海南岛大珠母贝遗传多样性分析

利用RAPD技术首次对中国海南岛环岛的大珠母贝（Pinctada maxima Jameson）遗传多性进行分析。从20条10bp引物中选取7条引物用于群体遗传多样性分析，共检测出22个位点，其中11个位点（占50％）显多态性，Shannon多样性值为0．117。用非加权配对算数平均法（UPGMA）聚类分析的结果：12个体间遗传相似系数最大为1．000，最小为0．706，平均遗传相似系数为0．8438。表明海南岛大珠母贝群体间遗传多样性不一，遗传分化较大，因此很有必要对遗传多样性水平较高的种群，划定保护范围加以重点保护，以扩大和恢复大珠母贝的种质资源。     

两个大珠母贝群体遗传多样性的ISSR分析

用ISSR标记技术对我国两个大珠母贝Pinctada maxima群体的遗传多样性进行分析.7条ISSR引物在两个群体中共得到91个清晰的扩增位点.总多态位点百分率为100%,H= 0.2832, I = 0.4372,总的遗传变异中有21.54%的变异存在于两个群体之间,而78.46%的遗传变异是发生在群体内.海南群体的遗传多样性水平(PPB＝91.21%,I=0.414 4±0.236 4,H=0.271 5±0.179 0)高于广西群体(PPB＝82.42%,I=0.362 1±0.253 4,H=0.235 6±0.1837),广西群体的单态位点数(15个)明显高于海南群体(8个).NJ聚类分析表明两群体各自聚类成一簇.研究结果表明我国大珠母贝的遗传多样性水平较高,两群体间存在较明显的遗传差异     

大珠母贝微卫星DNA标记的分离与筛选

采用生物素标记的(CA)15探针和磁珠富集法构建了大珠母贝(Pinctada maxima)微卫星DNA文库,随机挑选1200个菌落,经PCR筛选得到298个候选克隆,成功测序246个,分析获得251个微卫星序列,其中完美型、非完美型和混合型分别占63%、32%和5%。除探针中使用的CA重复外,还得到AT、GT、TC、AG、GC、TAA、CAA、AGG、GATA、GACA、GTGC、CGTC、GACG、CTGT等重复序列。设计引物90对,挑选其中30对合成并筛选出21对能在大珠母贝基因组有效扩增的引物。种群PCR扩增后利用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行检测,获得了10个多态位点,共检测出59个等位基因,片段长度范围为133~444 bp。各位点等位基因数2~8个,平均等位基因数5.9个;有效等位基因数为1.342 3~6.000 0,平均为4.124 0;多态性信息含量(CPI)为0.222 5~0.811 8,平均0.7179;期望杂合度(He)为0.259 3~0.847 5,平均0.717 9;观测杂合度(Ho)为0.300 0~0.800 0,平均0.533 3。这些微卫星多态性标记的获得,为进一步开展大珠母贝遗传育种、保护生物学和种群遗传多样性等研究奠定了一定基础。     

大珠母贝人工育苗技术的研究

研究大珠母贝人工育苗若干技术,提出一些技术措施：亲贝强化培育促熟,人工诱导排放精卵,优选幼虫,投喂适口的饵料,适时倒池以及投放合适的采苗器等。结果表明,平均单产壳高2-3mm的幼苗8．1万粒／m3,最高可达9．3万粒／m3。     

大珠母贝金唇品系黄色珍珠层相关基因的鉴定

大珠母贝主要用于生产高价值的金银色有核珍珠.通过对三亚大珠母贝种群的进行取样,我们培育了一个外套膜边缘具有金色珍珠层的珍珠贝品系.通过对总类胡萝卜进行测定,发现该品系外套膜组织中的总类胡萝卜素含量显著高于对照组.我们筛选了两个品系之间的差异表达基因.有28285个基因在转录组中被注释.与对照组相比,共有295个上调基因...     

大珠母贝的研究概况

珍珠是家喻户晓的高级名贵装饰品,而大型优质珍珠在世界上非常稀省,价格极基昂贵,它主要产自一种大型海产双壳贝类--大珠母贝(Pinctada maxima Jameson).     

大珠母贝人工苗养成的研究

大珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａｍａｘｉｍａ（Ｊａｍｅｓｏｎ)主要分布在热带海区 ,栖息在低潮线至水深１００ｍ或更深处 ,其栖息地多为石砾海底或砂质底 ,全年环境因子 ,如水温、盐度和底质等变化很小［２］。大珠母贝个体大、生长快 ,能生产大型优质珍珠 ,贝壳可做贝雕和药用 ,经济价值高 ,是我国重点开发的珍贵品种。但大珠母贝人工苗在海区养成过程中成活率很低 ,特别是下海２～５个月 ,壳高２～４ｃｍ时大量死亡 ,严重制约大珠母贝养殖业的发展。国内有关单位对此进行了研究 ,但至今对大珠母贝苗在海区养殖大量死亡的原因还不明了。为了在…     

渔宝Ⅰ号对大珠母贝人工苗在室内培育的初步试验

本文首次报道饲料添加剂渔宝Ⅰ号对大珠母贝人工幼苗在室内饲养的应用效果。实验分４组同时对比进行,人工苗入池时平均壳高为６．６１ｍｍ,经室内工厂化养殖５４ｄ,渔宝Ⅰ号组的贝苗增长率、成活率及壳高都为最高,分别达１１６．９×１０－２,４９．８×１０－２及１４．２５ｍｍ;平均值分别为９７．９×１０－２,３１．９×１０－２及１３．０８ｍｍ。试验结果表明：投喂渔宝Ⅰ号可显著提高贝苗的增长率和成活率,对贝类的工厂化养殖起着重要的营养免疫调补作用,显示出广阔的商业价值。     

渔宝Ⅰ号对大珠母贝人工苗在室内培育的初步试验

本文首次报道饲料添加剂渔宝１号对大珠母贝人工幼苗在室内饲料的应用效果。     

大珠母贝Pinctada maxima(Jameson)亲贝人工促熟培育与诱导排放精卵的研究

用亚心形扁藻Platymonassubcoriformis,湛江等鞭藻Isochrysiszhanjiangensis及某些配合饲料培育大珠母贝pinctadamaxima(Jameson)亲贝,可以促进性腺发育成熟并保持易于诱导排放状态。在需要进行人工育苗时,给亲贝以一定的刺激,即可诱导产卵排精。采用这种方法进行大珠母贝人工育苗,受精率和活率都比剖贝取卵授精的方法高。而且不用杀死大珠母贝亲贝。     

大珠母贝精子短期保藏条件的初步筛选

为初步筛选不同基础液、保藏温度(4℃与23℃)、保存时间(0～120 h)、保护剂(5%DMSO、DMA、DMF、EG)对大珠母贝(Pinctada maxima)精子活力的影响,通过采用精子质量分析仪检测精子总运动率、直线运动速率、曲线运动速率、平均路径运动速率、头部位移距离和鞭毛摆动频率。结果表明, A、B、C三组基础液能不同程度上激活精子, D、E两组结果与之相反;精子被激活后, 5组基础液中精子活力存在显著的差异(P<0.05),其中E组基础液的精子总运动率最高,达到80.79%;与室温保藏结果相比,低温(4℃)组精子总运动率显著(P<0.05)高于室温(23℃)组,精子活力的保持时间明显优于室温组;低温(4℃)保存120 h内,精子的运动呈先平稳后下降的趋势,精子的最佳保藏时间为24 h内,精子总运动率、直线运动速率、曲线运动速率、平均路径运动速率分别为82.27%、59.62μm/s、81.95μm/s和70μm/s,头部位移距离为2.56μm,鞭毛运动频率为2.93 Hz;低温(4℃)保存12 h后,对照组精子总运动率显著(P<0.05)高于保护剂组,精...     

中药对合浦珠母贝插核手术伤口愈合效果和珍珠质量的影响

研究了3种中药对合浦珠母贝（Pinctada fucata）插核手术后体重日增长速度、伤口的愈合效果及其对珍珠质量的影响。试验采用白藜芦醇、芦荟胶和云南白药对插核伤口进行单次处理（插核手术后及时处理）和3次处理（手术后第5天和第10天分别进行第2次和第3次处理）,对体质量日增长速度、愈合率和珍珠质量进行统计分析。结果显...     

中药对合浦珠母贝插核手术伤口愈合效果和珍珠质量的影响

研究了3 种中药对合浦珠母贝(Pinctada fucata)插核手术后体重日增长速度、伤口的愈合效果及其对珍珠质量的影响。试验采用白藜芦醇、芦荟胶和云南白药对插核伤口进行单次处理(插核手术后及时处理)和3 次处理(手术后第5 天和第10 天分别进行第2 次和第3 次处理), 对体质量日增长速度、愈合率和珍珠质量进行统计分析。结果显示, 休养期各组体质量日增长速度变化趋势基本相同, 早期几乎全为负增长(0.06～?0.26 g/d), 第16 天基本恢复正常生长水平, 达到0.54～0.93 g/d, 后期云南白药单次处理组的增长速度最快(1.52 g/d), 显著高于对照组(0.34 g/d)(P<0.05), 但处理次数对体质量增长的影响不大。各试验组愈合率均较高, 10 天时试验组的愈合率达90%以上(90.7%～99.2%), 显著高于对照组(79.8%)(P＜0.05), 其中云南白药处理组的愈合率最高。各处理组的商品珠比例(87%~90%)均较高,但优质珠比例各组差异较大, 最高的是白藜芦醇和云南白药单次用药组, 分别为52.4%和54.8%。上述结果表明, 中药处理对伤口的愈合和珍珠质量具有一定的促进作用, 其中, 白藜芦醇或云南白药对伤口单次处理的效果最好。     

Te(IV)对螺旋藻胁迫作用的光谱学研究

用光谱法研究了 Te(IV)对螺旋藻(Spirulina maxima)的胁迫作用.各实验组添加 Te(IV)的时间均在第5~7天,累积添加质量浓度为从450~650 mg/L.结果表明,各 Te(IV)胁迫实验组中活藻体悬浮液的吸收光谱特征峰强度均不同程度地下降.而在440、580 nm 激发所得的荧光发射光谱峰位置不变,峰强度下降.但干粉的荧光光谱与活藻体悬浮液有明显不同,干粉中的藻胆体的能量传递过程受阻.各试验组干藻粉的红外光谱无明显差异     

海洋酸化对马氏珠母贝受精及早期发育的影响

自2010年7月1日至3日,在pH值为8.1、7.7和7.4条件下研究了海洋酸化对马氏珠母贝(Pinctada martensii Dunker)受精及早期发育的影响。结果显示,海洋酸化对不同pH值下马氏珠母贝的受精率无显著影响。pH8.1、pH 7.7和pH 7.4试验组幼虫的壳长、壳高的值逐渐增大,pH 8.1组幼虫的壳长、壳高的值大于同期其他两组的值,且在实验的第24、36、48小时与其他两组同期幼虫的壳长、壳高的值差异显著,这表明海洋酸化显著影响马氏珠母贝幼虫的生长。实验期间,pH 8.1试验组幼虫的存活率和畸形率没有显著变化,而pH 7.7和pH 7.4组幼虫的存活率显著低于pH 8.1组。pH 7.4组幼虫的畸形率显著高于同期pH 8.1和pH 7.7组幼虫的畸形率,表明在海洋酸化的环境中幼虫的发育受到影响。本文将为海洋酸化的相关研究提供基础数据。     

马氏珠母贝两个与生长性状相关QTL 的验证

利用2个马氏珠母贝群体对遗传连锁图谱已经定位的,与马氏珠母贝生长性状相关的数量性状位点(Quantitative trait locus,QTL)中的两个进行验证。结果显示:m59标记在2个群体中与壳高、壳长、壳宽和总重具有显著的相关性(P0.05),其GT基因型的个体壳高、壳长、壳宽和总重均显著高于GG基因型的个体;154165标记在湛江群体中与壳高具有显著相关性(P0.05),而在深圳群体中与壳宽具有显著相关性(P0.05);表明QTL标记m59在2个群体中是共享QTL,而154165标记在群体中是特异QTL。基于这两个QTL在这2个群体中分别构建二倍型,发现在湛江群体中二倍型C_1(AAGT)和深圳群体中D_1(AGGT)型和D_2(AAGT)型对马氏珠母贝生长最为有利,可作为优先的基因型组合。     

Studies on rickettsia-like organism (RLO) disease of tropical marine pearl oyster-Epidemiological investigation of RLO disease in juvenile populations of maricultured Pinctada maxima

The death which occurred in juvenile population was a severe problem in the course ofPinctada maxima artificial culture. With the methods of field investigation, histological study and statistic analyses, the epidemiological study was carried out on the disease and death in juvenile populations of Pinctada maxima in the Xinying Pearl Oyster Mariculture Farm of Lingao County (for the A, B and C batches of cultured juveniles hanged in the sea) and the Xincun Pearl Oyster Mariculture Farm of Lingshui County (for the D batch of cultured juvenile hanged in the pond), Hainan Province from November 1993 to April 1995.The results show that the deaths which occurred in juvenile populations of Pinctada maxima presented an outbreak pattern. The peak of mortality rates, in general, occurred in 4-to 6-month old pearl oyster juveniles, and the mortality rates gradully declined with the extention of pearl oyster age after cul-turing 8 months. The correlation between the mortality rates of juvenile populations and mean     

合浦珠母贝基因组微卫星富集文库的构建与分析

采用生物素标记的(AC)_(15)探针和磁珠富集法构建合浦珠母贝(Pinctada fucata)基因组DNA微卫星富集文库。随机挑选2097个克隆进行筛选,得到483个候选克隆(23.03%),对其中135个阳性克隆测序分析发现122个克隆含有微卫星重复单元(90.37%)。进一步通过序列比对,最终得到65个具有特异微卫星序列的阳性克隆(53.28%),其中包含85个微卫星DNA结构域,其中完美型(perfect)70个,占82.36%;非完美型(imperfect)7个,占8.24%;混合型(compound)8个,占9.41%,重复次数主要分布在5~20(95.74%),平均重复次数为7.83,(AC/GT)n重复所占比例最高(75.53%)。基于微卫星两端的侧翼序列,利用Primer Premier 5.0设计引物,获得11对具有多态性的微卫星引物。本研究为开展合浦珠母贝分子育种及资源评价分析提供了基础资料。