水溶性低分子量壳聚糖对糖尿病大鼠血糖的影响

研究不同化学修饰的水溶性低分子量壳聚糖对糖尿病大鼠血糖的调节作用,以探讨其结构与功能的关系。本研究对低分子量壳聚糖、低分子量羧甲基壳聚糖和低分子量羧甲基甲壳素进行化学表征和分子量测定。通过腹腔注射链脲佐菌素建立大鼠糖尿病模型,并随机分为糖尿病治疗组和模型组。治疗组大鼠每日按180 mg/kg体质量分别灌胃低分子量壳聚糖、低分子量羧甲基壳聚糖、低分子量羧甲基甲壳素,模型组按体质量灌胃相同体积的蒸馏水,连续灌胃45 d,于末次灌胃后测定大鼠空腹血糖、糖耐量、肝肌糖原含量,大鼠胰腺做病理组织切片观察。结果表明,不同化学修饰的水溶性低分子量壳聚糖的分子量在10 000~25 000 Da间,低分子量壳聚糖乙酰基取代度为52.71%,低分子量羧甲基壳聚糖的乙酰基取代度为7.50%、羧基取代度为98.16%,低分子量羧甲基甲壳素的乙酰基取代度为89.96%、羧基取代度为98.65%;三者均可显著降低糖尿病大鼠空腹血糖水平,改善糖耐量,提高肝肌糖原含量。其中,低分子量羧甲基甲壳素组效果最好,低分子量壳聚糖效果次之,推测水溶性低分子量壳聚糖的乙酰基可能在糖尿病大鼠血糖调节中发挥重要作用。     

低分子量壳聚糖及其衍生物的制备与溶菌酶对其降解的实验研究

将大分子质量壳聚糖用壳聚糖酶法降解成分子质量为3ku左右的低分子质量壳聚糖,再将其分别化学修饰成低分子质量的羧甲基壳聚糖和羧甲基甲壳素,并进行结构表征。在最适条件下,用溶菌酶分别对3种多糖进行降解实验,并进行酶解前后多糖的还原糖浓度测定和HPLC分析,确定溶菌酶对不同结构多糖的水解能力。结果表明,溶菌酶对羧甲基甲壳素水解作用最快,羧甲基壳聚糖次之,壳聚糖最慢。该研究为甲壳素衍生物在生物医用材料中的应用和降解速率调控提供了依据。     

天降血栓通丸对2型糖尿病大鼠血糖、大血管病变的影响

目的：研究天降血栓通丸对2型糖尿病大鼠血糖、大血管病变的影响。方法：将90只wistar大鼠随机分为正常组15只与造模组75只,通过高糖高脂饲料+链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型,造模成功后将其随机分为模型组,天降血栓通丸早期干预组、中期干预组、晚期干预组（简称为早期组、中期组、晚期组）,盐酸吡格列酮组（西药组）,每组各15只,分别采用相应药物干预。观察大鼠一般情况,检测空腹血糖、胰岛素、胰岛素敏感指数、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）水平。结果：造模组与空白组比较,胰岛素、胰岛素敏感指标、体质量、第13周空腹血糖差异均有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）;药物干预后空腹血糖水平ICAM-1模型组、各治疗组与空白组比较,各治疗组与模型组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：天降血栓通丸无降糖作用,其早期干预能有效降低ICAM-1,这可能是其对2型糖尿病大鼠大血管病变影响的机制之一。     

壳聚糖的磺化产物对大鼠血栓和凝血时间的影响

甲壳质及壳聚糖的硫酸酯化反应是其化学修饰中最吸引人的研究内容之一。由于它们与肝素有相似骨架， 经硫酸酯化，引入-NHSO3H， - CH2OSO3H - OSO3H， COOH，-CH2COOH基团后得到甲壳质(壳聚糖)类肝素药物，显示出抗栓、抗凝血性能(李鹏程等，1998；曾宪放等，1992；Proeyanat et al.，2002)；如Muzzarelli(1985)早已预见并证实其抗凝血活性；莫斯科血液研究中心病理药理系止血组的研究人员也证明了壳聚糖硫酸酯具有抗凝血活性，他们将肝素与壳聚糖硫酸酯以1∶1的比例给家兔静脉注射各0.5mg/kg，与单纯用肝素1mg/kg对照组比较，其抗凝血效应基本接近，但对照组有出血副作用，而试验组无副作用，可以证明壳聚糖硫酸酯具有既抗凝血又止血的双重调节作用；Tokura等(1994)证实分子质量大小和脱乙酰度不同对磺化产物的抗凝血活力有影响，样品分子质量26000 Da的活性最高，脱乙酰度70%比45%的抗凝血活性更强，脱乙酰度为95%的壳聚糖磺化后抗凝血活性最弱。在中国这方面的研究相对较少，特别是分子中含硫的多寡对生物活性的影响还未见报道。本文作者就壳聚糖的磺化产物对大鼠抗栓、抗凝血进行了研究，表明壳聚糖硫酸酯具有一定的抗栓、抗凝血效果，且具有一定的量效关系，这对今后该方面的进一步研究提供了科学理论依据。     

羧甲基壳聚糖对肿瘤生长的影响研究

研究评价了不同分子量及不同取代度的3种羧甲基壳聚糖(CM-CTS)对肿瘤生长的影响。用MTT比色法测定3种CM-CTS对人正常肝细胞L02及3株肿瘤细胞:Bel-7402、SGC-7901及Hela生长的影响;ELISA方法检测3种CM-CTS对2种肝细胞L02及Bel-7402分泌TGF-α及VEGF水平的影响;建立小鼠移植性肿瘤Heps模型,腹腔注射分子量最大的CM-Ⅰ,研究CM-CTS的抑瘤作用。研究结果表明,分子量及取代度不同的3种CM-CTS在0.05~0.8 mg/mL浓度范围内,对L02细胞增殖具有显著促进作用,对Bel-7402、SGC-7901及Hela细胞的增殖则具有一定的抑制作用;3种CM-CTS能提高L02细胞TGF-α分泌水平,抑制Bel-7402细胞分泌TGF-α及VEGF水平;在动物水平上,CM-CTS能抑制小鼠Heps肿瘤生长,且量效关系显著。说明不同分子量及取代度的3种羧甲基壳聚糖对肿瘤生长具一定的抑制作用。     

硫酸化壳聚糖衍生物对实验性大鼠脂肪肝的治疗作用

研究硫酸化壳聚糖衍生物对实验性大鼠脂肪肝的治疗作用。采用定量灌胃酒脂乳剂的方法建立大鼠混合型脂肪肝模型。建模成功后的大鼠随机分为模型对照组和硫酸化壳聚糖治疗组,各组均饲以正常饲料,硫酸化壳聚糖治疗组采用腹腔注射给药,模型对照组以同等体积的生理盐水腹腔注射。治疗3周后,观察大鼠肝脏病理形态学变化,检测血清TC、HDL、LDL、AST、ALT和肝组织TG、AST、ALT、SOD含量。结果表明,硫酸化壳聚糖治疗组的肝组织形态较模型对照组有明显的好转,血清TC,HDL,LDL,AST,ALT和肝组织TG,AST,ALT含量显著降低,肝组织SOD含量增加;硫酸化壳聚糖治疗组血清TC,HDL,LDL,AST,ALT和肝组织TG,AST,ALT,SOD含量均恢复至正常对照组水平,硫酸化壳聚糖衍生物对大鼠脂肪肝有很好的治疗效果。     

壳聚糖对种子萌发及幼苗生长的影响

用不同相对分子质量、不同质量分数和不同复配组合的壳聚糖处理不同的种子 ,研究了不同处理方法对种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明 :通过这些处理 ,不但能不同程度地提高种子的发芽率 ,而且还能使幼苗健壮 ;用中相对分子质量 (Mr≈ 60× 1 0 3)、质量分数为 0 .5%的壳聚糖加谷氨酸处理种子 ,效果最好 ,尤其对大颗粒种子如玉米、豇豆和大豆。     

两种不同凝胶柱测定壳聚糖分子量结果的比较

凝胶渗透色谱法测定壳聚糖分子量 ,以葡聚糖为标准品 ,用 2种不同的凝胶柱 (PLaquagel- OH柱和 TSK G4 0 0 0 PWXL柱 )测定 4种样品的分子量及其分布 ,并经过普适标定。比较结果发现 :PL aquagel- OH柱效果稍好于 TSK G4 0 0 0 PWXL柱。两柱所得重均分子量平均偏差为 0 .17%～ 3.38% ,数均分子量的平均偏差为 0 .90 %～ 3.5 7% ,分子量分布宽度指数 1.34～ 1.5 4。     

中医护理干预对2型糖尿病患者的影响

目的：探讨中医护理干预对2型糖尿病（T2DM）患者的血糖控制效果及自我管理行为能力的影响。方法：选择100例T2DM患者为研究对象,将其随机分为观察组和对照组,每组各50例。对照组予以常规护理,观察组在常规护理的基础上给予中医护理干预,2组均连续干预3个月。比较2组患者干预前后的中医证候积分以及干预后的降糖疗效、自我管理行为能力。结果：护理干预后2组中医证候积分均较干预前有所下降,且观察组优于对照组（P＜0.05）;中医证候疗效观察组临床控制率、显效率均明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;干预后观察组空腹血糖、餐后2h血糖均明显低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;观察组患者自我管理行为能力明显优于对照组（P＜0.05）。结论：采用中医护理干预配合常规护理的T2DM患者,其中医证候积分、降糖效果及自我管理行为能力均优于常规护理组,值得临床推广。     

两种壳聚糖的不同配比对草莓保鲜效果的影响

研究了两种相对分子质量的壳聚糖以不同的比例配比所制的保鲜剂对草莓保鲜效果的影响。结果表明 :当相对分子质量为 3万和 1 70 0的两种壳聚糖以 1∶ 1 (质量比 )配比时 ,所制的保鲜剂对草莓有较好的保鲜效果 ,能使草莓果实的失水率、腐烂率和发霉率显著降低 (P<0 .0 1 ) ;果实体内的可溶性固形物、可溶性糖、可溶性蛋白质、Vc等含量以及糖酸比明显增加(P<0 .0 5) ;超氧化物歧化酶 (SOD)活性增强 ,丙二醛 (MDA)含量减少 (P<0 .0 1 ) ,果实细胞膜稳定性显著提高。     

壳聚糖磺酸盐表面活性剂的合成、表征及表面性能研究

以环氧氯丙烷、亚硫酸氢钠为原料合成了中间体2-羟基-3-氯丙磺酸钠,在碱性条件下经环氧化反应后与壳聚糖合成了1种易溶于水的壳聚糖磺酸盐表面活性剂,用红外光谱、核磁共振对产物进行了结构表征。分别采用电导率法、吊环法、最大气泡法测试了该产物的临界胶束浓度(CMC)。结果表明:3种方法测得产物的CMC值分别为:2.3×10-4,5.6×10-4和2.5×10-4mol.L-1,吊环法和最大气泡法测得的临界胶束浓度时的表面张力分别为46和48 mN.m-1。     

低分子甲壳胺及其衍生物抑制不饱和脂肪酸的氧化作用

通过测定乳化鱼油中不饱和脂肪酸含量和化学发光强度,研究了在５０℃乳化鱼油中,低分子甲壳胺（ＬＭＣＨＳ）和低分子羧甲基甲壳胺硫酸酯（ＣＣＳ）对不饱和脂肪酸氧化的保护作用。测定结果,第６ｄ ＣＣＳ对Ｃ２２：５、Ｃ２２：６氧化抑制率达９６．０３％ 、９２．５０％ ,在第２０ｄ ＬＭＣＨＳ对不饱和脂肪酸Ｃ１６：１、Ｃ１８：１氧化抑制率为６１．０６％ 、６０．０９％ ,对Ｃ１８：３、Ｃ２０：５和Ｃ２２：６氧化抑制率分别为５０．３６％ 、４７．５７％ 、４３．７０％ 。研究表明：ＬＭＣＨＳ和ＣＣＳ对不饱脂肪酸都具有很好的保护作用,效果优于维生素Ｅ。     

岩藻聚糖硫酸酯体外抗氧化特性的研究

采用化学发光分析法研究岩藻聚糖硫酸酯清除超氧阴离子自由基 (O· -2 )及羟基自由基(· OH)的作用 ,并以高效液相色谱法研究对卵磷脂 (PC)过氧化的抑制能力。结果显示 :(1)三种岩藻聚糖硫酸酯组分均有清除活性氧自由基的能力 ,但清除超氧阴离子自由基的能力高于清除羟基自由基的能力。其中糖醛酸含量高和硫酸酯含量低的组分 清除自由基的能力最强 ,它对 O· -2 的IC50 为 0 .0 4 4 mg/m L,对· OH的 IC50 为 0 .0 6 2 mg/m L。 (2 )岩藻聚糖硫酯具有抑制 PC过氧化的能力。岩藻聚糖硫酸酯组分受活性氧损伤后 ,它们的抗氧化能力均降低。研究表明 ,岩藻聚糖硫酸酯具有较强的体外抗氧化的功能。     

墨西哥刺参对大鼠脂质代谢的调节作用

研究墨西哥刺参(Isostichopus fuscus)对大鼠脂质代谢的调节作用及其机理.采用灌胃高脂乳剂方法建立实验性高胆固醇血症大鼠模型,检测模型大鼠血清总固醇(Total cholesterol, TC)、甘油三酯(Triglyceride, TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol, LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol, HDL-C)含量;肝脏TC、TG含量和肉毒碱棕榈酰转移酶-1(Carnitine palmitoyl transterase-1, CPT-1)、过氧化物酶体β-氧化酶系(peroxisomal β-oxidation enzymes)、磷脂酸磷酸酶(Phosphatidic acid phophyhydrolase, PAP)等脂质代谢相关酶活力;粪便总脂质、TC和胆汁酸含量.实验结果显示,墨西哥刺参能显著降低高胆固醇血症大鼠血清TC(P<0.01)、LDL-C(P<0.05)含量及LDL-C/HDL-C(P<0.05);显著降低肝脏TC(P<0.01)、TG(P<0.01)含量,提高肝脏CPT-1(P<0.01)、peroxisomal β-oxidation enzymes(P<0.05)和PAP(P<0.05)活力;显著提高粪便中总脂质(P<0.01)、TC(P<0.01)和胆汁酸(P<0.01)含量.提示墨西哥刺参能有效调节高胆固醇血症大鼠脂质代谢,其主要作用机理是促进脂质在体内的分解代谢,同时抑制消化道内脂质的吸收.     

Effects of D-Polymannuronic Sulfate on Serum Nitric Oxide Levels and Plasma Endothelin-1 and Angiotensin Ⅱ Contents in Renovascular Hypertensive Rats (Series Ⅱ)

采用肾血管性高血压大鼠模型（两肾一夹型）观察海洋硫酸多糖DPS对肾血管性高血压大鼠血清中一氧化氮(NO)和血浆中血管紧张素II（AngII）及内皮素-1(ET-1)含量的影响。DPS在肾血管性高血压大鼠造模第二天起分别以12.50,25.00，50.00mg/kg口服预防给药五周，每日给药一次。于给药前、给药后第三周和第六周分别测定动脉血压和心率。实验结束前，从每只大鼠取血6mL，用试剂盒测定血清中NO的含量；用放射免疫法测定血浆中AngII和ET-1的含量。血管紧张素转化酶抑制剂卡托普利（14mg/kg）作为本实验阳性对照药。结果：DPS口服预防给药五周，可显著增加血清中NO的含量和降低血浆中ET-1的含量，且呈剂量依赖性；DPS亦能降低血浆中AngII的含量，但未见剂量依赖性。结论：海洋硫酸多糖DPS对肾血管性高血压大鼠的降压作用机制可能与其促进体内NO生成或释放、降低AngII和ET-1的含量有关。     

岩藻聚糖硫酸酯低聚糖的制备及其抗氧化活性研究

探讨H2O2降解岩藻聚糖硫酸酯的条件及其产物的抗氧化活性。采用Cu2 -H2O2体系降解原料Fucoidan,结果发现反应时间越长得到的高分子量的组分越少,而低分子量的低聚糖产量增加;H2O2浓度增高,水解所得主要组分的分子量明显减小;温度升高,水解速度明显加快;产物的硫酸根含量随反应温度和H2O2浓度的降低而增加。用Pyrogallol—Luminol系统对水解产物的抗氧化活性进行了研究,发现硫酸根含量低的Fucoidan水解产物除O2.-的活性较好,其中15%H2O2降解得<5KD的低聚糖清除O2.-的活性明显高于肌肽(IC50为0.65mg/mL),IC50为0.17mg/mL。     

壳寡糖对大菱鲆生长和免疫功能的影响

以基础饲料中添加500mg/kg壳寡糖(Chitosan oligosaccharide,COS)喂养初始体质量为(12.2±0.01)g的大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)8周,研究COS对大菱鲆生长、血清免疫相关酶活性和抵抗迟缓爱德华氏菌感染能力的影响。结果表明:饲料中添加壳寡糖后,大菱鲆成活率得到提高,特定生长率和增重率分别提高了15.79%和25.26%。相比对照组,饲料中添加壳寡糖饲养的大菱鲆血液中性粒细胞的吞噬指数提高了4.51%,酸性磷酸酶活性提高了32.89%,同时,大菱鲆抵抗迟缓爱德华氏菌感染的免疫保护力显著增强(P<0.05)。研究表明,在饲料中添加壳寡糖能够提高大菱鲆的生长、非特异性免疫功能和免疫保护力。