尖刀蛏和小荚蛏不同组织同工酶的比较分析

通过聚丙烯酰胺凝胶垂直板不连续电泳对尖刀蛏外套膜、鳃、肝胰腺和足等4种组织和小荚蛏外套膜、足和内脏团等3种组织的9种同工酶进行研究。结果表明,两种蛏相应组织不同同工酶的分布既具一定组织特异性,也存在一定种属特异性,且两种蛏的种属差异明显大于同种蛏的组织间差异。其中,尖刀蛏与小荚蛏在足组织间差异最大,而尖刀蛏肝胰腺与小荚蛏内脏团两组织间的差异相对较小。由于不同种蛏各具其稳定的酶谱表型,故可利用两种蛏同工酶酶谱表型的特异性作为蛋白质分子标记而应用于刀蛏科不同属蛏的物种鉴定。     

中华绒螯蟹不同发育阶段腹肢粘液腺同工酶的比较

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对中华绒螯蟹不同发育阶段(幼蟹、未成熟蟹、成熟蟹及抱卵蟹)腹肢粘液腺的乳酸脱氢酶(LDH)、醇脱氢酶(ADH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、过氧化物酶(POD)、酯酶(EST)及淀粉酶(AMY)等同工酶进行研究。结果表明不同发育阶段中华绒螯蟹腹肢粘液腺中，LDH同工酶的表达较稳定，均只有一条酶带，酶活性呈逐步减弱趋势，至抱卵蟹时活性又增强；ADH同工酶在不同发育阶段酶带数及酶活性也呈减少趋势，至抱卵蟹时又重新增加；MDH同工酶有m-MDH和s-MDH两种类型，其比值随发育阶段不同有一定变化；不同发育阶段POD同工酶活性均较弱；EST同工酶至抱卵蟹时酶带数最多，活性相对最强；AMY同工酶随不同发育阶段，酶带数及酶活性呈逐步复杂趋势。     

彩虹明樱蛤同工酶组织特异性研究

采用聚丙烯凝胶垂直电泳技术和同工酶特异性染色方法,对彩虹明樱蛤(Moerella iridescens)的斧足、肝胰腺和外套膜3种组织的酯酶(EST),苹果酸脱氢酶(MDH)和超氧化物歧化酶(SOD)3种同工酶进行了分析.结果表明,这3种酶在上述3种组织中均得到了表达,不同的酶既存在一定的组织特异性又有相似性的特点,EST在3种组织中分别产生7-8条酶带,分为4个带区,其中EST-3和EST-6在3种组织中均为保守存在的强带,而斧足中缺失EST-1、EST-8和EST-9,肝胰腺中缺失EST-1和EST-2,外套膜中缺失EST-2和EST-8;MDH在3种组织中有4～5条酶带,MDH-2在斧足中缺失,MDH-3在外套膜中缺失,而处于s-MDH的MDH-4和MDH-5在3种组织中保守存在.SOD在3种组织中共表现为4条酶带,酶谱无明显变化,组织间无明显差异,这一特殊性可以用其作为生化遗传标记对彩虹明樱蛤进行种质鉴定.     

黄河鲤鱼和鲤鱼同工酶的研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳，分析了黄河鲤鱼Ｃｙｐｒｉｎｕｓ ｃａｒｐｉｏｈａｅｍａｔｏｐｔｅｒｕｓ和鲤鱼Ｃｙｐｒｉｎｕｓ ｃａｒｐｉｏ的脑、肝、心、肾、肌、眼等六种组织器官的乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶和脂酶（ＥＳＴ）同工酶。结果表明：在不同组织中两种同工谱带各不相同，存在着明显的组织特异性。黄河鲤鱼和鲤鱼的乳酸脱氢酶谱带相似，但存在一定的差异性；除在眼、心、肾三种组织中黄河鲤鱼比鲤鱼多一条     

温度变化对刺参同工酶的影响

采用同工酶电泳方法,对在不同温度处理下刺参(Apostichopus japonicus)的乳酸脱氢酶(LDH)、酯酶(EST)和超氧化歧化酶(SOD)的表达情况进行分析。本文结果显示刺参组织内无LDH同工酶的表达。在10℃到20℃的温度突变处理中,12 h内EST和SOD均有新增酶带,在20℃到10℃的温度突变1 h内EST表达有新增酶带。3 h内SOD表达有新增酶带。在不同变温幅度的处理中,EST和SOD只有1条酶带。这表明,刺参对温度突变可产生积极的响应,对于其适应环境温度的变化具有重要意义。     

一种海洋拟诺卡氏菌产生的胞内中性β-葡萄糖苷酶

从一株海洋放线菌株HY-G中纯化得到了一种胞内中性β-葡萄糖苷酶。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Superdex 200凝胶柱层析估计酶分子质量分别是43.3 kD和45.0 kD,两者估计值接近,表明该酶是一个单聚体,不含亚基。采用对硝基酚基-β-D-葡萄糖苷(p-NPG)做底物,测得该酶的最适pH和最适温度分别为pH 7.5和40?C。该酶在pH 6.0～7.0最稳定,在70?C保温30 min仍能保留56%的酶活力,表明具有一定的温度稳定性。基于16S rRNA基因的分类研究表明,该菌株属于拟诺卡氏菌属。     

口虾蛄超氧化物歧化酶同工酶的组织特异性研究

以口虾蛄为材料进行研究，用聚丙烯酰胺凝胶电泳法，对其肌肉、心脏、腹鳃、肝胰腺及眼球5种组织器官进行超氧化物歧化酶(SOD)同工酶的研究分析。结果表明：不同组织中超氧化物歧化酶(SOD)的同工酶谱带存在差异，具有明显的组织特异性。眼球、腹鳃、肝胰腺和心脏中有2条酶带，肌肉中几乎不表达，心脏中SOD2和肝胰腺中SODl谱带表达最浓，而腹鳃中的酶带表达最弱。     

三种蛏不同组织同工酶的比较分析

通过对竹蛏科的缢蛏、细长竹蛏、长竹蛏5种组织(鳃、消化腺、外套膜、足、水管)聚丙烯酰氨垂直板状不连续电泳，研究了醇脱氢酶、苹果酸同工酶、苹果酸脱氢酶、超氧化物歧化酶、异柠檬酸脱氢酶等5种同工酶酶谱。结果表明，三种蛏相应的酶带迁移率组成分布有明显种属差异，三种蛏的种属差异明显大于组织间差异。不同种间的个体其酶谱表型有稳定的差异，这些差异是有关基因表达和调控的差异所造成的。可利用其酶谱表型具有种特异性作为一种蛋白分子标记，应用于竹蛏科物种的鉴定上。     

不同年龄泥蚶同工酶电泳的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，对同一种群不同年龄的泥蚶过氧化物酶、酯酶、淀粉酶、苹果酸脱氢酶、过氧化氢酶、醇脱氢酶、苹果酸酶和超氧化物歧化酶等8种同工酶进行了分析比较。结果表明，不同年龄泥蚶的过氧化物酶、酯酶同工酶在酶谱带上有一定差异。淀粉酶、苹果酸脱氢酶、过氧化氢酶、醇脱氢酶、苹果酸酶和超氧化物歧化酶同工酶在酶活性上有一定的差异。     

凡纳对虾个体发育早期的同工酶研究

采用聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳技术，对凡纳对虾(Penaeus vannamei)个体发育早期6个时期的11种同工酶系统(EST、ALP、ACP、GDH、MDH、LDH、AAT、ME、LAP、ADH、AMY)进行研究。结果表明，凡纳对虾在幼体发育阶段已基本具备分解代谢蛋白质、脂类、碳水化合物的酶系。在早期发育过程中，EST同工酶系最为复杂，显示5-15条谱带，至少由6个位点编码；整个发育早期阶段GDH表达很弱，未见R-AMY及Q_AMY的表达；ALP、GDH、AMY及EST在无节幼体期表达很弱或未见表达；ACP、MDH、ME、ADH及AMY酶谱从糠虾幼体第Ⅲ期开始谱带数明显增加；除LAP、AAT酶谱简单且各期变化差异不大外，其它9种同工酶均随发育进程表现出明显差异。     

硬壳蛤同工酶的组织特异性研究

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对硬壳蛤5种组织(足、外套膜、闭壳肌、鳃和肝)的酯酶(EST)、苹果酸脱氢酶(M DH)和乳酸脱氢酶(LDH)同工酶进行了比较研究,并对酶谱表型及位点表达进行了分析。结果表明,硬壳蛤上述组织的EST和M DH同工酶存在不同程度的组织特异性,而LDH没有组织特异性。在EST酶谱中,肝组织染色最深,说明其EST活性最高,这与肝脏为重要的消化腺和解毒器官相适应。在M DH酶谱中发现了s-M DH和m-M DH所形成的谱带,闭壳肌的M DH谱带染色很深,这与肌肉需要由三羧酸循环提供大量ATP相适应。     

黄鳍鲷LDH同工酶的组织特异性研究

以黄鳍鲷为材料进行两方面研究:（1）用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，对其肌肉，心脏，肝脏，血清，玻璃体，晶状体，脑等组织器官进行LDH同工酶分析比较，结果表明，不同组织中LDH的同工酶谱带不相同，存在着组织特异性：（2）用聚丙烯酰胺等电聚焦电泳法对其肌肉，血清的LDH同工酶进行分离 ，结果得到12－15条电泳区带，等电点范围在pH为3．65－9．58之间。     

中国北方孤雌生殖卤虫发育同工酶的初步研究

利用聚丙烯酰胺凝胶生趣平板电泳法，对中国北方孤雌生殖卤虫个体发育中的酯酶（ＥＳＴ）和淀粉酶（ＡＭＹ）进行出工酶的初步研究，得出：两种同工酶的均随卤虫发育表现出差异性。ＥＳＴ共显示出７条酶带，由无节幼体期的一条酶带增至成熟期的７条酶带；ＡＭＹ共检测出两种，即α－ＡＭＹ和Ｒ－ＡＭＹ，其中α－ＡＭＹ，２条酶带，４条酶带，且ＡＭＹ酶活性随发育渐增。     

褐藻酸钙凝胶固定化木瓜蛋白酶的研究

STUDIESONIMMOBILIZATIONOFPAPAINBYCALCIUMALGINATEGELS褐藻酸盐凝胶是固定化酶和固定化细胞的理想载体,已广泛地应用于纺织工业,塑料工业,食品和医药工业中[1~3]。本实验以褐藻酸钙凝胶作为载体,用包埋的方法来固定木瓜蛋白酶。通过正交设计试验法探讨了最佳固定化条件,测定了固定化酶的催化特性和动力学性质：固定化酶的最适pH值,最适温度和表现米氏常数。并且还对固定化酶的热稳定性,固定化酶的半衰期,固定化酶和游离态酶的活性进行了比较;初步探讨了固定化酶在工业生产上应用的可能性。1材料和方法1．l…     

无裂栉江珧种内同工酶表型差异的比较研究

采用垂直板聚丙烯酰安梯度凝胶电泳对４种不同类型无裂栉江珧Ａｔｒｉｎａ ｐｅｃｔｉｎａｔａ的肾脏、后闭壳肌和鳃组织进行了酯酶（ＥＳＴ）、过氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、苹果酸酶（ＭＥ）５中同工酶的比较研究。结果表明这４种类型的酶谱表达有差异,特别是肾组织的ＥＳＴ,后闭壳肌的ＥＳＴ、ＳＯＤ和鳃组织的ＳＯＤ、ＭＤＨ的酶谱表型差异明显,其特征谱带可作为区别无裂栉江珧种内差异的一种分子标记。     

无裂栉江珧种内同工酶表型差异的比较研究

采用垂直板聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳对 4种不同类型无裂栉江珧Atrinapectinata的肾脏、后闭壳肌和鳃组织进行了酯酶 (EST)、过氧化物歧化酶 (SOD)、乳酸脱氢酶 (LDH)、苹果酸脱氢酶 (MDH)、苹果酸酶 (ME) 5种同工酶的比较研究。结果表明这 4种类型的酶谱表达有差异 ,特别是肾组织的EST ,后闭壳肌的EST、SOD和鳃组织的SOD、MDH的酶谱表型差异明显 ,其特征谱带可作为区别无裂栉江珧种内差异的一种分子标记。     

克氏原螯虾LDH同工酶的组织特异性研究

以克氏原螯虾为材料,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,分析了肌肉、眼球、肝胰腺和心脏4种组织和器官中乳酸脱氢酶（LDH）同工酶的表达情况。结果发现,眼球中出现Ldh-5和Ldh-62条酶带,肌肉中出现Ldh-1、Ldh-2、Ldh-3、Ldh-4、Ldh-5共5条酶带．肝胰腺中只出现Ldh-61条酶带,心脏中出现Ldh-3和Ldh-5共2条带。在这些检测到的酶带中,肌肉中Ldh-5活性最强,染色最深。实验结果表明,不同组织中LDH的同工酶的表达存在差异。表现出明显的组织特异性。     

养殖石斑鱼溃疡病病原哈维氏弧菌胞外产物的研究

以网箱养殖的患溃疡病青石斑鱼(Epinephlus awoara)和斜带石斑鱼(Epinephlus co-ioides)分离的哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)TS-628菌株为研究对象,采用平板玻璃纸覆盖技术,获得该菌株的胞外产物(ECP),并对其成分进行分析。利用杯碟法研究表明,哈维氏弧菌TS-628菌株的胞外产物具有酪蛋白酶、明胶蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、卵磷脂酶等多种酶活性和溶血活性,且溶血性物质具有热不稳定性。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及考马斯亮蓝R-250染色分析表明,ECP蛋白条带主要集中在分子质量范围25.0~66.2 ku之间,经不同时间培养所获得的ECP在凝胶上显示出的蛋白条带几乎一致。采用复性电泳方法(G-PAGE)分析了哈维氏弧菌及其它4种弧菌属细菌的ECP蛋白酶活性,结果发现哈维氏弧菌ECP在酸性条件下,蛋白酶活性较强,在碱性条件下,蛋白酶带明显减少,活性很弱。在相同的pH条件下,5种弧菌中以副溶血弧菌的ECP蛋白酶活性最强,种类多,分子质量范围宽;而哈维氏弧菌的蛋白酶带较少,活性也稍弱。     

克氏原鳌虾LDH同工酶的组织特异性研究

以克氏原螯虾为材料,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,分析了肌肉、眼球、肝胰腺和心脏4种组织和器官中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的表达情况.结果发现,眼球中出现Ldh-5和Ldh-6 2条酶带,肌肉中出现Ldh-1、Ldh-2、Ldh-3、Ldh-4、Ldh-5共5条酶带,肝胰腺中只出现Ldh-6 1条酶带,心脏中出现Ldh-3和Ldh-5共2条带.在这些检测到的酶带中,肌肉中Ldh-5活性最强,染色最深.实验结果表明,不同组织中LDH的同工酶的表达存在差异,表现出明显的组织特异性.     

蛋白质

海洋中的各种生物,从原核细胞到各种真核生物细胞,都是蛋白质的具体体现。 蛋白质是活的有机体的主要成份。蛋白质的结构和功能,可以看作是生命本身的一个属性。其主要功能是可以作为酶、抗体、结构成份、运输工具和代谢的调节者。作为酶的蛋白质,具有控制着有机分子的合