栉孔扇贝体内寄生的病毒的分离纯化及其形态学观察

栉孔扇贝(Chlamys farreri)是我国传统海水养殖贝种,养殖范围主要分布于黄海、渤海沿岸的山东、河北、辽宁等地,但是,近年来因病害发生,造成了巨大的经济损失.扇贝大规模死亡流行病学调查研究已进行多年,流行病学调查、病理学、病原感染实验及病原分离纯化等研究初步认为类立克次体是扇贝(包括栉孔扇贝和海湾扇贝Argopecten irradians)的病原生物[1～4].在用泛影葡胺密度梯度离心纯化栉孔扇贝类立克次体时发现一种具囊膜的病毒粒子,本文首次报道栉孔扇贝体内该球形病毒纯化的形态学特征.     

扇贝糖胺聚糖提取和纯化方法研究──Ⅰ．提取方法研究

研究从海湾扇贝中提取扇贝糖胺聚糖的一种实用而有效的方法。提出用胃蛋白酶、胰蛋白酶和枯草杆菌中性蛋白酶结合的水解方法，并给出糖胺聚糖提取过程的工艺流程。     

海湾扇贝肝素样多糖分离方法的研究

于1992年1月-1993年2月，对从海湾扇贝中提取获得的糖胺聚糖（GAG）用乙醇和溴化十六烷基三甲铵（CTAB）分级分离，并对所得制品用琼脂糖凝胶电泳和高效液相色谱验证，以研究一种简便、快速的分离提纯方法。结果表明，扇贝GAG水溶液在乙醇量60％时分离获得的级分，其GAG－GTAB给合物再用2.0 mol/LNaCl溶液解离得到的主要级分，琼脂糖凝胶电泳和高效液相色谱均显示出单一区带，红外光谱类似干肝素的。证明这一提纯过程是一简便、快速的分离提纯方法。     

安络小皮伞［Marasmius androsaceus （L：Fr）Fr］中水溶性多糖的研究Ⅳ总糖及糖蛋白的分布、分级与测定

用水提取的安络小皮伞的多糖．经醇析．真空干燥后，用ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱层析，酚一Ｈ２ＳＯ４法检测其多糖分布，紫外吸收法（２８０ｎｎ）检测其蛋白质分布，表明提取物为多糖和糖蛋白的混合物，总糖含量为３０．５％。ｌｏｒｒｙ法和克氏定氮法测定蛋白质含量１５％。采用Ｐ．Ｃ和Ｇ．Ｃ法测定，结果提取物中的多糖由三种中性单糖组成．其摩尔比为：ＧＬＣ：Ｍａｎ，ＦＵＣ＝１．２：３：１．７。用Ｆｅｈｌｉｎｇ试剂法测定，表明混合物中有甘露聚精。Ｆｅｌｌｌｉｎｇ试剂法与甲醇、乙醇分级法相结合，从提取物中分出六个糖蛋白级分：Ｆｐ１、Ｆｐ２、Ｆｓ１、Ｆｓ２、Ｆｓ３和Ｆｓ４，其中Ｆｐ１、Ｆｓ１和Ｆｓ３经ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱测定为多糖分子量单一的级分。     

褐藻多糖的药理作用与制备

阐述了褐藻糖胶的化学组成和结构。从褐藻中提取分离得到的褐藻糖胶具有显著的抗癌、抗凝、降脂、免疫调节和抗衰老作用,既可作为保健食品,也可作为治疗药物。目前,我国制备褐藻糖胶,主要采用60%乙醇沉淀法和CPC沉淀法从海带水碱凝沉物中提取,或用稀酸直接从海带中提取,并用乙醇分级法和色谱法对褐藻糖胶进行纯化。     

海湾扇贝控温育苗采卵时间的预报方法

于１９８８年３月－１９９３年５月，在威海崮山渔业公司和文登市海水养殖一场，采集海湾扇贝，运用二点法、最小二乘法和电动计数式积温仪测积温３种方法，进行海湾扇贝生物临界温度和控温育苗采卵时间预报方法的研究。结果表明：在升温促熟中，用３种方法求出的海湾扇贝的生物学临界温度分别为Ｔ０１＝９．００℃，Ｔ０２＝６．５４℃，Ｔ０３℃＝７．１１℃；这些结果是实验条件精度差异的反映，Ｔ０３精度较高。亲贝入池温度与促     

钙质超微化石定量研究方法

针对当前从事钙质超微化石定量研究使用的不同制样方法，简要介绍了适用于光学显微镜（LM）和扫描电子显微镜（SEM）的传统涂片法、小珠校准法、随机沉淀法和过滤法的主要流程和设备要求，同时对不同方法的优缺点进行了评述。     

钝顶螺旋藻藻蓝蛋白提取纯化新工艺

对钝顶螺旋藻（Spirulina platensis）中藻蓝蛋白的提取和纯化方法进行了改进。用磷酸盐缓冲液循环冻融联合超声波破碎法，50％硫酸铵沉淀获得藻蓝蛋白（phycocyanin，PC），提取率达到13．1%。粗蛋白提取液再经过两次羟基磷灰石柱（HA）层析和sephacryl-HR-200凝胶层析对其进行纯化，纯度达到4．71％。纯化后的PC在12％十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）中得到两条带，分别是α和β两个亚基，分子质量分别为21．4ku和17．0ku。结果表明，通过上述分离纯化过程得到了较高提取率和电泳纯度的藻蓝蛋白。     

扇贝外寄生车轮虫（Trichodina jadranica Raabe，1958）的形态学研究 （原生动物：纤毛门：缘毛目）

采用Ｗｉｌｂｅｒｔ蛋白银法及Ｃｈａｔｔｏｎ—Ｌｗｏｆｆ银浸法对一种附生于栉孔扇贝鳃丝上的寄生车轮虫进行了光镜水平下的研究。依据其形态学和纤毛图式特征，该种被鉴定为ＴｒｉｃｈｏｄｉｎａｊａｄｒａｎｉｃａＲａａｂｅ，１９５８．此为我国新记录，同时也是第一例有关外寄生于扇贝鳃表纤毛虫原生动物的报道。     

治理赤潮的化学方法

治理赤潮的化学方法分为直接灭杀法、凝聚剂沉淀法和天然矿物絮凝法。比较而言,天然矿物絮凝法具有成本低、无污染等优点,是目前国际上较重视的开发应用方法。     

栉孔扇贝(Chlamys farreri)中抗氧化肽的分离纯化及性质研究

以栉孔扇贝内脏团为原料,对其中抗氧化肽的制备、纯化及性质进行了研究。首先采用硫酸铵沉淀、DEAE-Sephadex A-50阴离子交换层析的方法,进行了扇贝提取蛋白的制备,其次采用海洋蛋白酶YS-80水解、SephadexG-25凝胶层析的方法,进行扇贝抗氧化肽的制备,获得多肽粗品(海洋肽,PCF),并进一步采用CM Sepharose阳离子交换层析和反相高效液相色谱的方法,对扇贝抗氧化肽进行了纯化,结果得到组分PCF-3A,反相高效液相显示为单一峰。采用茚三酮反应、Sephadex G-15凝胶层析和AccQ.Tag氨基酸分析柱,进行了PCF-3A的理化性质研究。结果表明,茚三酮反应呈阳性;分子量约为794D;由7种氨基酸组成,分别为天冬氨酸、甘氨酸、苏氨酸、丙氨酸、缬氨酸、赖氨酸和脯氨酸。采用邻苯三酚自氧化体系和Fenton反应体系对PCF-3A的抗氧化活性进行了研究,发现该肽可有效清除羟自由基和超氧阴离子,半抑制浓度(IC50)分别为0.39mg/ml和2.85mg/ml,具有明显的抗氧化、抗衰老作用。     

甲壳纲动物凝集素的结构特征和分离纯化方法

凝集素(Lectin)是指所有非免疫原的能凝集细胞或沉淀含糖大分子的蛋白质或糖蛋白,一般具有糖结合专一性,能与糖蛋白或糖脂分子中的糖相结合。早在1888年,俄国的Herman发现蓖麻籽的蛋白质提取物能凝集血红细胞,从而开始了凝集素的研究。目前人们分离纯化的凝集素已经超过了1 000     

赤潮治理方法综述

文章综述目前赤潮治理的主要方法,其中物理法重点介绍机械搅动法、超声波法、吸附法和气浮法,化学法重点介绍无机药剂法、有机药剂法和胶体絮凝沉淀法,生物法主要介绍引入赤潮藻类生物天敌、微生物技术和化感技术,分析各自优势和不足,采用微生物技术和化感技术具有重要意义和发展前景。     

自养小球藻(Chlorella autotropica)多糖提取纯化方法研究

应用超声破碎法分别在HCl(0.01 mol/L)、蒸馏水及NaOH(4%)3种不同介质中提取自养小球藻(Chlorella autotropica)多糖.经3%TCA除蛋白及色素、乙醇沉淀真空干燥后,采用二乙胺基乙基琼脂糖凝胶柱层析.实验结果表明,以NaOH(4%)为介质进行超声破碎法提取并层析纯化是一种较适合自养小球藻多糖提取纯化的方法.     

海湾扇贝幼虫变态诱导研究

本文在实验室条件下研究了海湾扇贝幼虫的诱导变态。研究结果表明肾上腺素、去甲肾上腺素、ｃ－ＡＭＰ、ＧＡＢＡ、赖氨酸和ＫＣｌ等６种诱导剂中,ＫＣｌ对海湾扇贝幼虫的变态诱导效果非常显著。ＫＣｌ对幼虫的诱导效应随ＫＣｌ浓度和作用时间的增加而增大,过高浓度则抑制幼虫的变态。受精１３ｄ后幼虫（２２±１℃）才对ＫＣｌ的作用着重产生明显反应。这为生产上提供了一种方便、价廉、安全的诱导变态方法,在海湾扇贝育苗工作有很大的应用前景。     

基于16S rDNA基因序列探讨引进物种紫扇贝(Argopecten purpuratus)在海湾扇贝属(Argopecten)中的分类地位

秘鲁紫扇贝(Argopecten purpuratus)于2008年被引进我国,与海湾扇贝(Argopecten irradians irradians)成功杂交。为探讨紫扇贝在海湾扇贝属中的分类地位及与相似种海湾扇贝的进化关系,随机选取紫扇贝和海湾扇贝各10个个体,利用通用引物进行16S rDNA基因片段扩增并双向测序。序列分析结果表明,紫扇贝和海湾扇贝扩增获得基因片段长度均为542bp,碱基组成A+T所占比例分别为紫扇贝54.2%和海湾扇贝55.1%。紫扇贝和海湾扇贝种内分别有6和10个变异位点,种间有41个变异位点,且种内和种间变异均为转换或者颠换,无插入/缺失类型。结合Gen Bank同源序列信息,对海湾扇贝属物种进行遗传距离分析及分子系统树的构建。结果表明:海湾扇贝属7种扇贝[紫扇贝(A.purpuratus)、A.irradians、墨西哥湾扇贝(A.i.concentricus)、A.i.irradians、A.nucleus、A.gibbus和A.ventricosus]在系统树上聚为2支,与紫扇贝亲缘关系最近的是A.ventricosus,且该两种扇贝单独聚为一支。其余5种扇贝中,A.irradians、A.i.concentricus和A.i.irradians最先聚为一支,支持A.i.concentricus和A.i.irradians为A.irradians两个亚种的结论;另外,A.nucleus与以上三者也有很近的亲缘关系。该研究结果为海湾扇贝属物种进化、迁移及其遗传育种研究提供了理论基础。     

大菱鲆卵黄原蛋白的分离纯化及Native-PAGE、SDS-PAGE性质鉴定

采用5 mg/kg 17β-雌二醇对大菱鲆(Scophthalmus maximus)进行肌肉注射,一周后尾静脉取血,离心分离获得血浆,经Sephacryl S-300(高分辨)分子筛纯化卵黄原蛋白,对卵黄原蛋白进行常规聚丙烯酰胺凝胶电泳,考马斯亮蓝染色和糖、磷、脂的特征性基团染色.结果表明,17β-雌二醇能诱导大菱鲆产生卵黄原蛋白,以N-ative-PAGE方法计算得到大菱鲆卵黄原蛋白的分子质量为538 ku,以SDS-PAGE方法得出其两种亚基的分子质量分别为100 ku和82 ku.分子筛凝胶过滤能较好地纯化大菱鲆血浆中的卵黄原蛋白.     

裙带菜褐藻糖胶的分离及部分理化性质研究

以裙带菜为原材料,采用水提法从裙带菜中分离褐藻糖胶,Sevag法去蛋白,乙醇分步沉淀法进行初步纯化。结果表明裙带菜褐藻糖胶的最适提取温度为80℃,时间为8 h,加水量为1∶30,在最适条件下的提取率为1.72%,蛋白质含量为5.44%。同时本研究对部分理化性质进行了研究。结果是特性粘度为5 m pa.s,pH为8.50,含有硫酸基。     

中肋骨条藻蛋白质双向电泳样品制备方法的比较

比较了裂解液法和直接三氯乙酸(TCA)-丙酮沉淀法对中肋骨条藻Skeletonema costatum 蛋白双向电泳的提取效果并优化了提取条件,结果表明:裂解液-TCA-丙酮沉淀法在去除胞内干扰物质方面,较裂解液-超滤管法和裂解液-试剂盒法的效果都好。 裂解液-TCA-丙酮沉淀法和直接TCA-丙酮沉淀法都能取得背景干净、蛋白点清晰的双向电泳图谱,但后者的双向电泳图谱聚焦更完全,在进一步优化条件后(即蛋白沉淀12 h并增加超声波洗涤过程),可作为提取中肋骨条藻蛋白的最适方法。     

牛蒡菊糖及其制备方法的研究

研究从牛蒡根中提取菊糖并进行纯化的方法.选择固液比、提取温度、提取时间、提取次数4个因素作为单因素进行梯度实验,确定其条件范围,并采用正交设计法优化提取条件,得到牛蒡菊糖提取的最佳因素组合:固液比1:10,温度70℃,提取时间90min,提取2次,提取率为90.82%.对牛蒡菊糖进行理化特性和组成分析,结果表明,该菊糖平均分子量和聚合度较低,纯度较高,单糖组成含有果糖及少量的葡萄糖,具有菊糖类物质的一般特征.