．５ｍｍ、孔距５．０ｃｍ，空气压力０．２５ｋｇ／ｃｍ２固定气泡幕的反应。结果表明，气泡幕对两种海水鱼都有显著的阻拦作用，平均阻拦率分别为黑鲷７５．１％、青石斑鱼８２．４％。分析显示，气泡幕对两种鱼的阻拦率间无显著差异。在本实验中，该两种鱼对气泡幕均无明显的适应现象     

盐度变化对黑鲷生长激素及其受体的影响

将海水鱼类黑鲷Sparusmacrocephalus从盐度为26.6的海水直接转入淡水,考察渗透压的急剧降低对黑鲷的生长激素(growthhormone,GH)及其受体(growthhormonereceptor,GHR)等生理指标的影响。研究发现:(1)黑鲷从海水直接转入淡水后48h有33%的鱼死亡,对照组无死亡现象;(2)黑鲷在转入淡水48h内其血清生长激素(GH)含量、肝脏及鳃中GHR及GHRmRNA含量与对照组均无显著差异;(3)黑鲷在转入淡水48h后其肾脏中GHR含量较对照组显著升高(p<0.05),肾脏中GHRmRNA含量在24h及48h显著高于对照组(p<0.05)。结果表明,从GH含量看,黑鲷从海水环境到淡水低渗环境与鲑鳟鱼类从淡水到海水环境的适应性调节机制有差异,而黑鲷肾脏中GHR的含量变化可能参与黑鲷对外界环境渗透压的这种急剧降低的适应性调节。     

余氯对大亚湾海区平鲷和黑鲷幼鱼的毒性研究

用含游离余氯、化合余氯的海水分别对大亚湾平鲷Rhabdosargussarba、黑鲷Sparusmacrocephalus浸毒处理30min和60min。结果表明,两种形态余氛对色的耗氧率有明显抑制作用,游离余氯对平鲷、黑鲷的48hLC50分别为0．19和0．18mg·L－1,48hLC1分别为0．07和0.06mg·L－1;化合余氯的48hLC50分别为0.56和0．60mg·L－1,48hLC1分别为0．21和0．24mg·L-1。游离余氯的毒性大约是化合余筑的6倍。游离余氯、化合余氯安全阈限估算值分别为0．09和0．28mg·L－1,稍高于48hLC1。     

不同温度保存对黑鲷精子生理特性的影响

分别采用室温(21℃左右)、低温(3—5℃,冰箱)和超低温(-196℃,液氮)保存黑鲷Sparusmacrocephalus(Basilewsky)精子,探讨不同温度保存对黑鲷精子生理特性的影响。在室温条件下,黑鲷精子活力随保存时间的延长而下降,保存4h后的精子失去激烈运动的能力。在低温条件下,黑鲷精子寿命有所延长。黑鲷精子经过超低温保存后,其激活率、受精率与鲜精的接近,精子活力则有所下降。黑鲷新鲜精子在海水盐度为10时能被激活,但经过超低温保存后的黑鲷精子激活所需的最低盐度必需在10以上。     

真鲷三倍体诱导初步研究

在真鲷Pagrosomusmajor三倍体诱导研究中，对染色体倍数的分析表明，受精卵受精5min后，在1．5℃冰水中处理5min，可获得17％的三倍体诱导率和28％的嵌合体比率，染色体数分别是：2N＝48，3N＝7Z，嵌合体50—68。仔鱼红血细胞测量和组织切片分析显示，三倍体和二倍体的红血细胞核直径（长径，下同）、视网膜神经节细胞核直径和中脑细胞核直径大小存在差异，其比率分别是1．42，1．35和1．41，这种差别必然导致三倍体鱼和二倍体鱼在代谢与功能方面的差异。应加强对鱼类三倍体形成机制及应用潜力的研究，同时注意开展其生理学、生化学和行为学的比较研究。     

保存和激活对真鲷精子生理特性的影响

就真鲷Pagrosomusmajor的新鲜精子和冷冻保藏精子的活力特性及对环境变化的适应进行了研究。结果表明,真鲷精子在普通冰箱的冷冻室（-15℃）中能存活120h以上;淡水对真鲷精子具有可逆的抑制作用;液氮保存使精子对pH值和盐度变化的适应性更强。     

真鲷早期发育阶段的摄食节律

真鲷ＰａｇｒｏｓｏｍｕｓｍａｊｏｒＴｅｍｍｉｎｃｋｅｔＳｃｈｌｅｇｅｌ早期发育阶段的摄食具有明显的昼夜节律性。摄食主要在白天进行，以０６：００─１０：００和１４：００─１８：００摄食活动最为活跃，表现出近晨昏摄食的特点。在晚上黑暗状态下，只有幼鱼表现出明显摄食，仔、稚鱼基本不摄食．这一结果为真鲷人工养殖提供给饵的科学依据。