壳聚糖的磺化产物对大鼠血栓和凝血时间的影响

甲壳质及壳聚糖的硫酸酯化反应是其化学修饰中最吸引人的研究内容之一。由于它们与肝素有相似骨架,经硫酸酯化,引入-NHSO3H,-CH2OSO3H-OSO3H,COOH,-CH2COOH基团后得到甲壳质(壳聚糖)类肝素药物,显示出抗栓、抗凝血性能(李鹏程等,1998;曾宪放等,1992;Proeyanatet al·,2002);如M     

壳聚糖的脱乙酰度、分子质量和性状对其体外促凝血活性的影响

制备不同脱乙酰度、分子质量的壳聚糖固体粉末和溶液,并利用试管法比较了不同浓度、不同性质及不同状态的样品的体外凝血时间.结果表明:当分子质量相近时,壳聚糖溶液的体外凝血时间随脱乙酰度的增加而减少,脱乙酰度中等的固体粉末具有最强的促凝血能力;当脱乙酰度相近时,只有高分子质量的壳聚糖溶液具有一定的促凝血活性,但固体粉末状态的三种壳聚糖均具有一定的缩短体外凝血时间的能力;同等剂量的壳聚糖溶液和粉末,除了高脱乙酰度、高分子质量的壳聚糖外,其余样品的固体粉末对于缩短体外凝血时间更为有效     

水溶性低分子量壳聚糖对糖尿病大鼠血糖的影响

研究不同化学修饰的水溶性低分子量壳聚糖对糖尿病大鼠血糖的调节作用,以探讨其结构与功能的关系。本研究对低分子量壳聚糖、低分子量羧甲基壳聚糖和低分子量羧甲基甲壳素进行化学表征和分子量测定。通过腹腔注射链脲佐菌素建立大鼠糖尿病模型,并随机分为糖尿病治疗组和模型组。治疗组大鼠每日按180 mg/kg体质量分别灌胃低分子量壳聚糖、低分子量羧甲基壳聚糖、低分子量羧甲基甲壳素,模型组按体质量灌胃相同体积的蒸馏水,连续灌胃45 d,于末次灌胃后测定大鼠空腹血糖、糖耐量、肝肌糖原含量,大鼠胰腺做病理组织切片观察。结果表明,不同化学修饰的水溶性低分子量壳聚糖的分子量在10 000~25 000 Da间,低分子量壳聚糖乙酰基取代度为52.71%,低分子量羧甲基壳聚糖的乙酰基取代度为7.50%、羧基取代度为98.16%,低分子量羧甲基甲壳素的乙酰基取代度为89.96%、羧基取代度为98.65%;三者均可显著降低糖尿病大鼠空腹血糖水平,改善糖耐量,提高肝肌糖原含量。其中,低分子量羧甲基甲壳素组效果最好,低分子量壳聚糖效果次之,推测水溶性低分子量壳聚糖的乙酰基可能在糖尿病大鼠血糖调节中发挥重要作用。     

水溶性低分子量壳聚糖对糖尿病大鼠血糖的影响

研究不同化学修饰的水溶性低分子量壳聚糖对糖尿病大鼠血糖的调节作用,以探讨其结构与功能的关系.本研究对低分子量壳聚糖、低分子量羧甲基壳聚糖和低分子茸羧甲基甲壳素进行化学表征和分子量测定.通过腹腔注射链脲佐菌素建立大鼠糖尿病模型,并随机分为糖尿病治疗组和模型组.治疗组大鼠每日按180 mg/kg体质量分别灌胃低分子量壳聚糖、低分子量羧甲基壳聚糖、低分子量羧甲基甲壳素,模型组按体质量灌胃相同体积的蒸馏水,连续灌胃45 d,于末次灌胃后测定大鼠空腹血糖、糖耐量、肝肌糖原含量,大鼠胰腺做病理组织切片观察.结果表明,不同化学修饰的水溶性低分子量壳聚糖的分子量在10 000～25 000 Da间,低分子量壳聚精乙酰基取代度为52.71%,低分子最羧甲基壳聚糖的乙酰基取代度为7.50%、羧基取代度为98.16%,低分子量羧甲基甲壳素的乙酰基取代度为89.96%、羧基取代度为98.65%;三者均可显著降低糖尿病大鼠空腹血糖水平,改善糖耐量,提高肝肌糖原含量.其中,低分子量羧甲基甲壳素组效果最好,低分子量壳聚糖效果次之,推测水溶性低分子量壳聚糖的乙酰基可能在糖尿病大鼠血糖调节中发挥重要作用.     

血府逐瘀汤对大鼠深静脉血栓预防作用的实验研究

目的:探讨血府逐瘀汤对大鼠深静脉血栓的预防作用。方法:将50只雄性SD大鼠随机分成血府逐瘀汤组、低分子肝素钠组、模型对照组和假手术组,每组予以不同用药,7d后除假手术组行假手术外,其余3组均建立深静脉血栓动物模型。造模术后72h各组均随机取5只大鼠脱颈处死,取股动脉血分离血浆,检测血浆组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）和组织型纤溶酶原激活剂抑制物（PAI）水平;截取下腔静脉及分支静脉结扎段,电子天平称取血栓湿重。造模术后第10天将余下大鼠全部处死,同前方式检测t-PA和PAI水平及其凝血常规［包括血浆凝血酶时间（TT）、血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶时间（APTT）］、抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）。结果:1）血栓湿重。低分子肝素钠组和血府逐瘀汤组之间差异无统计学意义（P>0.05）,但2组与模型对照组相比血栓湿重均较轻,差异有统计学意义（P<0.05）。2）血浆t-PA及PAI。2个时段组内比较,血府逐瘀汤组和低分子肝素钠组的血浆t-PA、PAI水平差异无统计学意义（P>0.05）,但2组与模型对照组相比,血浆t-PA含量均较高、PAI含量均较低,差异有统计学意义（P<0.01）;2个时段之间对比,同组术后72h与术后10d t-PA及PAI水平无明显差异（P>0.05）。3）凝血指标。低分子肝素钠组和血府逐瘀汤组与模型对照组的TT、PT、AT-Ⅲ比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论:血府逐瘀汤可减轻血栓湿重,在一定时间内促进t-PA及抑制PAI生成,从而可预防深静脉血栓。     

壳聚糖的化学改性及其产物的红外解析研究

甲壳素是一种天然高分子多糖，具有与纤维素相近的骨架结构，其资源丰富，用途广泛(方波，1998)。但由于分子内和分子间存在很强的氢键作用力，因而不能熔融，也不溶于普通溶剂(如水、乙醇等)(董炎明等，2002)，实际应用中较多的是其部分或全部脱乙酰化产物——壳聚糖。壳聚糖虽然可以溶于酸性水溶液，但不能直接溶于水中，且在酸性水溶液中不稳定，也不溶于一般的有机溶剂，这在很大程度上限制了它的应用(董炎明等，2002)。所以，水溶性壳聚糖衍生物的研制正成为一个新的研究方向。壳聚糖分子中C2位上的-NH2，C3、C6位上的-OH，均具有较强的反应活性，在适当条件下可进行多种化学修饰，如酰基化、羧烷基化、硫酸酯化、烷基化、羟烷基化及氰烷基化等。引入上述功能性基团，可增加壳聚糖的溶解性和功能性，拓宽了壳聚糖的应用范围。这些衍生物的制备研究已成为壳聚糖应用开发的主要方向之一。     

羧甲基壳聚糖对肿瘤生长的影响研究

研究评价了不同分子量及不同取代度的3种羧甲基壳聚糖(CM-CTS)对肿瘤生长的影响。用MTT比色法测定3种CM-CTS对人正常肝细胞L02及3株肿瘤细胞:Bel-7402、SGC-7901及Hela生长的影响;ELISA方法检测3种CM-CTS对2种肝细胞L02及Bel-7402分泌TGF-α及VEGF水平的影响;建立小鼠移植性肿瘤Heps模型,腹腔注射分子量最大的CM-Ⅰ,研究CM-CTS的抑瘤作用。研究结果表明,分子量及取代度不同的3种CM-CTS在0.05~0.8 mg/mL浓度范围内,对L02细胞增殖具有显著促进作用,对Bel-7402、SGC-7901及Hela细胞的增殖则具有一定的抑制作用;3种CM-CTS能提高L02细胞TGF-α分泌水平,抑制Bel-7402细胞分泌TGF-α及VEGF水平;在动物水平上,CM-CTS能抑制小鼠Heps肿瘤生长,且量效关系显著。说明不同分子量及取代度的3种羧甲基壳聚糖对肿瘤生长具一定的抑制作用。     

甲壳素和壳聚糖的制备条件对其质量及性能的影响

甲壳素系一种天然含氮多糖类物质,脱乙酰基后生成壳聚糖。由于其分子中含有羟基、苷键、乙酰氨基或氨基,故可发生一系列化学反应而可以获得具有特殊功能、价值更高的产品。笔者曾收集国内外近１０个厂家的产品进行分析比较,不仅外观、形状和色泽差别甚大,而且其粘度、分子量、溶解性及脱乙酰度差异亦很大,这就直接影响其使用性能及深加工条件。因此,研究其制备条件及反应本质有着十分重要的指导意义。曾有不少学者［１,４］提出过改进工艺的意见,笔者着重就各种制备条件对产品质量和性能的影响进行了较全面的研究。１实验１．１原料…     

硫酸化壳聚糖衍生物对实验性大鼠脂肪肝的治疗作用

研究硫酸化壳聚糖衍生物对实验性大鼠脂肪肝的治疗作用。采用定量灌胃酒脂乳剂的方法建立大鼠混合型脂肪肝模型。建模成功后的大鼠随机分为模型对照组和硫酸化壳聚糖治疗组,各组均饲以正常饲料,硫酸化壳聚糖治疗组采用腹腔注射给药,模型对照组以同等体积的生理盐水腹腔注射。治疗3周后,观察大鼠肝脏病理形态学变化,检测血清TC、HDL、LDL、AST、ALT和肝组织TG、AST、ALT、SOD含量。结果表明,硫酸化壳聚糖治疗组的肝组织形态较模型对照组有明显的好转,血清TC,HDL,LDL,AST,ALT和肝组织TG,AST,ALT含量显著降低,肝组织SOD含量增加;硫酸化壳聚糖治疗组血清TC,HDL,LDL,AST,ALT和肝组织TG,AST,ALT,SOD含量均恢复至正常对照组水平,硫酸化壳聚糖衍生物对大鼠脂肪肝有很好的治疗效果。     

壳聚糖对种子萌发及幼苗生长的影响

用不同相对分子质量、不同质量分数和不同复配组合的壳聚糖处理不同的种子 ,研究了不同处理方法对种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明 :通过这些处理 ,不但能不同程度地提高种子的发芽率 ,而且还能使幼苗健壮 ;用中相对分子质量 (Mr≈ 60× 1 0 3)、质量分数为 0 .5%的壳聚糖加谷氨酸处理种子 ,效果最好 ,尤其对大颗粒种子如玉米、豇豆和大豆。     

壳聚糖季铵盐的合成及性质研究

为开发利用壳聚糖及其衍生物,采用异相法合成了壳聚糖季铵盐——羟丙基三甲基氯化铵(HACC),并分别用红外光谱、核磁共振对其结构进行了表征;通过扫描电镜图对比分析了CS和HACC的粒度和外貌形态变化。在此基础上,测定了HACC的取代度(DQ),并对其溶液性质进行研究。结果表明：通过在壳聚糖分子结构中N上引入季铵盐侧链合成的HACC,具有较好的水溶性和较高的稳定性,室温下水中溶解度达10％,1％醋酸水溶液粘度在12d内、水溶液粘度在pH=3～9范围内几乎没有降低。     

羟丙基壳聚糖对表面活性剂微乳液相图的影响

在 2 5℃条件下 ,测定了不同浓度的羟丙基壳聚糖 (HPCHS)溶液 /表面活性剂 (聚氧乙烯(2 3)醚月桂醇 (BRIJ35)、十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB)、十二烷基硫酸钠 (SDS)、二甲基十二烷基甜菜碱 (C1 2 BE) ) /正丁醇 (n- C4H9OH) /正辛烷 (n- C8H1 8)体系微乳液拟三元相图。结果表明 ,在所研究的浓度范围内 ,羟丙基壳聚糖对不同类型表面活性剂体系微乳液的形成有不同的影响 :(1 )除C1 2 BE体系外羟丙基壳聚糖的加入均在一定程度上改善了原有体系微乳区的形成和稳定 ;(2 )羟丙基壳聚糖溶液在 1 0 ,1 0和 5g/ L浓度时分别使 BRIJ35,CTAB和 SDS体系微乳区面积达到最大 ;(3)羟丙基壳聚糖的加入没有明显改变 C1 2 BE体系的微乳区面积。     

医用壳聚糖膜的性能及用途

为对医药领域开发和研制壳聚糖膜提供一些借鉴,综述了壳聚糖膜可以应用于医药领域的优良性能:易降解性、生物相容性、促创伤愈合性、抗菌性和药物缓释性;以及壳聚糖膜剂的一些医药用途,有人工肾膜、人工皮肤、口腔溃疡膜、牙周GTR膜、不同给药途径药膜等。     

氨基多糖多孔微球载体制备及其脲酶固定化特性

以脱乙酰度为 95 % ,分子量分别为 98KDa和 1 1 30 KDa的氨基多糖为载体材料 ,采用三聚磷酸钠固定的方法制成氨基多糖微球 ,并以此氨基多糖微球为载体用戊二醛交联法进行脲酶固定化研究。结果表明 :在 3%复合氨基多糖溶液中大、小分子量氨基多糖质量比为 1∶ 5时微球载体机械强度较好 ,表面光滑。用 Ca CO3 (w/w=1 /1 )处理则可得到表面具有蜂窝状结构的多孔微球载体 ;光滑表面微球载体与多孔微球载体对脲酶的固定化效率分别是 5 1 .5 %和 6 8% ;用 1 .5 cm× 1 5 cm柱进行尿素转化时间 1 2 min,光滑表面微球载体固定化脲酶和多孔微球载体固定化脲酶对尿素溶液(30 0 mg/L)转化率分别为 91 .8%和 99.99%。这一结果说明 ,利用多孔微球载体可有效地提高载体对脲酶的固定化效率 ,并且能彻底的分解尿素 ,提高尿素转化率     

木瓜蛋白酶降解甲壳胺的研究

采用一种木瓜蛋白酶过甲壳胺进行降解。研究了酶用量、pH值、温度、时间四个因素对反应的影响。其中,温度的影响作用显著,时间具有较小的影响作用(pH:3.0～6.0;温度:30°～60℃;时间:2～8h)。实验结果表明降解反应不遵循简单的动力模式。在pH4.0、40°C、8h、1.5mg/mL木瓜蛋白酶的条件下,分子量为(5～10)×105时用甲壳胺可容易地被木瓜蛋白酶降解为高度解聚的甲壳胺。     

O-羧甲基壳聚糖的制备及其结构表征

本文以壳聚糖为原料,采用苯甲醛选择性的保护壳聚糖C2位氨基的方法,制备了O-羧甲基壳聚糖(O-CMC)。采用红外光谱及核磁共振波谱法对产物结构进行了表征,确定了羧甲基化反应只发生在壳聚糖的O位。该方法制备得到的O-CMC的羧甲基度为42.2%,反应选择性好,步骤简单,产率高达85%。     

壳寡糖对大菱鲆生长和免疫功能的影响

以基础饲料中添加500mg/kg壳寡糖(Chitosan oligosaccharide,COS)喂养初始体质量为(12.2±0.01)g的大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)8周,研究COS对大菱鲆生长、血清免疫相关酶活性和抵抗迟缓爱德华氏菌感染能力的影响。结果表明:饲料中添加壳寡糖后,大菱鲆成活率得到提高,特定生长率和增重率分别提高了15.79%和25.26%。相比对照组,饲料中添加壳寡糖饲养的大菱鲆血液中性粒细胞的吞噬指数提高了4.51%,酸性磷酸酶活性提高了32.89%,同时,大菱鲆抵抗迟缓爱德华氏菌感染的免疫保护力显著增强(P<0.05)。研究表明,在饲料中添加壳寡糖能够提高大菱鲆的生长、非特异性免疫功能和免疫保护力。     

壳寡糖对刺参生长、免疫反应和抗病力的影响

以初始质量(5.28±0.03)g的仿刺参(Apostichopus japonicas Selenka)为实验对象,进行为期56d的摄食生长实验。在基础饲料中分别添加0、0.25%、0.50%、1.00%和2.00%的壳寡糖(Chitosan oligosaccharide,COS),配制成5种实验饲料,研究壳寡糖对仿刺参生长、免疫反应和抗病力的影响。结果表明:饲料中添加了壳寡糖后,刺参的特定生长率呈上升趋势,但与对照组无显著性差异(P0.05)。饲料中添加壳寡糖对刺参体腔细胞吞噬活性的影响不显著(P0.05),而显著提高了刺参体腔细胞的呼吸爆发活力(P0.05)。饲料中添加0.50%的壳寡糖可显著提高刺参体腔细胞的一氧化氮合酶活性(P0.05)。刺参体腔细胞内酸性磷酸酶活性呈下降趋势,其中0.50%壳寡糖添加组显著低于对照组(P0.05)。攻毒实验表明,饲料中添加壳寡糖对提高抵抗灿烂弧菌的能力无明显作用(P0.05)。综合比较表明,饲料中添加壳寡糖,对刺参的生长和抵抗灿烂弧菌的能力有一定的促进作用。