暴发性流行病病原对中国对虾越冬亲虾人工感染的研究

从典型的白斑症病虾中,分离出一种杆状病毒,属对虾白斑病杆状病毒［３］。为了探讨对虾暴发性流行病的发病机理及传播机制,作者于１９９６～１９９７年冬季,采用青岛地区当年夏季暴发典型白斑症的病虾,对中国对虾健康的越冬亲虾进行了白斑病杆状病毒的感染试验。１　材料和方法１．１　病虾标本与病原分离具典型白斑症状的病虾,于１９９６年８月取自青岛城阳区红岛邵格庄发病的虾场,保存于－７０℃。剥离病虾的胃、肠及鳃组织约１０ｇ,加液氮充分研磨,加９０ｍｌ０．０１ｍｏｌ／ＬＰＢＳ（０．２ｍｏｌ／ＬＮａ_２ＨＰＯ_４－Ｎａ…     

中国对虾淋巴组织培养细胞中立克次氏体增殖的形态学研究

自１９９６年以来,引发对虾病害发生和流行的病原体日趋复杂,病毒、原核生物的混合型感染成为病害的主要特点。立克次氏体是一种原核生物,是导致对虾发病的重要病原体之一。目前关于对虾立克次氏体样病原的研究国内外系统报道的较少,现有报告主要是自然发病的对虾个体的病灶组织病原体的检测以及病理学的研究［１］。在对虾细胞培养环境条件下,立克次氏体的增殖方式及致病性等方面的研究尚未见报道。作者在细胞培养条件下,系统地研究了立克次氏体的形态、病理及其增殖规律。本文报道中国对虾淋巴组织培养细胞中立克次氏体增殖的形态学研究…     

1992～1993年福建南部地区虾病的调研

１９９２年７月～１９９３年１１月，福建养殖对虾发生了数起严重的流行性虾病．病发高峰期分别出现在１９９２年７月（发病对象为长毛对虾和斑节对虾）、１９９２年９月（日本对虾）、１９９３年５月（中国对虾，斑节对虾，长毛对虾和日本对虾）和１９９３年１０月（日本对虾）。本文对上述４次虾病做了调研，探讨了细菌、病毒和某些生态因子的变化与虾病的关系。ｌ材料与方法１．１细菌的检测材料取自同安西柯万亩对虾养殖地（表ｌ），采集方法按微生物调查规范［１］，３ｈ内带回实验室。检测按陈和范等［２，３］方法分离、培养、鉴定和…     

杆状病毒感染越冬亲虾(Penaeus chenesis)的研究——越冬亲虾感染及其垂直传播的可能性

在中国对虾越冬亲虾中检出杆状病毒。经对病虾鳃、前中肠、卵巢组织进行电镜观察，在这些组织中发现大量有囊膜的杆状病毒。病毒粒子大小约为３６７ｎｍ×１２８ｎｍ，核衣壳为３２４ｎｍ×９２ｎｍ。病毒在细胞内不形成包涵体，在核内或在细胞质的发生基质中装配。从病毒的形态特征、感染组织以及典型的发病症状和病理变化，初步认为亲虾感染的病毒与近年广泛报道的造成养殖对虾大规模流行病的主要原因——中国对虾杆状病毒为同一种。卵巢组织也是病毒的主要靶器官之一，亲虾卵巢组织的被感染暗示着该病毒有可能通过生殖细胞而垂直传播     

斑节对虾育苗中“红圈病”的防治

在对虾育苗期间，育苗池底或池壁上经常出现桃红色的斑点，形成为大小不一的红色的圆圈。红圈蔓延迅速，有时在１，２ｄ之内，便暴发和占满着整个池底和池壁。这种现象，俗称“红圈病”。凡是发生红圈的育苗池中，对虾幼体活力下降，厌食，趋光性差，并陆续出现死亡。严重时，虾苗几乎全部死亡。红圈病病原为真菌［１］。该病原菌多发生在光线暗弱的室内育苗池中。目前，有关防治红圈病的报道很少见。１９９３年４月期间，笔者在进行斑节对虾种苗生产时，对防治红圈病分别用不同药物进行试验。１试验材料与方法１．１在斑节对虾生产育苗池中…     

中国对虾暴发性流行病病原体研究Ⅱ. 病原体的分离纯化

本文利用不同地区典型病虾的头胸部和肝胰腺,通过差速和超速离心,进行了病原体的分离纯化.结果表明,各地样品提纯后,均可见大量杆状病毒,其长度为380-410nm,直径为90-100nm,与组织切片所观察到的病毒颗粒相比,其长度较大,而直径较小.感染实验结果表明,该种病毒是造成中国对虾暴发性流行病的病原体.     

中国对虾(Penaeus chinensis)肝胰腺上皮细胞质中杆状病毒增殖的电镜观察

对中国对虾肝胰腺上皮细胞进行透射电镜观察。指出：对虾杆状病毒可在肝胰腺上皮细胞的胞质内增殖，与以细胞核内形成包涵体为特征的增殖方式明显不同。溶酶体在增殖过程中内吞濒临解体的线粒体和病原体，利用线粒体内嵴提供的能量，有规律地组装成杆状病毒的包涵体。这一结果为探讨对虾暴发大面积死亡的病因分析提供了新的途径。     

利用WSBV的引物扩增中国对虾的杆状病毒DNA

利用台湾报道的ＷＳＢＶ的ＰＣＲ引物,成功地扩增出了１４００ｂｐ左右的中国对虾的杆状病毒的ＤＮＡ片段,与预计的产物长度吻合。该引物对经初步离心处理的病虾组织也能扩增出特异性ＤＮＡ条带,而对正常虾组织ＤＮＡ、昆虫杆状病毒（ＡｃＭＮＰＶ）ＤＮＡ进行扩增,均获得阴性结果。说明该引物的特异性较高,对中国对虾的杆状病毒的检测具有一定的实际应用价值。实验结果同时说明ＷＳＢＶ与中国对虾的杆状病毒有同源序列存在,具有一定的保守性;用该引物进行的ＰＣＲ扩增为中国对虾的杆状病毒与其他相关病毒的比较研究提供了一种技术手段。     

中国对虾血细胞中酚氧化酶活力研究

脊椎动物血淋巴中的酚氧化酶的研究已有大量资料，不少学者［４，７，８］认为黑色素的聚集与昆虫伤口愈合、结节形成及包被作用有联系，而黑色素的聚集则与昆虫血淋巴中的酚氧化酶及其底物相关。程振衡和梁子才［１］他发现在亚洲玉米螟血淋巴中的酚氧化酶可以粘附到酵母菌细胞表面。在水生无脊椎动物中，有关酚氧化酶的研究报道甚少，特别是对虾酚氧化酶的特性研究，还未见到这方面的有关资料。本文报道中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｓｉｓ）血淋巴中血细胞内的酚氧化酶的存在及各种因子对其活力特性的影响。１材料与方法１．１实验…     

病毒虾池底泥对对虾的影响试验

１９９３年全国暴发的对虾流行病，主要是由病毒病引起的，其传播速度之快，流行面之广，危害之大，前所未有①现已认识到，对虾病毒病是通过多种途径传播的。其中，虾池底泥是其传播途径之一。室内试验证实：病毒通过虾池底泥的传播．可使健康虾感染对虾肝胰腺小病毒病（ＨＰＶ）②鉴于病毒可通过底泥传播、扩散，危害养虾业。因而．如何采取有效措施，严格控制病毒传播，减轻对生态环境的威胁，并进而预防病毒的感染，是当前对虾养殖业的重要研究课题。１材料与方法１．１材料１．１．１对虾对虾于１９９３年７月１０日取自青岛流亭镇双埠…     

中国对虾气泡病的初步研究

气泡病一般发生在幼鱼和仔虾消化道及鳃丝中，导致鱼虾部分死亡。自Ｍａｒｓｈ和Ｇｏｒｉｈａｍ于１９０５年报道了鱼的气泡病后已有许多报道，但对于虾的气泡病报道较少。Ｌｉｇｈｔｎｅｒ，Ｄ．Ｖ．等报道过褐对虾（Ｐｅｎａｅｕｓ　ａｚｔｅｃｕｓ）蚤ＩＩ期幼体及稚虾的气泡病［６～９］。１９７９年著者进行中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓ　ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）摄饵量实验［４］过程中曾遇到仔虾消化道气泡病，致使仔虾漂浮在水面，死亡率较高（＞３０％）导致实验不能进行。为此笔者对中国对虾气泡病的成因及防治方法进行了初步研究并于１…     

对虾一种无包涵体杆状病毒病原的PCR检测

为建立对虾无包涵体杆状病毒的快速诊断技术,应用PCR技术分别对暴发性流行病发生前、流行中和发病后的对虾样品进行了检测.根据已克隆的对虾杆状病毒部分基因组序列而设计的引物能特异性地扩增出靶DNA片段,最低可以检测1pg的病素DNA.由典型发病症状对虾的胃、腮、肝胰腺、中肠、游泳足、肌内和心脏等器官和组织中成功地检测到病毒.不同组织和器官经扩增得到的信号强弱不同:病虾的胃扩增得到的信号最强,中肠、肌肉、心脏和游泳足次之,腮和肝胰腺信号最弱,说明病毒在不同组织和器官中数量及感染程度不同.在对虾发病前及发病后,用二次PCR还能检测表面不发病呈隐性感染状态的对虾携带的病毒;而对野生健康虾的检测结果为阴性.研究表明,PCR是检测对虾暴发性流行病快速、灵敏而准确的方法,对病毒病的早期诊断、防治和高健康对虾品种的选育具有指导意义.     

对虾疾病的研究现状与我国虾病泛滥的成因分析

近年来，世界对虾养殖业的发展和不断暴露出的问题已充分证实，疾病泛滥正在成为限制对虾养殖业发展的主要因素。因此，对虾疾病及其防治措施的深入研究将是今后很长时间里整个对虾养殖领域中最重要的课题之一。为了对有关研究工作的开展有所帮助，下面根据一些资料和我国虾病暴发的特点及作者的研究工作，就对虾疾病的总体情况作一概括性探讨，以抛砖引玉。ｌ对虾疾病的研究现状ｌ．血病因研究近年来，具有传染性的生物性病因（病原体）仍然是被关注的重点。而各种病原体中，研究最多、进展最快的属对虾病毒。到目前为止．国外报道的对虾病…     

爆发性流行病病原对中国对虾仔虾的人工感染实验研究

为了探讨暴发性流行病病原——中国对虾皮下及造血组织坏死杆状病毒(HHNBV)在仔虾阶段的传播途径和感染方式,同时为建立高健康无特异病原虾系统提供检测手段,探讨改善对虾苗种培育措施,为养成提供健康苗种,作者对中国对虾仔虾进行了暴发性流行病原人工投喂感染试验以及检测方法的研究。1　材料与方法1.1　试验材料1.1.1　病虾的来源　发病对虾来源于1994年山东青岛郊区患爆发性流行病虾池的对虾,并经过电镜切片观察确认为感染HHNBV。1.1.2　毒种分离　取发病的对虾头胸甲部分约200g,去掉甲壳和肝胰腺,剩余部分加入1×10-9溶液(NaCl24g/…     

对虾暴发性流行病及其预防研究

１９９３～１９９４年我国沿海养殖对虾发生了特大的暴发性流行病，损失惨重。本文报道该病的特点、症状及危害，并在患病的中国对虾、日本对虾、长毛对虾的中肠、肝胰腺的上皮细胞核和细胞质及腹肌纤维间质中发现大量具有囊膜的杆状病毒。通过病毒引起宿主靶组织细胞的病理变化、无包涵体等特性分析，认为该病毒属于有囊膜杆状病毒科Ｃ亚群，不同于已知的对虾所有杆状病毒，为对虾的一类新致病病毒。文中还分析了主要致病原因，通过调查和试验提出８条有针对性的预防措施。     

中国对虾疾病与免疫机制

疾病对于海水养殖对虾来说是一个严重的问题，在文献中有许多关于细菌、真菌、病毒、原生动物和寄生虫疾病的报道。但我们对于对虾病理，特别是病毒及与之有关的疾病病理，了解甚少。因而，对于某些疾病的预防和治疗缺乏有效地措施。对虾和其他甲壳动物一样，生活在一个具有潜在危害的病原体的水环境中。尽管有坚硬外壳的保护，可以抵御病原体的侵袭，但还需要有一种有效的内部防御网络来对付任何通过伤口或其它途径进入机体的各种病原体。对虾的防御主要通过循环血细胞的吞噬、包囊、凝集、溶力和凝固等作用来完成。在某些情况下，病原体能…     

中国对虾球形病毒的初步研究

用电子显微镜对中国对虾进行病毒的检测，发现一种新的球形病毒，这种病毒直径约８０～１００ｎｍ，具有包涵体，形态上有两种电子密度，球形病毒数量较多，分布在细胞质中，细胞核中没有发现，主要侵染对虾的肠、鳃、肌肉、肝胰腺等组织；宿主细胞的病理变化表现为内质网水肿，线粒体内嵴肿胀及局部溶解，酶原颗粒和粘蛋白原变性等；球形病毒与杆状病毒混合感染是对虾爆发流行病的主要病因     

中国对虾（Penaeuschinensis）杆状病毒的装配和包涵体形成过程研究

对中国对虾肝胰腺上皮细胞的透射电镜观察，发现杆状病毒可在对虾肝胰腺上皮细胞的细胞质内繁殖。增殖过程中在病毒发生基质表面及附近形成晶格状排列的包涵体，通过包涵体的形成、分化等过程，完成杆状病毒的装配。杆状病毒的装配过程似可分为５个时期：１．病毒发生基质形成期；２．未成熟包涵体期；３．成熟包涵体期；４．包涵体分化与病毒粒子装配期；５．侵染期     

唾液酸专一性凝集素的研究进展

人们是在近３０ａ来对凝集素进行广泛的研究的 ,在我国 ,则是在８０年代中期以后。而由于人们对无脊椎动物免疫学的认识普遍肤浅 ,制约了对其凝集素的研究 ,但是作为一种重要的体液免疫因子人们又迫切需要了解和利用它的功能。例如 :人们在进行重要的水产经济动物中国对虾的免疫功能研究时发现 :用弧菌诱导过的中国对虾 ,凝集素凝集活力明显增高 ,而在已发病的病虾体中的凝集素活力下降 ［１ ,２］。这一升一降说明凝集素在对虾开始受感染时 ,发挥着免疫防御作用 ,而当对虾已发病时 ,会随着整个免疫系统功能的下降而下降。这都说明凝集素与…     

用DAPI染色检出对虾肝胰腺细小样病毒

对虾肝胰腺细小样病毒（Ｈｅｐａｔｏｐａｎｃｒｅａｔｉｃ　ｐａｒｖｏ－ｌｉｋｅｖｉｒｕｓ,ＨＰＶ）病是我国流行较广泛的一种对虾病毒性疾病,发病时可使对虾在４～８周内累积死亡率达５０％～８０％,野生和养殖对虾均可患此病,但有些对虾从幼体阶段携带此病毒一直到成虾阶段也不死亡。对ＨＰＶ病毒的检出一般常用ＨＥ染色法和孚尔根染色法,在光学显微镜下观察细胞核内的病毒包涵体。或者用电子显微镜对可疑组织作超薄切片观察其病毒颗粒［１］。研究发现在组织切片中用ＤＡＰＩ（４,６－Ｄｉ－ａｍｉｄｉｎｏ－２－Ｐｈｅｎｖｌｉ…