运用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析方法对中国卤虫（Artemia）同工酶变异的研究

本文提出运用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法，对我国山东半岛几个盐场中的卤虫的十一种同工酶变异进行分析。其中三种同工酶，乳酸脱氢酶(LDH)，苹果酸脱氢酶(MDH)，以及四唑氧化酶(TO)，表现为多态酶，并且存在盐场内和盐场间的相对变异。该项技术将有助于基础科学的研究以及在水产养殖中用来筛选和辨别卤虫的不同品系。     

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析方法对中国卤虫(Artemia)同工酶变异的研究

本文提出运用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,对我国山东半岛几个盐场中的卤虫的十一种同工酶变异进行分析。其中三种同工酶,乳酸脱氢酶(LDH),苹果酸脱氢酶(MDH),以及四唑氧化酶(TO),表现为多态酶,并且存在盐场内和盐场间的相对变异。该项技术将有助于基础科学的研究以及在水产养殖中用来筛选和辨别卤虫的不同品系。     

澥浦大弹涂鱼群体生化遗传分析

于2004年4月,在浙江省宁波市镇海区澥浦滩涂采集野生大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)30尾,采用聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳方法,分析了乳酸脱氢酶(LDH)、甲酸脱氢酶(FDH)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、D-葡糖脱氢酶(GCDH)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、苹果酸酶(ME)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和酯酶(EST)等10种酶在大弹涂鱼肝脏组织中的表达,并对同工酶表型进行了生化遗传分析。实验结果表明,大弹涂鱼10种同工酶中除CAT外的另9种酶都得到了清晰的酶谱。该9种酶共记录了23个基因座位,筛选出LDH-1,FDH-1,G6PDH-1,ME-1,SOD-1,EST-1,EST-2,EST-3等8个多态基因座位。澥浦大弹涂鱼多态座位比例(P)为34.78%,平均杂合度(H)为0.0594,与其他海水鱼类相比,遗传多样性水平相对较低。     

新疆阿其克库勒湖和青海尕海卤虫生物学特性比较研究

从生物学测定、孵化质量、染色体倍性、繁殖方式等方面对产于新疆阿其克库勒湖和青海尕海两品系孤雌生殖卤虫(Artemia spp．)进行了对比研究。结果表明，阿其克库勒湖卤虫的生物学测定值明显高于青海尕海卤虫；两地卤虫加工卵的孵化率和孵化速率没有明显差异；尕海卤虫孵化效率高于阿其克库勒湖卤虫；两地卤虫的染色体倍性均以二倍体为主，其中阿其克库勒湖卤虫有三倍体存在，尕海卤虫有四倍体。两地卤虫的胚后发育速度相近。研究过程中未观察到阿其克库勒湖卤虫进行卵胎生。     

氨氮对不同发育阶段卤虫的急性毒性研究

国内有关卤虫生物学方面的报道很多[1,3],但未见氨氮对不同发育期的卤虫的急性毒性试验的报道,本文选用适合于海水养殖的卤虫(海南莺歌海卤虫)为试验对象进行试验,为我国的卤虫养殖提供一定的参考。1　材料和方法1.1　材料1.1.1　卤虫卵　1995年采自海南岛莺歌海盐场。1.1.2　人工海水　用无氨蒸馏水配制MBL人工海水,配方见Cavanauge,C.M.(1956)。1.2　方法1.2.1　卤虫卵的孵化　孵化方法参考文献[3],孵化的水温25℃,盐度为32.0,光照强度为1100lx。1.2.2　卤虫的培养　孵化后的卤虫幼体培养于5L的玻璃水槽中,培养液的pH值为7.69,盐度为6…     

中国对虾和日本对虾6种同工酶的比较研究

本文以中国对虾和日本对虾肌肉为材料,研究了机体内含有的乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶,谷氨酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、醇脱氢酶的相对活性和它们的绝对含量.通过对两种对虾这6种同工酶的比较,初步探讨了日本对虾耐干旱的能力比中国对虾强的机理.     

棱梭对饵料摄食与吸收利用研究

本文采用~(14)C标记技术测定棱梭幼体对褶皱臂尾轮虫、卤虫和亚心形扁藻等饵料的摄衾率、吸收率扣利用率,并以~3H-葡萄糖和~(14)-苯丙氨酸作示踪剂研究人工配合饵料中葡萄糖和氨基酸在棱梭体内转运和分布情况。结果表明,卤虫、褶皱臂尾轮虫都是棱梭幼体合适的饵料;氨基酸更多地参与了棱梭组织中的细胞代谢,而葡萄糖则是棱梭体内重要的能源物质。     

西北地区3个卤虫品系生物特性比较研究

对采自新疆鲸鱼湖卤虫 (Artemia sp.)、新疆艾比湖和青海尕海卤虫 (Artemiaparthenogenetica)的 3个品系的生物学进行了测定。研究了温度与孵化率之间的关系 ,以及盐度对鲸鱼湖卤虫孵化率的影响。观察了鲸鱼湖卤虫的染色体倍性组成。除壳厚外 ,鲸鱼湖卤虫卵的生物学测定值均大于另外 2品系卤虫 ;最佳孵化温度范围 :鲸鱼湖、艾比湖卤虫为 2 0℃ ,尕海卤虫为 2 5℃。鲸鱼湖卤虫卵的最佳孵化盐度范围是 2 8。鲸鱼湖卤虫为两性生殖 ,与孤雌生殖的艾比湖和尕海卤虫一样 ,染色体倍性组成为 2 n,染色体数为 2 n=4 2     

大弹涂鱼不同组织器官的同工酶研究

采用垂直聚丙烯酰胺平板电泳技术,对大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)的眼睛、心脏、肝脏、肌肉、脾脏和鳃等6种组织器官中的13种同工酶进行研究,并分析了其酶谱表型。结果表明,四唑氧化酶(TO)和酸性磷酸酶(ACP)没有检测到酶带;三梨醇脱氢酶(SDH)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)仅在肝脏中表达;超氧化物歧化酶(SOD)在所有组织中均存在,部分组织中存在差异;乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、苹果酸酶(MEP)、酯酶(EST)、醇脱氢酶(ADH)、D-葡萄糖脱氢酶(GcDH)、甲酸脱氢酶(FDH)、谷氨酸脱氢酶(GDH)则具有明显的组织特异性。     

卤虫等位酶的遗传控制

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析了孤雌生殖卤虫产生的罕见雄体、两性卤虫及其杂交后代 (F1)的酯酶 (EST)、超氧物歧化酶 (SOD)、过氧化物酶 (PRX)、碱性磷酸酶 (AL P)、四唑氧化酶(TO)和乳酸脱氢酶 (L DH)的同工酶酶谱表型。对编码 5种酶的 19个位点、35个等位基因的表达进行了遗传分析。结果表明 ,在 EST、PRX和 TO酶谱中既有共显性等位基因 ,又有沉默等位基因的表达 ;卤虫 PRX、AL P和 SOD为单体酶 ,在 EST和 TO酶谱中还存在着二聚体同工酶 ;除 LDH为单态外 ,其余 5种同工酶为多态酶。     

海洋微藻高度不饱和脂肪酸的硏究 Ⅲ,高度不饱和脂肪酸从海洋微藻向卤虫传递的研究

很多研究表明,n-3高度不饱和脂肪酸(n3-PUFA)是海洋动物,特别是其幼体生长发育所必需的营养成分,(Kanazawa et al.,1979; Levine et al.,1984)。很多海洋微藻中含有很高浓度的n3-PUFA,因此在水产养殖中,为了提高鱼、虾幼苗的成活率,增强幼体的体质,常用微藻来强化培养轮虫和卤虫,以提高其n3-PUFA的含量(赖户明1993;Ben-Amotz et al,,1987),为此我们选择了DHA含量比较高而EPA含量很低的金藻3011(Isochrysis galbana)、EPA含量较高而DHA含量很低的三角褐指藻2038(Pheaodactylum tricornutum)和小球藻(Chlorella sp.),研究了它们体内的EPA和DHA向卤虫传递的情况,同时用不含PUFA的面包酵母作对照,为水产养殖中进行卤虫的强化培养提供依据。     

Effect of carbon and nitrogen ratio control on Artemia growth,water quality,biofloc microbial diversity under high salinity and zero-water exchange culture condition

Biofloc technology has been applied successfully in the intensive aquaculture of several fish and shrimp species. The growth of heterotrophic microorganisms can be stimulated through adding extra carbon, which reduces the nitrogen level in the water and provides microbial protein to the animals. However, most of the studies and practical applications have been conducted in freshwater and marine environment. This paper focused on brine shrimp Artemia that lives in high salinity environment together with other halophilic or halotolerant microorganisms. The effect of carbon supplementation on Artemia growth, water quality, and microbial diversity of biofl ocs was studied in the closed culture condition without any water exchange. The salinity of the culture medium was 100. A 24-d culture trial was conducted through supplementing sucrose at carbon/nitrogen (C/N) ratio of 5, 15, and 30 (Su5, Su15, and Su30), respectively. The culture without adding sucrose was used as a control. Artemia was fed formulated feed at a feeding ration of 60% recommended feeding level. The results showed that sucrose supplementation at higher C/N ratio (15 and 30) signifi cantly improved the Artemia survival, growth and water quality ( P <0.05). Addition of sucrose at C/N ratio of 15 and 30 significantly increased biofloc volume (BFV)( P <0.05). The Illumina MiSeq sequencing analysis showed that supplementing carbon at C/N ratio of 15 had a better total bacterial diversity and richness, and shaped the microbial composition at genera level. This study should provide information for studying the mechanism of biofloc technology and its application in high salinity culture conditions.     

The critical stage for inducing oviparity and embryonic diapause in parthenogenetic Artemia(Crustacea: Anostraca): an experimental study

The brine shrimp Artemia exhibits two reproductive modes: 1) oviparity, producing diapause embryos;and 2) ovoviviparity, producing free-swimming nauplii. Previous studies have suggested the existence of a critical stage that determines the reproductive mode. Physicochemical factors, such as photoperiod, temperature, and salinity, have been suggested to irreversibly aff ect the reproductive mode of oocytes during this critical stage. In this study, experiments were carried out using a photoperiod and temperature-sensitive parthenogenetic Artemia clone where maternal Artemia were shifted bidirectionally between ovoviviparity (18 h L:6 h D, 27℃) and oviparity (6 h L:18 h D, 19℃) culture conditions. In the main experiment ( Artemia shifted at six diff erent stages including the post-larva Ⅱ to adult Ⅱ), the reproductive mode of fi rst brood was converted when shifting was performed on post-larva Ⅱ and Ⅲ but was not converted when females were shifted after post-larva Ⅲ. A supplementary experiment further revealed that the reproductive mode of fi rst brood could be altered when shifting females at an "early phase of postlarva Ⅳ", characterized by a developing ovisac reaching the middle of the third abdominal segment, ventral spines, and some oocytes growing larger than the others. In both experiments, reproductive modes of the second brood were signifi cantly aff ected when the shifting was performed on post-larva Ⅳ. These results suggest that the critical stage for inducing oviparity and embryonic diapause is at the previtellogenic stage of oocytes, or at maternal "early phase of post-larva Ⅳ" for the first-brood off spring. During this stage, diff erential gene expression patterns of the two destined oocytes may be triggered by the token stimuli signals received by the oocytes.     

氨氮对我国不同产地卤虫的急性毒性试验

采用静水生物试验法测定了ＮＨ３－Ｎ对我国新疆艾比湖（ＡＢ），青海柯柯湖（ＫＫ），海南莺歌海（ＹＧＨ），山东埕口（ＣＫ）产地卤虫的初孵无节幼虫，拟成虫及成体的急性毒性试验。结果表明：１．不同发育阶段的卤虫对氨氮的耐受力是：成虫＞初孵无节幼虫＞拟成虫＞。２．不同产地卤虫对氨氮的耐受力有一定的差异，ＡＢ、ＫＫ、ＣＫ产地的卤虫对氨氮的耐受力均高于ＹＧＨ产卤虫。     

基于转录组数据的青蛤微卫星标记开发与验证

本研究利用青蛤(Cyclina sinensis)的转录组信息开发微卫星标记,共获得12418个微卫星位点。其中单核苷酸重复次数最多,共8422个,占比67.08%;其次是三核苷酸重复,共1501个,占比12.09%;双核苷酸的重复有1419个,占比11.43%。在所有重复单元类型中,A/T重复出现频率最高,占单核苷酸重复的48.75%。随机选取81对引物进行微卫星标记验证,最终获得27个具有多态性的微卫星标记。对30个青蛤进行多态性位点检测和评价,共扩增到等位基因99个,每个位点的等位基因数Na为2~6个,期望杂合度He为0.0333~0.8085,观测杂合度Ho为0.0000~0.6786,多态信息含量(PIC)为0.0323~0.7645,有19个位点显著偏离Hardy-Weinberg平衡(p<0.01)。本研究开发的微卫星标记为青蛤的分子遗传学研究、种质鉴定和自然种群资源保护等研究提供了基础数据。     

不同地理品系卤虫的同工酶变异初步研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，对国内外不同生态地区的孤雌生殖和两性生殖卤虫进行了酯酶（ＥＳＴ）、四唑氧化酶（ＴＯ）和碱性磷酸酶（ＡＬＰ）同工酶变异分析。指出不同地理品系卤虫有其独特的ＥＳＴ和ＴＯ标志酶带；孤雌生殖卤虫具有与两性生殖卤虫显著不同的ＴＯ基本带型和ＡＬＰ标志带区。这些结果为卤虫地理品系的纯度鉴定，以及两种生殖方式卤虫的分类和鉴别提供了生化指标。     

火腿许水蚤对牙鲆仔稚鱼成活、生长及脂肪酸组成的影响

在分析火腿许水蚤、卤虫无节幼体及轮虫这3种饵料生物脂肪酸组成的基础上,研究它们对牙鲆仔稚鱼存活、生长及脂肪酸组成的影响。结果表明:火腿许水蚤体内3种高度不饱和脂肪酸(ARA,EPA,DHA)总量为34.18%,明显高于其它2种动物的含量(卤虫无节幼体4.67%;小球藻强化轮虫9.39%)。投喂火腿许水蚤的仔鱼成活率极显著高于投喂卤虫无节幼体的仔鱼,与投喂混合饵料(卤虫无节幼体和火腿许水蚤按比例混合)的仔鱼存活率差异较显著;其全长增长倍数和增重倍数极显著高于投喂卤虫无节幼体和混合饵料的仔鱼。投喂火腿许水蚤的稚鱼成活率显著高于投喂卤虫无节幼体的稚鱼,与投喂混合饵料的稚鱼存活率差异不显著;其全长增长倍数和增重倍数极显著高于投喂卤虫无节幼体和混合饵料的稚鱼。投火腿许水蚤的仔稚鱼体内ARA、EPA、DHA的含量明显高于投喂混合饵料的和投喂卤虫无节幼体的仔稚鱼。     

长江中华鲟遗传多样性变化

采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对2000年共30尾长江中华鲟(Acipenser sinensis)幼鲟遗传多样性进行了分析。共用40个10bp长的随机引物,在25个可分析的引物中,只有OPK01,OPK02,OPK03,OPK09和OPK14RAPD-PCR产物有多态现象,多态引物占20%。25个引物共扩增出101条稳定的DNA带。其中12条为多态带,多态座位比例为9.9%。香农遗传多样性指数(H0)为2.6332,遗传多样性指数(H)为0.0261,遗传相似性指数平均为0.9824,遗传距离平均为0.0176。其遗传多样性明显低于葛洲坝截流以前。