大弹涂鱼自然种群遗传多样性的RAPD分析

2002年9月以采自浙江宁海三门湾海区的大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris L．)为材料,对大弹涂鱼自然种群的遗传多样性进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析,20个引物共扩增出100个DNA片段,多态位点比例(P)为21％,任意两个个体间遗传相似度(F)最大为0．9938,最小为0．9239,平均为0．9645。任意两个个体间的遗传距离(D)最大为0．0761,最小为0．0062,绝大多数为0．02000～0．0500;大弹涂鱼自然种群的平均杂合度(He)为0．2018,D平均值为0．0355;Shannon多样性指数(Ho)和Shannon多样性值(H)分别为5．918和0．0592。研究结果表明大弹涂鱼的遗传多样性水平比较低,应加强大弹涂鱼种质资源的保护。     

澥浦大弹涂鱼群体生化遗传分析

于2004年4月,在浙江省宁波市镇海区澥浦滩涂采集野生大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)30尾,采用聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳方法,分析了乳酸脱氢酶(LDH)、甲酸脱氢酶(FDH)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、D-葡糖脱氢酶(GCDH)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、苹果酸酶(ME)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和酯酶(EST)等10种酶在大弹涂鱼肝脏组织中的表达,并对同工酶表型进行了生化遗传分析。实验结果表明,大弹涂鱼10种同工酶中除CAT外的另9种酶都得到了清晰的酶谱。该9种酶共记录了23个基因座位,筛选出LDH-1,FDH-1,G6PDH-1,ME-1,SOD-1,EST-1,EST-2,EST-3等8个多态基因座位。澥浦大弹涂鱼多态座位比例(P)为34.78%,平均杂合度(H)为0.0594,与其他海水鱼类相比,遗传多样性水平相对较低。     

性外激素诱导大弹涂鱼成熟和产卵

成熟大弹涂鱼的卵巢、精巢和储精囊稀释液中的性外激素以及缩宫素和脱氧皮质酮（DOC）能诱导第4时相的大弹涂鱼卵母细胞在离体培养的条件下发育成熟，成熟率与性外激素的种类和剂量有关。前列腺素E1（PGE1）单独使用的效果不明显，但与人绒毛膜促性腺激素（HCG）混合使用时显著提高了卵母细胞的成熟率。以卵巢、精巢和储精囊稀释液以及PGE1分别注射雌性大弹涂鱼，剂量为0．01cm^3/尾的卵巢液、0．1cm^3/尾的储精囊液、0．1cm^3／尾的精巢液以及剂量为10μg/尾的PGE1都有诱导卵母细胞成熟的作用，其中储精囊液的作用最为显著。在人工管道中放置大弹涂鱼成熟亲鱼卵巢、精巢或储精囊的稀释液，有诱异性亲鱼进入管道内的作用，其中以储精囊液对雌鱼的吸引作用尤为明显。放置于陶瓷管道或海绵管道内的卵巢、精巢或储精囊稀释液都能诱导大弹涂鱼产卵，在陶瓷管道的产卵量和受精率显著高于海绵管道。     

大弹涂鱼土池育苗技术研究

在总面积为3 340 m2的4口土池(835 m2/口)进行大弹涂鱼(Boleophthalmus pecti-nirostris(Linnaeus))育苗试验研究。共放养1龄和2龄亲鱼11 000尾,2004年5月16日~5月21日和5月31日~6月4日先后孵出两批仔鱼,每批次的孵化时间持续5~6 d,共孵出仔鱼330×104尾。采用泼洒泥浆、接种轮虫、施肥、调节池水盐度和遮阳控制水温等方法进行仔稚鱼培育,土池育苗取得了突破性进展。初孵仔鱼经过34~53 d的培育,共培育出幼鱼34.76×104尾,幼鱼平均全长23.1 mm,平均体质量100.0 mg,平均成活率10.5%。试验结果表明,大弹涂鱼亲鱼未经性激素注射能在土池洞穴内自然产卵孵化,采取合理的技术措施在土池中进行大弹涂鱼批量育苗是可行的。     

池养大弹涂鱼生长的初步研究

本文研究了浙江温岭池塘养殖的2龄大弹涂鱼的生长特性、各基本生长指标间的关系以及肥满度等.结果表明:大弹涂鱼雌雄生长差异不显著;体长与体高、体宽的相关关系分别为Ls=5.685 7Hb 12.219(r=0.991 1)、Ls=5.397 3D 23.084(r=0.989 5),体长与体重、纯体重的相关关系分别为W=2×10-6Ls3.502 5(r=0.996 6)、Wn=1×10-6Ls3.519(r=0.997 2);大弹涂鱼6-7月生长速度较快,8月生长减慢,9-11月又较快生长,12月至翌年2月生长最慢,翌年3-6月生长又相对加快.大弹涂鱼体长和体重相对增长率的年变化规律与池塘水温年变化一致.大弹涂鱼的肥满度随着鱼的生长而增大.与已报道的野生大弹涂鱼及虾池养殖大弹涂鱼的肥满度进行了比较,提出了提高池塘养殖大弹鱼肥满度的措施.     

苯并（a）芘对大弹涂鱼肝脏超氧化物歧化酶活性的影响

在实验生态条件下，研究了在苯并（a)芘（BaP)胁迫下大弹涂鱼肝脏超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化，结果显示：暴露3d时，不同BaP含量组大弹涂鱼肝脏SOD活性无显著差异（P＞0．05），而暴露7d时，随着B aP含量的升高，0.5mg/dm^3 BaP含量组SOD活性被显著诱导（P＜0．05），为对照组的1．87倍；随着暴露时间的延长，各含量组肝脏SOD的活性均表现出不同程度的下降趋势，其中对照组肝脏SOD活性显著降低，表明SOD活性易受污染以外的因素，如水体容量、铒料、光照等的影响。污染解除后，0.5mg/dm^3含量组SOD活性显著升高，表明大弹涂鱼肝脏仍具有较强的生理调节机能，也可能表明SOD活性的变化相对于环境因子改变的“迟滞性”。以上这些结果表明SOD有可能作为大弹涂鱼受BaP胁迫的生物指标。     

镉胁迫对大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)血细胞遗传损伤的研究

以大弹涂鱼为研究对象,应用单细胞凝胶电泳技术并结合外周血基因组DNA琼脂糖凝胶电泳,研究了镉胁迫对大弹涂鱼外周血细胞的遗传损伤。结果表明:(1)镉对大弹涂鱼外周血细胞是遗传毒性而非细胞毒性,并且产生的遗传损伤存在显著(P0.01或P0.05)的剂量效应,染毒1h的大弹涂鱼的全长和尾长与浓度的相关方程分别是y=29.592x-10.576(r2=0.9786),y=28.417x-14.859(r2=0.9857),染毒2h的大弹涂鱼的全长和尾长与浓度的相关方程分别是y=32.044x-5.0235(r2=0.941),y=29.911x-9.539(r2=0.9635)。(2)DNA的损伤程度和污染胁迫之间存在着时间效应。以上结果表明,DNA损伤可作为大弹涂鱼受镉胁迫时的生物指标。     

Aroclor 1254对大弹涂鱼精巢线粒体氧化应激的影响

大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)是盛产于我国东南沿海滩涂的两栖经济鱼类。分别用1,2,4μg/g的Aroclor 1254对生殖期雄性大弹涂鱼腹腔注射28 d后,检测大弹涂鱼精巢与储精囊的绝对与相对重量,并检测其精巢线粒体氧化水平、抗氧化酶活性与非酶类抗氧化剂含量。结果显示,1μg/g Aroclor1254剂量组中大弹涂鱼精巢、储精囊绝对重量与对照组均无显著差异(p=0.90),而较高剂量组(2,4μg/g Aroclor1254)上述指标均显著低于对照组(p0.05);相对重量指标中仅4μg/g Aroclor1254剂量组的储精囊相对重量显著低于对照组(p0.05)。此外,Aroclor1254使精巢抗氧化防御能力降低,三个处理组的SOD活性与GSH含量均比对照显著下降(p0.05),较高剂量组CAT,GPx,GR活性及Vit C含量也均显著低于对照(p0.05);而H2O2产量与脂质过氧化反应显著增加,1,2和4μg/g剂量组中MDA含量分别为对照组的1.12,1.52和1.80倍,H2O2含量分别为对照组的1.20,1.40和1.75倍,与Aroclor1254剂量呈现明显相关性。表明Aroclor1254可以诱导精巢线粒体的氧化应激对精巢产生毒性,影响雄性大弹涂鱼生殖机能。     

大弹涂鱼不同组织器官的同工酶研究

采用垂直聚丙烯酰胺平板电泳技术,对大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)的眼睛、心脏、肝脏、肌肉、脾脏和鳃等6种组织器官中的13种同工酶进行研究,并分析了其酶谱表型。结果表明,四唑氧化酶(TO)和酸性磷酸酶(ACP)没有检测到酶带;三梨醇脱氢酶(SDH)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)仅在肝脏中表达;超氧化物歧化酶(SOD)在所有组织中均存在,部分组织中存在差异;乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、苹果酸酶(MEP)、酯酶(EST)、醇脱氢酶(ADH)、D-葡萄糖脱氢酶(GcDH)、甲酸脱氢酶(FDH)、谷氨酸脱氢酶(GDH)则具有明显的组织特异性。     

九龙江口红树林区底栖动物体内的多环芳烃

2001年8月和11月在九龙江口红树林区采集了6种底栖动物,测定了它们体内16种多环芳烃的含量.紫游螺(Neritina [Dostia] violacea)、黑口滨螺(Littoraria melanostoma)、可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)、弹涂鱼(Periophthalmus cantonensis)、查加拟蟹守螺(Cerithideadj adjariensis)、孔虾虎鱼(Trypauchen vagina)对沉积物中多环芳烃的富集系数均小于1.弹涂鱼和黑口滨螺体内多环芳烃的含量有随沉积物中多环芳烃含量的增加而增加的趋势,但它们的富集系数却有随沉积物中多环芳烃含量增加而减少的趋势.弹涂鱼、黑口滨螺、查加拟蟹守螺和可口革囊星虫体内多环芳烃主要由二环多环芳烃组成,紫游螺和孔虾虎鱼体内分别是四环和五环多环芳烃比例最高.     

Spatial segregation of two common Gobius species (Teleostei: Gobiidae) in the northern Adriatic Sea

The habitat characteristics and spatial segregation of the two common gobies Gobius fallax Sarato, 1889 and Gobius auratus Risso, 1810 were investigated by fish frequency and abundance estimates through visual counts in the northern Adriatic Sea. The latter species is represented by a recently described, unusual colour morph in the northern Adriatic Sea. Gobius fallax was observed at five of the nine locations examined and its abundance did not differ between two of three transect locations at Piran (Slovenia) and at the western coast of Cres (Kvarner region, Croatia). Gobius auratus was not found in the Gulf of Trieste but was present at several Kvarner locations, and co‐occurred with G. fallax at one location at Cres. Both inhabit rocky substrates but they show different preferences for substrate inclinations and bathymetric segregation. Gobius fallax was most frequent between 2 and 8 m depth and was most abundant on substrate inclining less than 30°. Its highest abundance over entire transects was 0.3 indiv.·m^?2 but within certain transect sections this increased to 1.25 indiv.·m^?2. Gobius auratus attained its highest abundance in depths below 8 m and at substrate inclinations between 30 and 90°. This species attained its highest values at the western coast of Cres, where it reached a maximum of 1.5 indiv.·m^?2 over entire transects but even up to 3.0 indiv.·m^?2 in certain transect sections. At Krk, the maximum abundance over entire transects was only 0.3 indiv.·m^?2.     

RAPD技术在中国对虾群体鉴别上的应用

采用RAPD技术对中国对虾(Penaeus chinensis)、中国黄海、渤海沿岸种群(H)朝鲜半岛西海岸种群(K)和即墨健康养殖群体(S)的DNA进行检测,41个随机引、物在3个群体间共筛选到了3个稳定的RAPD标记F-02₅₄₀,OPN-13₈₀₀和OPN-20₂₂₀₀,可用于群体间的鉴别,研究将为中国对虾分子标记遗传育种提供依据。     

Application of RAPD technology for identification in three different stocks of Penaeus chinensis

INTRODUCTIONPenaeuschinensishasbecomeoneoftheprimaryspeciesforaquacultureinChina .How ever ,viralandbacterialdiseaseproblemshaveplaguedtheshrimpaquacultureindustryserious lyinChinasince 1 993.Ithasbeenindicatedthatthereducedgrowthperformanceandthein creasedsusceptibilitytodiseasescouldbearesultoflowlevelsofgeneticvariablities (Carretal .,1 994 ) .InordertosupporttheaquacultureindustryoftheUnitedStates,theUSMarineShrimpFarmaringProgramConsortiumhasdevelopedvariousdisease free populati…     

95Zr在海水、底质及海洋生物间的迁移、富集和分布

在模拟海洋环境中,海水中95Zr的比活度在试验前期快速下降,在最初4h内下降了90%以上,此后呈缓慢递减趋势.底质中95Zr的比活度在试验前期逐渐上升,至48h达到最大值,此后随时间逐渐降低.半褶织纹螺螺壳富集95Zr的能力显著强于螺肉,螺壳和螺肉的富集系数分别为10.32和4.68.大弹涂鱼各组织器官中,根据富集量,对95Zr的富集能力最强的是内脏,其次是鳃和鳍,最弱的是肌肉,次弱的是脊椎.大弹涂鱼除鳃外,其余各组织器官的富集系数均小于1.半褶织纹螺对95Zr的富集能力比大弹涂鱼更强.     

四种~(14)C标记农药在某些海洋动物中的积累和降解

对14C－六六六、14C-毒死蝉、14C-敌百虫和14C-久效磷在几种海洋动物中的积累和降解进行了比较研究。结果表明,4种农药在实验动物中被积累的能力由大至小顺序为：14C－六六六和14C－毒死蝉,14C－敌百虫,14C－久效磷。而实验动物对农药的积累能力由大至小顺序为：小弹涂鱼Periophthalmuscantonensis,实验贝类,褶痕相手蟹Sesarma（Parasearma）plicata。不同动物对毒死蜱的降解能力各不相同：弹涂鱼的降解能力最强,其主要降解产物为三氯代吡啶酚（TCP）;毛蚶Scapharcasuberenata次之,主要降解产物为极性未知物;褶牡蛎AlectryonellaPlicatula和翡翠贻贝Pernaviridis的降解率也在30％以上,降解产物为TCP和极性未知物;波纹巴非蛤Pophia（Paphia）undulata和文蛤Meretrixmereitrix的降解能力较差。对14C－六六六和14C－毒死蜱在生物中的结合态比例有很大的差异。     

黄海塔螺科一新种

在整理鉴定黄海、渤海软体动物前鳃类时，发现了塔螺科(Turridae) 一新种，现报道如下。     

五种海洋鱼类消化道G细胞的定位

应用胃泌素多克隆抗体和链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组织化学方法(SP法),对中华乌塘鳢(Bostrichthys sinensis)、黄鳍鲷(Sparus latus)、牙鲆(Paralichthys olivaceus)、褐篮子鱼(Sigauns fusces-ens)和大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)消化道胃泌素细胞(G细胞)进行免疫组化鉴别和定位。结果显示:中华乌塘鳢G细胞主要分布在小肠,直肠偶见。黄鳍鲷G细胞仅在小肠发现。牙鲆G细胞大量位于幽门胃和小肠。褐篮子鱼G细胞在幽门盲囊和小肠有少量分布。大弹涂鱼G细胞在贲门胃、幽门胃和小肠均有出现,大量分布于幽门胃。5种鱼类G细胞主要出现在胃和小肠的分布状况,与胃泌素调节胃肠消化吸收的功能相一致。5种鱼类G细胞形态类型多样,提示了胃泌素以不同的内分泌方式参与消化生理过程。