坛紫菜配子体离体细胞发育研究

本文以坛紫菜(Porphyra haitanensis Chang et Zheng)雌雄配子体为材料,酶解得到单细胞并再生培养,研究雌雄配子体体细胞发育途径以及不同部位(根丝段、基部、中部、顶部、成熟区)单细胞发育途径.结果表明,坛紫菜雌雄配子体体细胞发育途径大致相同,但存在一定差异,表现为雌性配子体体细胞发育成果孢子囊,少数体细胞直接发育成类孢子囊枝;而雄性配子体体细胞发育成精子囊,并能释放精子,极少数体细胞发育成类果孢子囊.单细胞再生研究显示,配子体体细胞发育方向受细胞所处部位影响,不同部位体细胞由于其分化程度不同,发育成不同类型的再生体.随着细胞所在藻体部位的上移,正常叶状体和根丝细胞叶状体比例均下降,畸形叶状体的比例下降或无明显差异,丝状体的比例逐渐增加.     

坛紫菜单性叶状体细胞的发育研究

研究采用雌雄营养组织块和营养细胞进行培养,以了解坛紫菜单性营养细胞的生长发育情况.结果表明,坛紫菜雌性营养细胞无论在组织水平还是在细胞水平均以产生红色果胞或果孢子细胞为主,有少量细胞发育成精子囊,并放散精子.雄性营养组织和营养细胞以产生精子为主,但不能再分化成丝状体;产生的少量果孢子细胞能发育成丝状体.因此,在室内培养条件下,坛紫菜单性叶状体都能产生两性细胞,它们的差异只是不同性细胞所占的优势不同,并讨论了单性叶状体的产生.     

温度、光强和盐度对坛紫菜体细胞发育的影响

坛紫菜Porphyra haitanensis叶状体酶解单离体细胞发育的最适温度为25℃。在10—25℃范围内,随着温度增高,体细胞发育成正常苗的百分率增高,苗生长加快,苗的假根数目增多。体细胞发育适宜的光强为2000—3000lx,过高或过低的光强均会抑制苗假根形成和生长,导致正常苗数量减少。体细胞发育和苗生长最适盐度为33.3,但在20.3—46.4范围内,盐度越高,发育成正常苗百分率越高。     

坛紫菜与条斑紫菜轮栽试验

于1987—1989年利用人工培苗和潮间带栽培方法进行了坛紫菜和条斑紫菜轮栽试验。结果表明,用加大育苗室的采光面积、保温和缩短光照时间促熟措施,可使坛紫菜丝状体在8月初开始大量放散壳孢子,8—9月中旬采壳孢子苗,采苗后约35天开始采收紫菜,至12月初结束。9月中旬采苗的,亩产干品83.3kg。条斑紫菜丝状体按常规法育苗,于10月中旬采壳孢子苗,先在海上密挂育苗,至11月底取下坛紫菜网,将条斑网分挂到坛紫菜架上,进行了两种紫菜的轮换栽培,直至翌年5月初结束,亩产干品120.1kg。两种紫菜总产量达203.4kg,比单作增产近一倍。     

不同培养条件对坛紫菜叶状体体细胞发育分化影响的研究

本文以野生坛紫菜(Porphyra hatanensis)叶状体为材料,通过海螺酶酶解获得叶状体单离体细胞,探讨了细胞密度、光照强度对坛紫菜叶状体体细胞发育分化的影响.研究结果表明:细胞密度对坛紫菜叶状体单离体细胞的分裂、出苗具有明显的影响.其中,细胞培养3～5d时,分裂率随着细胞密度的增大而降低;5d时,1×103个/孔组的分裂速度显著大于其余各组的(p＜0.05);12～19d时,随着细胞密度的增大,体细胞出苗率相应减小.光照强度对坛紫菜叶状体单离体细胞的分裂、出苗也具有显著影响.细胞培养5d时,分裂率随着光照强度的增大而增大;5-7d时,体细胞分裂速度随着光照强度增大而增大;9～19d培养期内,出苗率随着光照强度的增大而增大.本实验结果为坛紫菜转基因育种等研究提供了可资借鉴的基础资料.     

坛紫菜叶状体体细胞对抗生素敏感性的研究

坛紫菜(Porphyrahaitanensis)叶状体体细胞对氨苄青霉素有很强的耐受性,但氨苄青霉素对体细胞分裂、分化具有明显的抑制作用,导致更多的体细胞分化形成细胞团,并能抑制叶状体假根的形成.坛紫菜叶状体体细胞对氯霉素敏感,100μg/cm3和800μg/cm3组的体细胞分别于培养的12、10d全部死亡.本试验结果初步表明,氯霉素可作为坛紫菜基因工程的有效选择压力.     

紫菜体细胞发育与分化的研究

本文研究了紫菜体细胞的发育与分化。根据体细胞后代的形状、有无假根、颜色、色素体形状、细胞大小和排列方式以及最终分化趋势等,墰紫菜体细胞分8种发育类型。各种发育类型的百分数与藻体的日龄、大小及部位有关。日龄、体长越长,正常苗百分数越低,畸形苗和细胞团的百分数越高。随着藻体部位的上移,正常苗和畸形苗百分数下降,细胞团百分数上升。     

紫菜细胞悬浮培养

用酶解技术获得条斑紫菜离体细胞并对其进行细胞悬浮培养研究;对藻休不同部位的细胞分化发育方式,不同悬浮器具培养效果及不同起始培养的细胞密度进行了探索。结果表明:用气升式生物反应器培养细胞效果最佳,起始培养的细胞密度可达l×10~5细胞/ml,细胞存活率达85%。     

外界因素对条斑紫菜体细胞分化发育的影响——Ⅰ. 温度、光强实验

本实验利用酶解技术得到单个体细胞,较详细地研究了不同温度、光照强度对体细胞分化发育的影响,从而确定出体细胞培养的最佳条件,为进一步利用条斑紫菜体细胞育苗这一新技术打下了基础。     

PRELIMINARY REPORT ON SUSPENSION CULTURE OF CLON OF PORPHYRA YEZOENSIS CONCHOSPORANGIAL FILAMENTS IN THE PRODUCTION OF CONCHOSPORES FOR PURPLE LAVER AQUACULTURE

InSpringof1990,carposporesofboyeamsiswerecollected,gendnatedandgrewuptothefree-livingConchocelis,whichproducedconchosporangialfilaments.Allexperimentswereconductedincultureboxeswithlightandtemperaturecontrol.Theresultsofanumberofexperimentsareasfollows:1.Afterthedevelopmentofconcho-sporangialfilamellts,theycanbecultivatedalone,andnormallydevelopanddischargealargenumberofconchospores.2.Thesuspensionconchosporangialfilamentusedinpresentworkhavebeenvegetativelypropapatedmanytimesinseveralyears.…     

苜蓿组织培养体细胞胚发生的细胞学观察

苜蓿无菌苗下胚轴在含２ｍｇ／Ｌ２．４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ的ＭＳ培养基中诱导出愈伤组织，愈伤组织在含有３ｍｇ／ＬＮＡＡ和１．５ｍｇ／ＬＫＴ的ＳＨ培养基中形成胚性愈伤组织，并伴随有体细胞胚的发生。显微观察表明：体细胞胚起源于单个的胚性细胞，它既能在愈伤组织内部发生，又可在其表面发生。体细胞胚经过球形、心形、鱼雷形及子叶胚各阶段可形成再生植株，这为在细胞水平上对苜蓿进行遗传操作及苜蓿品种的改良成为可能。     

紫菜胶与紫菜琼胶

研究了坛紫菜所含多糖的年率、性质和组成。用水直接提取的多糖产率为５．４５～６．８９％，无凝固性，含ＳＯ４１２．７３～１４．０８％，含３，６－ＡＧ９．９８～１２．１２％。经碱处理后提取的多糖产率为４．９～９．５％，最高的达１９．１％，它能形成很好的凝胶，其凝胶强度达７５０～１１００ｇ／ｃｍ＾２，含ＳＯ４０．２０～０．７５％，含３，６－ＡＧ４０．２８～４３．０４％，它的红外光谱和＾１３Ｃ－ＮＭＲ波谱与     

苯并(a)芘对紫菜(Porphyra)的致突变效应

苯并(a)芘(Benzo(a)pyrene)是石油组份中的一种重要的具致癌作用的多环芳香烃化合物。由于燃烧和石油污染等多种原因,在大气、水体和海洋中都能检出它的存在,特别是在海洋中,这种化合物有的沉积于沉积物中,有的被生物体吸收,有的附着在生物体上,有的存在于水体中,因而构成了海洋中一类特殊的污染物。特别引起科学家注意的是这物种质可为某些海洋生物所富集或贮存,并经食物链而最后进入人体。     

螺旋藻藻蓝蛋白对人血癌细胞株HL-60,K-562和U-937的生长影响

运用半固体琼脂培养法和ＭＴＴ检测法测定了螺旋藻藻草稿的地人血癌细胞株ＨＬ－６０,Ｋ－５６２和Ｕ－９３７生长的影响。体外培养条件下用不同浓度的螺旋藻藻蓝蛋白处理这３种肿瘤细胞,结果显示螺旋藻藻蓝蛋白对这三种肿瘤细胞均有不同程度的抑制作用,并存在浓度剂量效应,高浓度抑制作用强。