斑节对虾虾苗白斑综合症杆状病毒的检测和养殖跟踪

利用２步ＰＣＲ检测技术对湛江和阳西地区的虾苗进行白斑综合病杆状病毒（ＷＳＳＶ）检测。在仔虾２日龄最早检测得到病毒,有２５％的虾苗带有ＷＳＳＶ病毒。带病毒虾苗和不带病毒虾苗分别在不同养殖模式的养殖过程中跟踪。前者在湛江湖光镇普通虾塘跟踪养殖,它们在变化的环境中容易发病,ｐＨ、盐度和温度是重要的诱发因子,在养殖５０～６０ｄ时发病死亡;后者在高位池和普通池养殖跟踪,它们对变化的环境有较大的适应性,养殖时间为８０～１１０ｄ,在相对优良的养殖技术条件下大部分可望养殖成功。环境中有ＷＳＳＶ病原传入,不带病毒虾苗在养殖后期可以带有ＷＳＳＶ病毒,出现白斑虾。跟踪有普通池有爆发病害,但是时间延后,跟踪的高位池没有爆发病害。     

斑节对虾白斑综合症杆状病毒感染的实验模式

在建立斑节对虾实验室养殖模式的基础上．对野外采集的有白斑综合症病毒(WSSV)病典型症状的斑节对虾初步纯化其病毒．并进行WSSV的PCR检测，得到WSSV的感染用样品。对健康斑节对虾分别进行浸浴感染，投喂感染和注射感染。对感染死亡个体进行WSSA的PCR检测和细菌检测，证实WSSV感染性和致死性。浸浴感染、投喂感染和注射感染的感染量分别为4mL／L、0．2g／10g虾体、1／2稀释液0．05mL／10g虾体，死亡开始时间分别为16d、42h、28h，三种感染模式最终死亡率100％．从开始死亡到全部死亡延续时间分别为15d、82h、44h。     

斑节对虾白斑综合症杆状病毒感染的实验模式

在建立斑节对虾实验室养殖模式的基础上，对野外采集的有白斑综合症病毒（WSSV）病典型症状的斑节对虾初步纯化其病毒，并进行WSSV的PCR检测，得到WSSV的感染用样品。对健康斑节对虾分别进行浸浴感染，投喂感染和注射感染。对感染死亡个体进行WSSA的PCR检测和细菌检测，证实WSSV感染性和致死性。浸浴感染、投喂感染和注射感染的感染量分别为4mL/L、0.2g/10g虾体、1/2稀释液0.05mL/10g虾体，死亡开始时间分别为16d、42h、28h，三种感染模式最终死亡率100%，从开始死亡到全部死亡延续时间分别为15d、82h、44h。     

凡纳滨对虾和斑节对虾对WSSV敏感性的比较

用6.0×104拷贝、1.2×104拷贝和6.0×103拷贝3种剂量白斑综合症病毒(WSSV)对凡纳滨对虾和斑节对虾进行人工注射感染,比较了两种对虾对WSSV敏感性的差异。结果表明,凡纳滨对虾死亡时间随病毒剂量降低而延长,斑节对虾死亡时间没有明显差异;随病毒剂量的降低,凡纳滨对虾人工注射感染后病毒复制高峰时间显著延长,斑节对虾感染后病毒复制高峰时间相同,WSSV在凡纳滨对虾体内比在斑节对虾体内复制慢。对虾携带WSSV数量最低为3.3×107拷贝.g-1,最高为4.3×108拷贝.g-1。凡纳滨对虾比斑节对虾对WSSV的抵抗性更强。     

凡纳滨对虾对虾杆状病毒PCR检测方法的建立及初步应用

根据Gen Bank中公布的对虾杆状病毒(Baculovirus penaei,BP)基因片段序列,设计1对特异性检测引物,建立快速检测凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)对虾杆状病毒的PCR方法。用该方法对BP阳性虾进行PCR扩增,结果得到380 bp的特异性扩增条带,与实验设计相符,而对白斑综合征病毒(WSSV)、桃拉病毒(TSV)、传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)阳性虾和健康虾的扩增结果为阴性。测序比对结果证实,该PCR方法检测结果准确,最低可检测出约1 pg的病毒DNA。利用建立的PCR方法对来自广东、广西、福建、海南和浙江的2 722份临床病料进行检测,共检出阳性病料133份,表明该PCR方法可用于对虾杆状病毒的临床快速检测。     

斑节对虾高密度养殖配合饲料的研制

为了适应斑节对虾高密度养殖业迅猛发展的需要,研制了粤海牌斑节对虾饲料。该饲料配方合理,工艺先进,不加粘结剂,能达到水中稳定性的要求。试验结果表明：饵料系数1．39～2．18,饲养79～126d,产量6870～9240kg／hm2,收虾规格54～72尾／kg;饲养的斑节对虾肌肉饱满,活力强。     

斑节对虾细菌性烂鳃病的病理组织学观察

对自然发生的斑节对虾烂鳃病进行了病理组织切片观察,发现病虾由杆状细菌感染造成鳃丝萎缩、坏死,鳃小片呼吸上皮脱落,鳃血中有菌团存在,而且病虾的肝胰脏、胃、肠、心脏等器官组织受毒素影响而发生组织变性坏死。证实斑节对虾烂鳃病由杆状细菌感染引起。本文对细菌引起虾体的损害及对虾的防御机制进行了探讨,认为斑节对虾是由于细菌感染造成鳃呼吸功能障碍和细菌毒血症造成肝胰脏功能障碍而死亡。     

氟乐灵对斑节对虾卵和幼体的毒性研究

采用静水生物试验法测定了氟乐灵对斑节对虾卵和幼体的急性毒性。结果表明：氟乐灵对斑节对虾无节幼体、蚤状幼体、糠虾幼体和仔虾的２４ｈＬＣ５０／×１０－６分别是１．６８，０．８３，１．８４和２．０９；４８ｈＬＣ５０／×１０－６分别是０．７６，０．５３，１．０９和１．５１。５．０１×１０－６氟乐灵浸浴受精卵１２ｈ，５０％的受精卵可孵化。第２２天仔虾用１０×１０－６以下浓度的氟乐灵浸浴５ｍｉｎ，对其存活率无影响。     

蜕壳促长素对斑节对虾、刀额新对虾蜕壳和生长的作用

在对虾人工配合饲料中添加蜕（脱）壳促长素，喂养斑节对虾（ＰｅｎａｅｕｓｍｏｎｏｄｏｎＦａｂｒｉｃｉｕｓ）和刀额新对虾（ＭｅｔａｐｅｎａｅｕｓｅｎｓｉｓＤｅＨａａｎ），观察其促进蜕壳、生长的作用。试验证明：饲料中添加不同浓度（０．５‰。、１．０‰、１．５‰）的蜕壳促长素，均不同程度地促进对虾的蜕壳和生长。添加浓度为１．５％。效果最为明显。值得在生产中应用。     

对虾白斑症病毒(WSSV)部分克隆片段的序列测定及PCR扩增

对克隆的 WSSV基因组 Xba 1.8kb片段进行序列测定 ,根据所测定的核酸序列 ,通过计算机软件分析 ,设计出一对 PCR引物。所设计的 PCR引物能从纯化 WSSV及患白斑症的对虾组织中扩增出长为 92 1bp的目的 DNA片段 ,并且能检测出 0 .2～ 0 .4μg病虾肌肉组织中的 WSSV。健康对虾、感染MBV的斑节对虾仔虾及 SINPV的扩增结果均为阴性。表明所建立的 WSSV PCR检测法灵敏而且特异。     

斑节对虾苗和刀额新对虾苗对低盐度适应力的研究

取体长为11mm的斑节对虾苗和刀额新对虾苗体长为6．1mm,经暂养数天后,分别在不同盐度的水中进行试验。结果表明,这两种虾苗适应低盐度十分广泛。刀额新对虾苗可比斑节对虾苗适应更低的盐度。斑节对虾苗在从盐度23．18直接降至盐度6．21时,成活率仍可达70％。当虾苗饲养在盐度18．54时,直接放水至海水盐度5．1,成活率为85％。当虾苗在从盐度25．13逐渐淡化到盐度1时,成活率仍有20％～40％。但是,考虑到体重的增重率,虾苗最佳饲养盐度为13．8。刀额新对虾苗从盐度23．18的海水直接放入盐度2以下的海水中,成活率仍有56．7％～63．3％。如果逐渐淡化海水,可在盐度＜2时正常生长。在盐度8．96左右饲养,其体重增重率最佳。上述这两种虾适于河口低盐度地区养殖。在有条件的养成场适当降低盐度,有利其生长。     

Movements of the Western Pacific Warm Pool Centroid and Their Relationship to Sea Surface Temperature Changes in Ni(n)o Regions

By using monthly historical sea surface temperature (SST) data for the years from 1950 to 2000, the Western Pacific Warm Pool (WPWP) climatology and anomalies are studied in this paper. The analysis of WPWP centroid (WPWPC) movement anomalies and the Nino-3 region SST anomalies( SSTA) seems to reveal a close, linear relation between the zonal WPWPC and Nino-3 region SSTA, which suggests that a 9' anomaly of the zonal displacement from the climatological position of the WPWPC corresponds to about a 1 ℃ anomaly in the Nino-3 region area-mean SST. This study connects the WPWPC zonal displacement with the Nino-3 SSTA, and it may be helpful in better understanding the fact that the WPWP eastward extension is conducive to the Nino-3 region SST increase during an El Nino-Southern Oscillation (ENSO) event.