企鹅珍珠贝同工酶表达多态性的初步研究

采用垂直板状聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳,对企鹅珍珠贝鳃组织的酯酶(EST)、葡萄糖-6磷酸脱氢酶(G6PD)、乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)和超氧化物歧化酶(SOD)5种同工酶进行了检测,并对酶谱特征进行了生化遗传分析.酶谱表型显示企鹅珍珠贝的同工酶呈现多态现象,同工酶表达上的多态性表明企鹅珍珠贝具有较丰富的遗传多样性.     

企鹅珍珠贝主要污损生物的初步研究

企鹅珍珠贝[Pteria（Magnavicula）penguin（Roeding）]分布于热带亚热带海域，在台湾、两广沿海和海南岛有野生种群栖息，它是珍珠贝属的一种可生产大规格附壳珠和正圆珠的大型贝类。近年来企鹅珍珠贝的种苗生产、养殖和大型珍珠培育以及生化遗传的研究受到关注。在养殖中，其他海洋生物的附着或寄生成为影响企鹅珍珠贝生长与存活的重要因素，目前相关研究仅见其他贝类的多毛虫寄生病、附着敌害生物和网笼污损生物类群等的报道，而企鹅珍珠贝的污损生物的研究仅见污损苔虫的文献记录。本文对企鹅珍珠贝的附着生物进行了初步鉴别，并分析它们的附着或寄生状态。     

企鹅珍珠贝主要污损生物的初步研究

企鹅珍珠贝[Pteria(Magnavicula)penguin(R ding)]分布于热带亚热带海域,在台湾、两广沿海和海南岛有野生种群栖息,它是珍珠贝属的一种可生产大规格附壳珠和正圆珠的大型贝类。近年来企鹅珍珠贝的种苗生产、养殖和大型珍珠培育以及生化遗传的研究受到关注。在养殖中,其他海洋生物的附着或寄生成为影响企鹅珍珠贝生长与存活的重要因素,目前相关研究仅见其他贝类的多毛虫寄生病[1-4]、附着敌害生物和网笼污损生物类群等[5-7]的报道,而企鹅珍珠贝的污损生物的研究仅见污损苔虫的文献记录[8]。本文对企鹅珍珠贝的附着生物进行了初步鉴别,并分…     

企鹅珍珠贝人工苗生长的初步观察

为了解企鹅珍珠贝生长规律，观察了壳高2.5～5.0mm的出池幼苗，按月测量其生长参数和成活率，以及环境因子。结果表明，企鹅珍珠贝生长最快的月份为7～11月和次年4～6月，壳长，壳高和壳宽月均增加量分别为3.8～13.0mm、4.7～11.2mm、2.3～3.8mm，月成活率97.8%～98.6%。企鹅珍珠贝生长最慢月份是11月至次年3月。     

企鹅珍珠贝附壳珍珠养殖研究

在水温为２１．４℃—３１．２℃，盐度为２７．２‰—３６．３‰的环境条件下，进行了企鹅珍珠贝培育附壳珍珠的研究。经２８７天的育珠，成活率８７．５％。在收获的１５个母贝中，植入直径为７～１０ｍｍ的珠核４７粒，佛像模型２个；收获附壳珍珠４０颗，佛像２个，留核率达８５．７％。其中商品珠３５颗，商品珠率为８３．３％。在商品珠中，珠色为银白色的１６颗，占４５．７％；金黄色的１６颗（包括１佛像），占４５．７％；污斑珠３颗，占８．６％。珍珠直径超过１１ｍｍ的有５颗，１０．０～１０．９ｍｍ的有１９颗，９．０～９．９ｍｍ的有９颗，８．０～８．９ｍｍ的仅１颗。抽测珍珠５颗，珠层厚度最大者８６２．５μｍ，最薄者５６２．５μｍ。     

企鹅珍珠贝生殖细胞的发生

对不同发育阶段的企鹅珍珠贝[Ptedapenguin(Rding)]的性腺结构、生殖细胞结构与分布进行组织学观察,描述精/卵子发生过程中各级精/卵细胞的特征。结果表明:根据雌性生殖细胞形态和卵黄的变化特点,卵子发生经历卵原细胞、无卵黄初级卵母细胞、卵黄形成期卵母细胞及成熟卵子阶段;依据雄性生殖细胞大小和细胞核形态变化,精子发生经历精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子阶段,其中精原细胞存在形态上有差异的A型和B型两种类型。此外还观察到企鹅珍珠贝的性别转化现象。     

企鹅珍珠贝Sox9基因的克隆及表达分析

【目的】更好地了解企鹅珍珠贝性别转换机制。【方法】RACE-PCR技术克隆企鹅珍珠贝Sox9基因cDNA的全长序列,分析其理化性质和进化地位;荧光定量PCR技术分析Sox9基因在各组织及不同时期性腺中的表达特征。【结果与结论】Sox9基因cDNA序列全长2 267 bp,其中开放阅读框(ORF)为1 410 bp,编码469个氨基酸。氨基酸序列比对显示企鹅珍珠贝Sox9基因与黑蝶真珠蛤(Pinctada margaritifera)和马氏珠母贝(Pinctada fucata)有高度同源性(81%)。Sox9在企鹅珍珠贝各组织中均有表达,在足中表达量最高(P0.05),精巢中其次;Sox9在成熟期精巢检测到最大表达量(P0.05),在发育早期精巢、退化期精巢和成熟期卵巢中表达量较低,其中发育早期卵巢表达量最低(P0.05)。     

企鹅珍珠贝附壳珍珠的培育

以7种聚乙烯塑料核型为珠核,正常壳形与二壳隆起的畸形企鹅珍珠贝为手术贝,培育附壳珍珠。养殖6个月,结果表明:壳形正常的育珠贝成活率为73.3%～93.8%,成珠率55.0%～82.0%;畸形贝成活率为60%,成珠率53.3%。统计分析表明:珠核高度是影响育珠贝成活率和成珠率的主要因素,珠核越高,育珠贝成活率和成珠率越低。畸形贝与正常壳形贝成活率和成珠率存在极显著差异(P<0.01),畸形贝不宜用作手术贝。     

企鹅珍珠贝人工苗生长的初步观察

为了解企鹅珍珠贝生长规律，观察了壳高2．5～5．0mm的出池幼苗，按月测量其生长参数和成活率，以及环境因子。结果表明，企鹅珍珠贝生长最快的月份为7～11月和次年4～6月，壳长，壳高和壳宽月均增加量分别为3．8～13．0mm、4．7～11．2mm、2．3～3．8mm，月成活率97．8％～98．6％。企鹅珍珠贝生长最慢月份是11月至次年3月。     

低盐度海水对企鹅珍珠贝存活的影响

对企鹅珍珠贝稚贝、中贝和成贝在降低盐度的海水中存活状态进行了观察和研究。在水温20～23℃，以不同盐度梯度（8、12、16、20、24、28、30和33）的海水暂养稚贝并定时检查，在广东的四个海区，对盐度变化时中贝及成贝的养殖成活率进行了观察。结果表明：盐度低于16的3个组，稚贝在60h内全部死亡，盐度20～24海水中，稚贝虽只有部分死亡，但活力较差；稚贝在14的海水中4h后转入正常海水，可全部存活，而超过8h后再移入正常海水的稚贝会陆续死亡；在盐度18海水中，稚贝一直未分泌足丝附着，而移入正常海水，6h就有小苗附着；大万山岛附近海域在雨季盐度可降至20以下，6～9月不适合养殖，而其它实验点可以通过深吊避免海水盐度变化造成企鹅珍珠贝死亡。     

低盐度海水对企鹅珍珠贝存活的影响

对企鹅珍珠贝稚贝、中贝和成贝在降低盐度的海水中存活状态进行了观察和研究。在水温20~23℃,以不同盐度梯度(8、12、16、20、242、8、30和33)的海水暂养稚贝并定时检查,在广东的四个海区,对盐度变化时中贝及成贝的养殖成活率进行了观察。结果表明:盐度低于16的3个组,稚贝在60h内全部死亡,盐度20~24海水中,稚贝虽只有部分死亡,但活力较差;稚贝在14的海水中4h后转入正常海水,可全部存活,而超过8h后再移入正常海水的稚贝会陆续死亡;在盐度18海水中,稚贝一直未分泌足丝附着,而移入正常海水,6h就有小苗附着;大万山岛附近海域在雨季盐度可降至20以下,6~9月不适合养殖,而其它实验点可以通过深吊避免海水盐度变化造成企鹅珍珠贝死亡。     

企鹅珍珠贝一体两用育珠技术试验研究

2009年3月至2010年10月进行企鹅珍珠贝游离珍珠植核手术,6个月后进行附壳造型珍珠再植核手术,附壳珍珠养殖育珠时间12个月,游离珍珠18个月。结果表明:经过术前麻醉处理的珍珠贝容易开口,方便植核手术,提高作业效率;使用特制可调式送核针可以达到核片同送,减轻手术创伤;附壳珍珠培育实验组成活率、商品珠率分别为(82.2±2.6)%与(69.9±4.7)%,比对照组分别提高了11.5%和18.6%(p值<0.05);游离珍珠培育实验组对照组的成活率、留核率与商品珠率分别为(31.8±1.9)%、(20.0±1.5)%与(38.8±2.6)%,实验组留核率与商品珠率比对照组分别提高了10.9%和13.4%;对企鹅珍珠育珠贝进行一体两用技术育珠试验,企鹅珍珠贝适合培育附壳造型珍珠,但不适合培育游离珍珠。     

基于近缘EST-SSR引物的企鹅珍珠贝养殖和野生群体的遗传标记

利用近源物种马氏珠母贝的EST-SSR引物对企鹅珍珠贝DNA进行扩增,获得7对可扩增出目标条带的近缘分子标记,分析野生群体(YS)和养殖群体(YZ)企鹅珍珠贝的遗传多样性。结果显示,7个位点共获得26个等位基因;野生和养殖群体的等位基因数分别为3~5和3~4,平均期望杂合度(He)分别为0.623 5、0.496 8;平均观测杂合度(Ho)分别为0.431 8、0.302 8;HNUPM047位点的多态信息含量较低,为0.446 7,其他位点均在0.5以上,说明该遗传标记可提供比较丰富的遗传信息。表明养殖群体遗传多样性水平低于野生群体。     

企鹅珍珠贝人工养殖及育珠的研究

在幼贝中间养成中采用柱形笼养殖法,母贝的养成中采用穿耳开放式养殖法,与全程采用锥形笼的传统式养殖方法相比较,进行企鹅珍珠贝人工养殖。结果表明:采用本技术养殖企鹅珍珠贝,在幼贝中间养成阶段,比传统养殖的壳高生长速率提高32·1%(P<0·05),壳长生长速率提高30·3%(P<0·01),成活率提高36%(P<0·01);母贝养成阶段,比传统养殖的壳高生长速率提高28·1%(P<0·05),壳长生长速率提高26·7%(P<0·01),成活率提高18·3%(P<0·01)。同时进行企鹅珍珠贝人工培育游离珠实验,植核贝在休养期和育珠期存活率分别为71·2%和54·3%,留核率分别为29·6·6%和21·0%,成珠率58·6%,优质珠比例为26·7%。     

3种珍珠贝精子发生及其超微结构的比较研究

在透射电子显微镜下观察合浦珠母贝（Ｐｉｎｃｔａｄａｆｕｃａｔａ）、大珠母贝（Ｐｉｎｃｔａｄａｍａｘｉｍａ）和企鹅珍珠贝（Ｐｔｅｒｉａｐｅｎｇｕｉｎ）的精子发生及精子形态．结果表明．大珠母贝从精原细胞到精子，核内都有数量不等的板层小体（ｎｕｃｌｅａｒｌａｍｅｌｌａｒｂｏｄｙ）；企鹦珍珠贝从精原细胞的晚期直到精子细胞早期，大多数细胞出现核内包含体（ｎｕｃｌｅａｒｉｎｃｌｕｓｉｏｎ）；而合浦珠母贝的生精细胞核无特殊结构．合浦珠母贝在初级精母细胞时由高尔基体分泌形成前顶体粒；企鹅珍珠贝的前顶体粒主要在次级精母细胞和早期精子细胞阶段形成。虽然大珠母贝的各级生精细胞中都没有出现典型的高尔基体，但前顶体粒仍在精母细胞时期形成。三种贝的精子结构均为典型的原生型，由头部、中段和尾部构成．合浦珠母贝精子的顶体最长，中段的线粒体数有变异；大珠母贝的精子核最高，其中含有板层小体；而企鹅珍珠贝精子中段的体积是最大的．     

马氏珍珠贝肉风味食品开发研究

研究了马氏珍珠贝肉制作五香、蒜香、姜汁三种风味即食制品的加工工艺技术。采用幅照保鲜技术对风味制品进行灭菌防霉处理,产品的保质期达到 １８０ ｄ 以上。对风味制品进行营养成分分析,结果表明：马氏珍珠贝肉风味制品是一种高蛋白、低脂肪、营养价值丰富的海产品,并富含牛磺酸（３．９ ｍ ｇ／ｇ）、多不饱和脂肪酸（ＥＰＡ＋ ＤＨＡ 占脂肪总量 ３４．７％ ）和多种无机质、微量元素和维生素     

月鳢个体发育早期4种同工酶的初步研究

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，对月鳢早期(从未受精卵至卵黄吸尽期)8个发育阶段的LDH、MDH、ADH、EST同工酶进行研究。结果表明：月鳢的早期发育阶段ADH酶谱相对稳定，均有两条谱带；LDH、MDH和EST三种同工酶的酶谱在神经胚期前均无明显变化，此后随发育进程逐渐复杂。     

马氏珍珠贝肉风味食品开发研究

研究了马氏珍珠贝肉制作五香,蒜香,姜汁三种风味即食制品的加工工艺技术。采用照保鲜技术对风味制品进行灭菌防霉处理,产品的保质期达到１８０ｄ以上。对风味制品进行营养成分分析,结果表明：马氏珍珠贝肉风味制品是一种高蛋白,低脂肪,营养价值丰富的海产品,并富含牛磺酸,多不饱和脂肪酸和多种无机质,微量元素和维生素。     

三疣梭子蟹个体发育早期的同工酶初步研究

三疣梭子蟹Portunus triuberculatus（Miers）俗称白蟹，隶属于节肢动物门，甲壳纲，十足目，梭子蟹科，梭子蟹属，分布于中国、日本及朝鲜等海域。它是一种大型海产经济蟹类，食用价值高、生长快，已成为海水养殖的主要品种之一。自20世纪50年代起，我国科技工作者已经陆续对其在形态、习性、繁殖、发育、生长、种群、生理、成分和养殖技术等方面做了较多的研究。但关于梭子蟹同工酶的研究罕见报道。笔者以三疣梭子蟹发育早期幼体为材料，进行了4种同工酶谱研究，以期为三疣梭子蟹的发育生物学、遗传学以及幼体发育过程中的营养生理学研究提供参考。     

三疣梭子蟹个体发育早期的同工酶初步研究

三疣梭子蟹Portunus triuberculatus(Miers)俗称白蟹,隶属于节肢动物门,甲壳纲,十足目,梭子蟹科,梭子蟹属,分布于中国、日本及朝鲜等海域。它是一种大型海产经济蟹类,食用价值高、生长快,已成为海水养殖的主要品种之一。自20世纪50年代起,我国科技工作者已经陆续对其在形态、习性、繁殖、发育、生长、种群、生理、成分和养殖技术等方面做了较多的研究[1-5]。但关于梭子蟹同工酶的研究罕见报道。笔者以三疣梭子蟹发育早期幼体为材料,进行了4种同工酶谱研究,以期为三疣梭子蟹的发育生物学、遗传学以及幼体发育过程中的营养生理学研究提供参考…