日本对虾幼体对卤虫无节幼体摄食量的研究

在对虾人工育苗生产中,卤虫是重要的生物饵料。卤虫无节幼体营养丰富,能促进对虾幼体的变态发育,提高对虾幼体成活率。但是,对虾早期幼体摄食卤虫能力较弱,若卤虫投喂过量,不仅造成浪费,而且过量的卤虫在育苗池中快速生长,饵料生物成了养殖对象,不利于水质的管理和控制。日本对虾（Ｐｅｎａｕｓｊａｐｏｎｉｃｕｓ）早期仔虾幼体有相互攻击、残食的习性,若卤虫投喂不足,相互残食的现象将更为严重。因此,了解日本对虾幼体摄食卤虫无节幼体的习性,从而适当掌握卤虫的投喂量,在生产上有着现实的意义。１材料与方法１．１材料实验…     

拟穴青蟹大眼幼体对卤虫的摄食率和摄食选择

研究了拟穴青蟹（Scylla paramam osain）大眼幼体在不同饵料密度和组合条件下对卤虫（Ar-tem iasp.）无节幼体及成体的摄食率、摄食节律等,发现：光照-视觉因素对拟穴青蟹大眼幼体捕食卤虫无节幼体的数量无显著影响,但对捕食卤虫成体的影响显著（p〈0.05）.饵料密度较低（如卤虫无节幼体密度〈10 ind/cm3）时,饵料密度与拟穴青蟹大眼幼体摄食率呈正相关;饵料密度较高时饵料密度变化对拟穴青蟹大眼幼体摄食率的影响不显著（p〉0.05）.禁食后投饵,在高饵料密度（如卤虫无节幼体密度≥10 ind/cm3）下拟穴青蟹大眼幼体的摄食率在短时间（如4 h）较高,随供饵时间的延续摄食率开始下降,较长时间（24 h）摄食率显著较低.以干重计,拟穴青蟹大眼幼体对卤虫成体的摄食率全面高于对卤虫无节幼体;但混合投喂卤虫无节幼体和成体时拟穴青蟹大眼幼体摄食的卤虫成体数量较少,表明在卤虫无节幼体和成体同时存在的情况下拟穴青蟹大眼幼体倾向于放弃卤虫成体捕食无节幼体.拟穴青蟹大眼幼体的摄食行为受到被捕食风险和饵料斑块分布的显著影响.育苗生产中对拟穴青蟹大眼幼体投喂卤虫无节幼体的密度无需高于10 ind/cm3.     

中国卤虫(Artemia sinica)早期胚胎发育相关基因表达序列标签(ESTs)分析

以mRNA差异显示技术分析了中国两性生殖卤虫早期胚胎发育相关基因的表达序列标签(ESTs),共回收了2000条差异条带并进行了克隆、测序,在GenBank/DDBJ/EMBL数据库中用BLASTX和BLASTN软件分别与NCBI上的非冗余核酸序列数据库进行同源性比对,得到分值较高、长度在100bp—2kb以内的ESTs序列133条。所发现的133条ESTs的生物学功能分类为:能量代谢占24%、细胞生长、分裂相关基因占23%、RNA相关占17%、体节形成占12%、蛋白质合成占3%、转录因子占3%、离子转运占5%、细胞信号转导占4%、未知占9%。对所发现的ESTs进行了RT-PCR测定,排除假阳性能够提供足够数量的信息用于获取其全长cDNA,进而获得其全长基因序列以用于功能研究。另外,研究发现了包括小热休克蛋白基因家族、Hox基因家族的abdA和Dfd基因、A-trh基因(排盐器官及盐调节基因)、HIF(缺氧诱导因子)、CK-M2(肌肉型磷酸激酶基因)和GRP基因(富甘氨酸蛋白基因)等20个具有明显功能的相关基因的ESTs和完整基因序列和开放阅读框(ORF)。经初步推断这些ESTs和基因的功能大多为与卤虫发育的生理、生化相关的基因有关。所研究的133条ESTs基本代表了卤虫早期胚胎发育相关功能基因的表达谱。     

中国卤虫早期胚胎发育相关基因的研究--mRNA差异显示技术的三种不同染色方法比较

利用mRNA差异显示技术研究中国孤雌生殖卤虫胚胎发育的相关基因，并对中国孤雌生殖卤虫差异显示中SYBR Green Ⅰ、硝酸银和溴化乙锭三种染色方法进行了比较。以三种单碱基锚定引物对发育0h，4h，8h，12h，16h和10天的中国孤雌生殖卤虫的RNA进行逆转录和26种随机引物进行PCR反应，经非变性的6％聚丙稀酰胺凝胶电泳后，分别用SYBR Green Ⅰ、硝酸银和溴化乙锭染色，最后进行差异条带的回收和再扩增。结果表明：(1)6种样本的DD-PCR产物显示长200-3．0k不等的扩增片段，条带清晰，并呈现出有无和强弱的变化(2)SYBR Green Ⅰ和硝酸银染色的灵敏度比溴化乙锭染色的灵敏度高(3)经SYBR Green Ⅰ和溴化乙锭染色的凝胶的回收和再扩增效率比硝酸银染色的高(4)水煮法和NAP-25过柱法对凝胶片段的回收效果几乎相当。利用mRNA差异显示技术研究中国孤雌生殖卤虫胚胎发育相关基因时，得到了较好的扩增片段；三种染色方法中SYBR Green Ⅰ染色灵敏度较高，并且SYBR Green Ⅰ染色有利于凝胶片段的回收和再扩增。     

蛋氨酸和裂壶藻强化对卤虫体内游离氨基酸含量的影响

以卤虫(Artemia parthenogenetica)无节幼体作为试验材料,研究蛋氨酸或裂壶藻(Schizochytrium sp.)强化对卤虫体内游离氨基酸(FAA)含量的影响。试验分为4组,分别为蛋氨酸(Met)组、裂壶藻组、蛋氨酸加裂壶藻组以及对照组,试验进行16 h,每4 h取样1次。结果显示：试验结束时,蛋氨酸组的卤虫体内游离Met含量显著高于裂壶藻组(P<0.05)。除对照组的丝氨酸(Ser)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)含量显著高于蛋氨酸+裂壶藻组外(P<0.05),其他所有的必需氨基酸及非必需氨基酸含量在16h时都没有显著差异。试验过程中FAA水平随时间的变化趋势为：对照组和蛋氨酸组基本上呈现先减少再升高的趋势,且16 h和0 h的含量差别不大;裂壶藻组和蛋氨酸加裂壶藻组的卤虫,其体内FAA含量基本上呈下降趋势,或小幅升高后下降,16 h时的含量大多低于0 h时。试验结果表明：给卤虫无节幼体强化Met可以提高其体内Met含量,对其他种类的FAA影响不大。     

锯缘青蟹幼体饵料蛋白质的营养价值评价

本文分析测定了锯缘青蟹幼体从刚孵化至大眼幼体各发育阶段及其饵料轮虫和卤虫无节幼体的氨基酸组成，并使用必需氨基酸指数(EAAI)来评价饵料蛋白质的质量.结果表明，青蟹各期幼体的氨基酸组成基本趋于一致，且与饵料转换不存在明显的相关性.对于各期幼体，饵料轮虫和卤虫无节幼体的必需氨基酸指数均大于90，可以认为，轮虫和卤虫无节幼体能够满足锯缘青蟹幼体对饵料中必需氨基酸的营养需求.     

卤虫(Artemia salina)卵孵化条件、网箱孵化和幼体收集时机的研究

本文研究了温度、盐度、pH和光刺激对卤虫卵孵化的影响,提出了本品系卤卵大量孵化的最适孵化温度、盐度和pH控制范围,并就孵化时对卤虫卵进 行室内自然光刺激持续的时间和阶段进行了试验,发现光刺激也可在孵化前进行。本试验首次应用23cm×23cm×40cm的网箱进行卤虫卵的孵化,其效果比相同水体的水泥池约提高一倍。本文还从无节幼体的活力、孵化水质的变化和孵化高蜂期等方面,探讨了卤虫卵大量孵化时无节幼体的收集最有利时机。     

中华卤虫无节幼体蛋白质组的双向凝胶电泳分析

应用双向凝胶电泳和图像分析手段,对比了卤虫（Artemia）初孵无节幼体和孵化24h无节幼体中蛋白表达的变化情况。结果显示。随着卤虫幼体的发育,蛋白表达的种类和个数均明显增多。仅有个别蛋白的表达量下调。这些差异表达的蛋白可能跟卤虫幼体的发育过程密切相关或起重要的调节作用。     

荧光原位杂交技术的发展及其在染色体基因定位中的应用

自1969年Gall和Pardue利用放射性同位素标记的DNA探针检测细胞制片上非洲爪蟾细胞核内的rDNA获得成功之后 ,Pardue等同年又以小鼠卫星DNA为模板 ,利用体外合成的含 3H的RNA为探针成功地与中期染色体标本进行了原位杂交 ,从而开创了RNA DNA的原位杂交技术。为了精确地定位目的基因 ,1974年Evans第一次将染色体显带技术和原位杂交技术结合起来 ,提高了基因定位的准确性。1977年Rudkin等发明了用间接免疫荧光法检测目的DNA的非同位素原位杂交技术 (nonisotopicinsituhybridiza tion ,NISH) ,其大致过程是首先制备抗DNA RNA复合…     

不同处理对卤虫卵的孵化特征影响的初步研究

本文对四个品系的卤虫卵在自来水浸泡2h和脱壳处理下的孵化特征进行了初步研究;并对干卵、自来水浸泡2h的湿卵、不脱壳孵化12h的湿卵以及脱壳孵化12h的湿印进行了常规组织学制片。结果表明,不同处理下卤虫卵的孵化特征不同,其结构也有一定的差异。     

3种海藻单一或混合投喂对卤虫的饵料效果研究

用亚心形扁藻、绿色巴夫藻、极大螺旋藻为基本饵料,以纯投单胞藻或单胞藻中添加螺旋藻的方式来培养卤虫。结果表明:不同饵料搭配养殖卤虫的效果差异明显。纯扁藻和绿色巴夫藻搭配扁藻的养殖效果比较理想,卤虫成活率高,生长快速,生殖力大。极大螺旋藻养殖效果差。     

腺带刺沙蚕的早期发育

１９８３年７—１２月于室内进行了腺带刺沙蚕Ｎｅａｎｔｈｅｓｇｌａｎｄｉｃｉｎｃｔａ人工授精、孵化及幼体培养观察．该种沙蚕在性成熟时没有异沙蚕型出现。水温在１３．０—２９．３℃范围内，沙蚕均能完成胚胎发育和幼体发育。担轮幼虫期在膜内渡过，五刚节疣足幼虫开始摄食，七剧节疣足幼虫开始钻砂，沙蚕幼虫体节在２０节之前体节与体长呈明显的直线正相关。     

中国六个盐湖卤虫品系生物学特征的研究

本文对中国六个盐湖卤虫卵的孵化速率，卵、脱壳卵、无节幼体的生物学测定值，成体的形态及染色体倍性组成进行了研究。结果表明，运城盐湖、工农湖、杭锦旗盐湖卤虫为两性生殖类型，均为二倍体。艾比湖、巴里坤湖、尕海湖卤虫为阪雌生殖类型，除二倍体外还有四倍体，其中巴里坤湖卤虫还有五倍林。两性生殖卤虫间无生殖隔离现象。两性生殖卤虫与阪雌生殖卤虫在生物学特征的诸方面均存在较大差异。     

卤虫在单细胞藻类培养中作用的初步观察

在扁藻（Ｔｅｔｒａｓｅｌｍｉｓｓｐ．和Ｐｌａｔｙｍｏｎａｓｓｐ．）藻液中接种适量的卤虫（Ａｒｔｅｍｉａｓａｌｉｎａ）,通过卤虫对藻液中细菌及原生动物等敌害生物的捕食作用,可以有效地控制敌害生物对藻类的危害。通过卤虫对藻液中衰老及死亡的藻细胞的捕食,可以使藻种得以优化。而且,通过卤虫的代谢作用,藻类生长所必需的营养元素得以还原。     

石油对紫贻贝早期发育影响的研究

紫贻贝(Mytilus edulis L.)不同发育阶段,对海洋石油污染的敏感性差异很大。本文初步研究了20号轻柴油,对胚胎和早期面盘幼虫生长发育的影响。研究结果表明,低浓度污染(1.25、2.50mg·L~(-1)),对早期生长率的影响较小;中等浓度(5.00mg·L~(-1))对生长率的影响显著(P<0.05);高浓度污染(10.00mg·L~(-1)),影响极显著(P<0.01)。油污染对早期发育死亡率影响较明显,随着浓度梯度的增加,早期发育阶段死亡率也随之增加。实验过程中发现,石油污染,对紫贻贝担轮幼虫阶段,有较强的致畸效应,而对面盘幼虫阶段的致畸效应,有所下降。随着胚胎不断发育,畸形个体大量死亡,畸形率有下降的趋势。