螺旋藻多糖对机体免疫功能的提高作用及其机理研究

螺旋藻多糖150～300mg/kg,无论注射或口服,均能提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数,增加外周血液中T淋巴细胞的百分数和血清溶血素的含量。说明螺旋藻多糖不但能提高机体非特异性的细胞免疫功能,而且能促进机体特异性的体液免疫功能。它的作用机理似与螺旋藻多糖能增强骨髓细胞增殖能力,促进胸腺、脾脏等免疫器官的生长和促进血清蛋白的生物合成有关;同时还与其能消除免疫拟制剂(环磷酰胺)对机体免疫系统的抑制作用有关。     

螺旋藻多糖对给予环磷酰胺BALB/C小鼠的保护作用研究

研究了螺旋藻多糖（ＰＳ）对环磷酰胺（ＣＹ）引起的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠造血功能等损伤的保护作用。当给小鼠ＣＹ时能同时给予ＰＳ时，就能大大减轻因给予ＣＹ经起的造血功能障碍；能明显减缓动物因使用ＣＹ的致的体重下降以及能明显减低因ＣＹ作用的死亡率，提示使用ＰＳ对预防或减轻化疗制剂的危害是具有明显作用的。为临床化疗、放疗病人使用ＰＳ提供了依据。     

三十烷醇对极大螺旋藻生物量及生化组成的影响

在Zarrouk液体培养基中加入1g/m3液体三十烷醇(LTA),极大螺旋藻(Spirulina maxima)的生物量增加了24.6%~25.7%,即使在碳源NaHCO₃减半(实验组2)的条件下生物量仍增加了4.43%~4.92%;碳水化合物含量增加了11.9%~16.0%,在实验组2条件下也增加5.7%~8.3%;叶绿素增加率为45.8%~63.3%;蛋白质总量基本不变,但水溶性蛋白的含量明显增加,从对照组的36%增长至实验组的60%左右,而水不溶性蛋白的含量则明显从30%左右减至10%左右.从螺旋藻生产基地的中试培养结果看,加入1g/m3液体三十烷醇,生物量提高了39.76%,比在实验室条件下获得更好的增产效果,但加入固体三十烷醇(STA)反而减少12%.以上结果表明,在极大螺旋藻培养基中添加液体三十烷醇可大幅度提高生物量和生化组成的含量.     

螺旋藻及其多糖、多糖蛋白提取物对体外癌细胞的抑制作用

螺旋藻多糖是螺旋藻的重要生物学活性成分,１９９１年刘力生等证明它对腹水型肝癌细胞及肉瘤１８０有杀伤抑制作用［１］;１９９６年日本科学家证明它有抗病毒及免疫力提高作用。本研究用热水浸提法提取螺旋藻多糖及多糖蛋白,并测定它对肺癌细胞,人白血病淋巴细胞及胃癌细胞的杀伤抑制作用。１材料及方法１．１样品及试剂来源钝顶螺旋藻（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａｐｌａｔｅｎｓｉｓ）、极大螺旋藻（Ｓ．ｍａｘｉｕｍ）及螺旋藻干粉由云南程海宏源生物技术公司提供,部分藻粉由本实验室自制。昆明种小鼠,重３０～４０ｇ,由昆明医学院提供。胃癌…     

螺旋藻多糖的积累与抗肿瘤作用的研究

在不同温度和光强下培养极大螺旋藻438(Spirulina maxim438),得到其积累多糖规律为:不利于螺旋藻生长的温度、光照条件,会促进胞外多糖EPS(extracellular polysaccharide,EPS)的分泌,而螺旋藻最适生长条件(30℃,5000lx)与胞内多糖IPS(intracellular polysaccharide,IPS)积累的条件一致。MTT(四甲基偶氮唑盐)法体外实验证明IPS和EPS对人宫颈癌Hela细胞有抑制作用,最佳作用浓度分别为80μg/mL,100μg/mL。Caspase-3试剂盒检测经两种多糖作用后Hela细胞Caspase-3酶的变化,结果显示:处理组比对照组Caspase-3酶活性有明显提高,预示着多糖抑制肿瘤细胞的机制可能是通过Caspase途径,引起细胞的凋亡。     

三种螺旋藻及其蛋白质、多糖和脂类结合硒的研究

于1992年9月—1995年1月将极大、钝顶、盐泽等三种螺旋藻在加4—100mg／L硒浓度的培养基内培养，研究藻细胞及其蛋白质、多糖和脂类结合硒的量，探讨硒的结合机理。结果表明，极大螺旋藻累积的硒随外加硒的浓度而增加，但累积系数接近平均值2．184；在同样的硒浓度（8mg／L）条件下，盐泽螺旋藻对硒的累积远大于极大和钝顶两种螺旋藻的，高达696．968×10－6；极大螺旋藻中蛋白质和脂类结合的硒分别占藻细胞含硒量的14．63％和16．05％，两者均高于其它两种藻中相对应的量；三种藻细胞多糖结合硒的能力均很弱，但胞外多糖结合硒的能力较强。根据实验结果推测，螺旋藻累积硒的机理一方面是大分子化合物的吸附作用，另一方面是通过生化过程使硒与蛋白质和脂类结合形成大分子化合物。     

硒在极大螺旋藻细胞中的分布特点及对生化组成的影响

研究了极大螺旋藻(Spirulina maxima)在实验室培养和规模化中试培养条件下,在其培养基中添加20×10-6Na2SeO3后,硒在其细胞中的分布特点及对生化组成的影响。结果表明,硒在细胞中的质量比可达126.7μg/g(实验室培养),甚至高达606.5μg/g(中试培养),其中主要分布于细胞中的蛋白质中,占总硒的69.4%(实验室培养),甚至可达94%(中试培养),比对照组增长了33.4%;糖类和脂类中硒仅占小部分,糖类1.4%,脂类2.7%~3.5%。20×10-6Na2SeO3的存在没有影响极大螺旋藻的生长,生物量反而提高了6.0%;其中糖类提高了49.6%,脂类25.0%,但蛋白质下降了11.1%。     

螺旋藻多糖对CD3AK细胞增殖能力的影响

研究了螺旋藻多糖（ＰＳ）对ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＭｃＡｂ Ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｋｉｌｌｅｒ Ｃｅｌｌｓ,ＣＤ３ＡＫ Ｃｅｌｌｓ）增殖能力的影响。结果表明,当ＰＳ浓度为２．５μｇ·ｍｌ＾－１培养体系条件下,对ＣＤ３ＡＫ细胞具有明显的刺激细胞增殖作用（Ｐ〈０．０２）;对培养长达２３ｄ的ＣＤ３ＡＫ细胞杀伤肿瘤细胞（Ｋ５６２细胞）的活性仍维持在较高的水平（４６．５％￣５０％）。提示ＰＳ对辐射     

螺旋藻的物理-化学因素和营养物对其生长的影响

随着人类直接或间接使用的蛋白源需求不断地增加，螺旋藻在世界上已取得广泛的推广和应用。螺旋藻作为蛋白源早在１９４０年已被证明，当时非洲乍得村民将其作为饲料。类似的墨西哥早已将螺旋藻作为人们的食品。最近，螺旋藻已在不同领域如农业、水产养殖、废水处理、循环营养和化工生产上得以广泛的应用。它还是保健药品，用于治疗多种溃疡病、糖尿病和某些肝脏病等。特别在水产养殖中，螺旋藻对于培养幼鱼是一个重要的饵料来源。螺旋藻既可作为鱼的饵料，又可作为轮虫（Ｂｒａｃｈｉｏｎｕｓ　ｐｌｉｃａｔｉｌｉｓ）的干饵料。本文综述了…     

螺旋藻多糖对小鼠S-180肉瘤的免疫抑制作用

研究了螺旋藻多糖对小鼠S-180肉瘤的抑制作用。结果显示：螺旋藻多糖在50—200μg／g的剂量范围对小鼠S-180肉瘤均有一定的抑制作用，具有明显升高小鼠外周血白细胞的功能，促进荷瘤小鼠脾淋巴细胞转化作用，并有较好的剂量—效应关系，促进荷瘤小鼠脾NK细胞对靶细胞的细胞毒作用。提示螺旋藻多糖可通过全面调节机体的免疫功能，刺激T细胞、NK细胞等功能来达到控制和杀灭肿瘤细胞的目的。     

营养盐对螺旋藻脂肪酸组成和含量的影响

本文研究不同浓度的氮、磷和碳以及不同的氮源对螺旋藻脂肪酸组成和含量的影响.结果表明改变营养盐的浓度对藻体TSFA和TPUFA均有较大影响，而对TMUFA无显著影响；氮源NaNO     

极大螺旋藻胞内多糖IPSⅡA逆转化疗模型小鼠免疫功能的研究

研究了极大螺旋藻（Spirulina maxima）胞内多糖IPSⅡA对化疗模型小鼠免疫功能的影响。通过注射环磷酰胺构建化疗小鼠模型，再分别注射不同剂量（0．5、1、2μg/g）的IPSⅡA，14d后进行外周血白细胞计数、免疫器官称质量并且应用炭粒廓清法和溶血素测定法测定单核细胞吞噬功能和B淋巴细胞的体液免疫功能。结果发现IPSⅡA能显著改善环磷酰胺所致白细胞减少、胸脾指数降低，还能使单核细胞吞噬功能、B淋巴细胞的体液免疫功能得以恢复和提高，并且存在剂量累积效应。可见IPSⅡA能显著逆转化疗模型小鼠的免疫功能，具有成为癌症化疗辅助药物的潜能。     

极大螺旋藻胞内多糖对体外肿瘤细胞抑制作用的实验研究

研究了极大螺旋藻(Spirulina maxima)胞内多糖对SMMC7721等肿瘤细胞系的生长及凋亡的影响。在体外培养条件下,用半抑制浓度(80,5 mg/L)的极大螺旋藻胞内多糖(IPSⅠ,IPSⅡ)处理肿瘤细胞,并用MTT,SRB,DNA ladder,AnnexinⅤ等方法测定。结果表明,IPSⅠ(80 mg/L)对SMMC7721,A549,HeLa,U251等肿瘤细胞系抑制率分别为64.97%、46.1%、43.3%、27.02%;IPSⅡ(5 mg/L)能诱导SMMC7721细胞凋亡。     

钝顶螺旋藻藻蓝蛋白和多糖的抗肿瘤免疫活性研究

对钝顶螺旋藻藻蓝蛋白 (PC)和多糖 (PSP)的抗肿瘤免疫活性进行了研究。采用免疫酶标技术、MTT法及定量溶血分光光度测定法等免疫分析实验 ,从免疫器官、免疫细胞、免疫分子 3个水平上进行藻蓝蛋白和多糖的抗肿瘤免疫活性检测。结果显示 ,藻蓝蛋白和多糖处理组小鼠瘤块直径及瘤体重量均小于对照组 ,T细胞及 B细胞活性明显增强 ,体液抗体量显著提高 ,螺旋藻藻蓝蛋白比多糖抑制肿瘤细胞生长和提高机体免疫力的作用更明显。     

螺旋藻多糖对肿瘤细胞生长及Hela细胞早期凋亡作用的实验研究

采用MTT法(四甲基偶氮唑盐比色法)研究了钝顶螺旋藻多糖(PSP)对Hela细胞及HepG2细胞生长的抑制作用。结果表明,随PSP浓度及培养时间的增加,肿瘤细胞存活率逐渐降低,抑制率逐渐增加,以PSP40 mg/L作用72 h最为显著。应用Annexin V/PI双染色流式细胞仪检测了早期Hela细胞凋亡,未经PSP处理的正常Hela细胞凋亡细胞极少,经PSP处理的细胞,凋亡细胞的百分比明显高于正常对照组,其作用随着剂量的增加和时间的延长而增强,具有量效关系和时效关系。结果说明PSP的抗肿瘤机制,除了诱导肿瘤细胞凋亡,还存在细胞毒性等其他机制,是多种机制共同作用的结果。     

光照时间对螺旋藻生长的影响

深入了解和研究螺旋藻的生长环境条件,对提高螺旋藻的产量,改善螺旋藻的品质很有意义。光是影响植物光合作用过程的主要因素,而光照时间的长短直接影响植物生长及其产量。为此,作者采取不同的光照时间长度培养螺旋藻,以期了解螺旋藻的生长、干重及蛋白质含量变化。1　材料与方法螺旋藻培养　钝顶螺旋藻(Spirulinaplatensis)培养采用Zarrouk培养基,pH8.5～9.5,在500ml三角瓶中加入3ml培养液,将旺盛生长的藻种接种于有培养液的三角瓶中,每瓶接种量相同,将接种后的三角瓶置于恒温光照培养箱,光照强度为4000lx,培养温度为28～30℃,各处理光照…     

钝顶螺旋藻多糖提取工艺的研究——三氯乙酸(TCA)法的正交实验优化

研究了用三氯乙酸(TCA)脱除蛋白质提取钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)多糖的工艺,并以提取率、样品糖含量与蛋白含量为指标,应用正交实验设计优化了提取液pH值、提取温度及提取时间3个因素。结果表明,在提取液pH值为12、提取温度为90℃及提取时间为8h的最佳条件下,所得螺旋藻多糖为白色粉末,提取率为3.10%,糖质量分数为81.79%,蛋白质量分数为0.57%。     

高效毛细管电泳法测定海参多糖的单糖组成

目的:采用高效毛细管电泳法测定3种不同海参多糖的单糖组成。方法:海参多糖水解后,经PMP衍生化,高效毛细管电泳分析。电泳条件:缓冲液为60 mmol.L-1硼砂溶液(pH=9.0);柱温25℃;运行电压25 kV;检测波长245 nm;压力进样50 mbar,进样时间5 s。结果:3种不同海参多糖中均含GalN、GlcN、GalNAC、Glc、Man、Fuc、Gal、GlcUA,梅花参多糖中各单糖的摩尔比为1.00∶1.02∶1.63∶1.19∶1.02∶10.26∶0.82∶0.38,四方刺参多糖中各单糖的摩尔比为1.00∶0.41∶0.43∶0.56∶0.29∶5.47∶0.43∶0.25,北极参多糖中各单糖的摩尔比为1.00∶0.26∶0.22∶0.25∶0.06∶1.36∶0.27∶0.16。结论:该方法具有简单、快速、分离效率高等特点,能同时测定海参多糖中氨基糖、中性糖、糖醛酸的组成。     

太空搭载海水钝顶螺旋藻诱变株H_(11)的室外产多糖特性研究

本研究对一株经太空搭载后选育的海水钝顶螺旋藻诱变株H_(11)的室外产多糖能力进行了评估。结果显示,在广州秋季室外平均温度为27°C下,诱变株H_(11)的生物量产率、总糖含量、总多糖含量和水溶性多糖含量分别为19.09±0.03 mg/(L·d)、27.89±1.28%DW、20.95±0.87%DW和19.74±0.93%DW。与野生株WT相比,H_(11)的生物量、总糖、总多糖和水溶性多糖的产率分别提高了15.39%,148.93%,176.50%和187.70%。在冬季室外平均培养温度为17°C条件下,诱变株和野生株生长速率及多糖产率都有所降低,但诱变株在产多糖能力上仍显著高于野生株(P0.05)。研究表明海水钝顶螺旋藻诱变株H_(11)产多糖能力极高,具有可观的产业应用前景。     

气相色谱法分析海洋沉积物中多糖的组成

碳水化合物是海洋有机质的主要组成部分，海洋中的碳水化合物主要以聚合物的形式存在，其分子组成信息对研究它们的来源及其在生物地球化学循环中的作用具有重要意义。作者应用毛细管气相色谱法分析了海洋沉积物中多糖的组成。利用2．0mo1／L三氟乙酸，在80℃水解8h，把沉积物中的多糖水解成单糖，从而把单糖萃取到水相中。水解液在60℃旋转蒸发除去三氟乙酸，用等量的阴离子和阳离子交换树脂混合柱脱除残留离子，以Milli—Q水洗脱。洗脱液经蒸发、干燥后，用吡啶溶解，在0．2％LiClO4吡啶溶液催化下，于60℃经48h达到互变异构平衡。平衡异构体经Regisil试剂衍生化成三甲基硅醚(1MS)，用HP5890气相色谱仪进行分析。使用长30m、内径0．32mm的HP—5石英毛细管柱，配FID检测器，进样口和检测室温度保持在300℃，采用无分流进样，以N2作载气，流速为2．0ml/min，柱箱在140℃保留4min，然后以2℃／min的速度升温到220℃，保留10min。以每种单糖的相对保留时间定性；选择每种单糖中分离效果好、组成占优势的异构体峰面积作为单糖定量的依据，采用内标标准曲线法定量。应用这一方法分析了厦门港沉积物样品，确定了沉积物中7种主要中性单糖的组成。方法的样品加标准回收率为77．0％一115％，相对标准偏差为1．8％一11％；空白加标准回收率在93．8％一113％之间，相对标准偏差为0．6％一9．5％；当信噪比为3时，各单糖的检出限为0．02一0．06mg／L;内标戊五醇的全程回收率为79．8％(n＝6，RSD=5．2％)。