褐藻酸降解菌引起海带病烂的组织学研究

多年来 ,科技工作者为解决海带 (Ｌａｍｉｎａｒｉａｊａｐｏｎｉｃａ)病烂［１］问题作了大量的工作,从中不难看出 ,海带的病烂是由多方面引起的 ,致病的原因也非常复杂 ,其中微生物作用是不可忽视的重要因素之一。陈等１９８１ ,１９８４年通过一系列研究表明 ,褐藻酸降解菌是海带藻体上的主要附生细菌 ,而且在特定条件下参与海带的腐烂过程 ,导致烂苗或掉苗。本实验用褐藻酸降解菌对正常海带进行人为感染 ,通过组织显微切片观察 ,比较感染海带各组织内细胞结构的变化 ,以及感染菌存在的位置、菌量的多少等 ,褐藻酸降解菌对海带组织的…     

褐藻酸降解菌的研究——Ⅰ.褐藻酸降解菌与褐藻酸酶对海带藻体的作用

早在1934年,Waksman就已经从海水和海底沉积物中以及藻体上分别分离到能降解褐藻酸的细菌。在《伯吉细菌鉴定手册》中曾经把具有降解褐藻酸能力的假单胞菌组成藻酸单胞菌属(A1ginomonas),其中多数种来源于海洋。后来,由于这个属的描述特征与某些属的界限不够清楚,在《伯吉细菌鉴定手册》第八版中又取消了这个属的名称,并据所属种的生理生化特征分别归人有关的属。这种混乱现象说明过去对这一生理类群细     

褐藻酸降解菌的研究——Ⅲ.海带育苗系统中脱苗和烂苗原因分析及其预防措施

海带人工育苗工作是发展海带栽培事业的一个重要环节,在人工控制的循环海水系统中,确保大量密集海带幼苗的正常生长乃是一项复杂的任务,其中病害问题尤为重要。近年来,全国不少育苗单位在育苗过程中普遍发生脱苗和烂苗现象,时常影响正常供苗。在严重的情况下,可以发展成为毁灭性灾难,甚至使整个育苗工作完全失败,往往因为苗源不足给海带栽培事业的发展带来损失。本研究工作的前两篇报告阐述了褐藻酸降解菌是海带藻体上的主要定居者和优势菌群,即使在不附加任何其他营养的条件下,这     

环境因子对褐藻酸降解菌引起海带病烂影响研究

海带在育苗和养殖过程中常有病烂发生,造成很大经济损失.病烂出现时通常伴生有褐藻酸降解菌的大量繁殖.将接种褐藻酸降解菌而引起病烂的海带切片、镜检,观察到细菌开始侵入海带表面的分生组织,然后进入外皮层、内皮层和髓部.还观察到在细胞间隙有大量细菌存在,许多藻细胞游离,部分游离细胞的细胞壁破损,因而导致组织崩溃、变软.褐藻酸降解菌是海带藻体上的主要附生细菌,在正常情况下并不造成危害.试验表明,在藻体表面损伤、过于密植、水温较高等不利条件下,藻体抗病能力下降,褐藻酸降解菌有机会大量增殖,病烂也就发生.因此,由于多种原因引起的育苗系统生态环境不良,是诱发病烂的主要原因.     

褐藻酸降解菌在海带绿烂病发生中的作用

从海带幼苗上病烂明显处分离得到 2 3株褐藻酸降解菌 ,并对其菌落形态、细胞形态及革兰氏染色反应等进行了观察。通过对褐藻酸钠的降解实验 ,筛选出 4株具较高降解能力的菌株。感染实验表明 ,分离到的褐藻酸降解菌为海带幼苗病烂的主要病原菌。     

褐藻酸降解菌的研究 Ⅳ.褐藻酸降解菌在海带栽培区中的生态分布及其重要性

按月分析栽培区海水和海带藻体样品中异养细菌总量和褐藻酸降解菌数量,其结果表明,栽培区中褐藻酸降解菌数量与异养细菌总量的比值波动为30—80％,两者的数量高峰同步出现在海带生长期内。随着海带生长期的推进,不同类型的褐藻酸降解菌交替出现。生理生化试验结果证明,绝大多数褐藻酸降解菌能利用各种有机物。来自海带的分离株中,降解原油的菌株百分数可高达84％。这些微生物在促进栽培区海水油污净化和有效营养再生等方面起积极作用。     

褐藻酸降解菌侵染海带过程的超微结构观察

首次研究了褐藻酸降解菌侵入海带的途径，通过电镜观察，跟踪研究了褐藻酸降解菌染海带过程中海带表皮细胞壁的超微结构变化。结果表明，褐藻酸降解侵染海带的过程是首先引起海带表皮细胞壁藻胶层表面的破坏，然后引起藻胶层的断裂，并使藻胶层逐渐降解变突，最后褐藻酸降解菌通过海带细胞的壁藻胶层的断裂变突处进入海带细胞内。     

褐藻酸降解菌对海带感染能力差异性分析

对分离得到的5株褐藻酸降解菌进行了感染海带的实验，确定5株菌均为海带病烂的致病菌。对其降解能力和感染能力的实验表明，5株菌对褐藻酸钠的降解能力存在差异，它们对海带感染能力的差异与其对褐藻酸钠的降解情况相类似，在褐藻酸降解菌的感染下，海带光合速率下降，感染能力强的菌株对光合作用的影响明显大于感染能力弱的菌株。     

海带多酚的产生与抗褐藻酸降解菌感染的相关性

利用生物化学的方法探讨了褐藻酸降解菌感染过程中海带体内多酚含量的变化 ,并分析了多酚含量的高低与海带对褐藻酸降解菌感染抗性的相关性。研究结果表明 :褐藻酸降解菌感染下海带体内多酚含量急剧上升 ,并且这种变化具有普遍性 ;多酚含量的急剧上升只发生在褐藻酸降解菌感染的初期阶段 ;海带体内多酚含量的高低与海带对褐藻酸降解菌的抗性具有明显的相关性。表明多酚类化合物在海带抵抗褐藻酸降解菌的感染中起重要作用     

培育海带夏苗新方法的初步实验

植物生长激素对藻类有种种不同的影响,Provasoli等(1974)对此曾做了综述。Dawes(1971)用IAA处理Caulerpa Prolifera,发现低浓度有促进生长发育的作用,而较高浓度则有抑制生长发育的作用。我们在进行4—碘苯氧乙酸(4—IPOAA)对海带配子体和幼孢子体生长发育作用的研究时发现:高剂量的4—IPOAA(500mg/L)对配子体的发育有着明显的抑制作用,配子体长期不能产生配子,但是,一旦解除4—IPOAA的抑制后,配子体在短期内就能进行正常的排卵、排精和受精,长出孢子体。低温、自然光、流水培育海带夏苗,是我国独创的海藻苗种生产方式,经过廿多年的实     

北方用维尼纶苗帘培育海带夏苗的实验研究

根据南方和北方海带夏苗培育采用苗帘苗绳差异,在山东烟台国家级海带良种场海带育苗基地进行两种夏苗培育工艺的实验研究。在同一个育苗车间内,利用种海带采集游孢子并附苗,跟踪观测维尼纶苗帘和棕绳苗帘对海带育苗期间配子体发育、孢子体(幼苗)生长的影响,并比较两种不同苗帘育苗成本差异。结果显示:相同育苗条件下,维尼纶苗帘采苗后,配子体发育速度、孢子体形成速度显著优于棕绳苗帘上的配子体和孢子体;转化孢子体后,在育苗第15~31天时间内,维尼纶苗帘海带幼苗相对生长速率(RGR)显著大于棕绳苗帘幼苗(P0.05);维尼纶苗帘幼苗经55天培育,幼苗平均长度长至1.53 cm±0.13 cm,达到出库下海暂养规格,此时棕绳帘幼苗平均长度约0.47 cm±0.03cm。至70天,棕绳苗帘幼苗平均长度约1.78 cm±0.19 cm,维尼纶绳苗帘幼苗平均长度达7.87 cm±1.35cm,显著大于棕绳苗帘幼苗。采用维尼纶苗帘育苗,每1m3育苗水体育苗量约为60万株,综合育苗成本约为23元/万株,采用棕绳苗帘育苗,每1m~3育苗水体育苗量约40万株,综合育苗成本约为31元/万株。综上所述,北方采用维尼纶帘进行海带育苗在生产上具有可行性,并且可降低生产成本约25.8%。     

褐藻酸降解菌侵染海带过程中活性氧及抗氧化系统的变化

本文以褐藻酸降解菌为病原体研究褐藻酸降解菌侵染海带的小孢子体不同时期体内的活性氧——超氧负离子自由基 (O-·2 )、超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)、抗坏血酸过氧化物酶 (APX)和抗坏血酸 (ASA)等的变化。实验结果表明 :海带活性氧 (O-·2 )含量在褐藻酸降解菌感染初期表现为升高 ,随后表现为下降。并且 ,随着褐藻酸降解菌侵染浓度的升高 ,活性氧 (O-·2 )含量呈现上升趋势 ,推测活性氧 (O-·2 )是海带抗褐藻酸降解菌感染的有效防御手段之一。SOD,CAT,ASA在感染的初期起着积极的抵抗褐藻酸降解菌感染的作用 ;APX在褐藻酸降解菌感染的前期没有发挥其抗感染的作用 ,而是在后期显示出了一定的抗感染作用。此结果可为海带病害的机理及幼苗集约化培养过程中病害的防治提供科学的依据。     

褐藻酸降解菌感染海带过程中几种酶的作用比较

采用植物单细胞和原生质体游离的方法,研究了5株褐藻酸降解菌感染过程中海带细胞壁的组成成分——褐藻酸的变化。结果表明,海带在5株褐藻酸降解菌感染的初期(前3 d),褐藻酸酶对其单细胞和原生质体的游离率均显著降低,而且随着感染时间的延长,游离率的下降越加明显。3 d过后,随着感染的继续进行,单细胞和原生质体的游离率变化不再明显。表明海带细胞壁组成对褐藻酸降解菌感染发生了响应性变化,而这种变化仅仅发生在褐藻酸降解菌感染的早期阶段。研究结果进一步显示,褐藻酸降解菌感染过程中海带细胞壁组成的变化主要体现在褐藻酸的变化上。     

褐藻酸降解菌的生长条件及其对海带的生理效应

为更好地了解海带病烂的发生机制,针对褐藻酸降解菌埃氏交替单胞菌（Altermonas espejiana）菌株A1的生长及产酶条件进行了初步研究,并用不同浓度的菌液对健康海带进行了感染试验,测定了其体内可溶性蛋白质和可溶性糖含量的变化。结果表明,该菌株生长和产酶的最适条件为：20℃,0．5％～0．6％褐藻酸钠,pH=7,5,氮源为（NH4）2S04,培养时间72h。此外,感染菌株A1后,海带体内可溶性蛋白质和可溶性糖的含量均增加,且随着感染菌液浓度的升高,海带体内可溶性蛋白质含量升高,而可溶性糖含量先升高后降低。     

海带对褐藻酸降解菌的抗性与其SOD活性的相关性

运用生物化学的方法测试了2个品系的海带对褐藻酸降解菌抗性的差异性，并对其SOD活性的高低进行了研究。结果表明，海带荣成1号（简称NO.1）对褐藻酸降解菌的抗性远远高于海带901（简称901）；海带荣成1号细胞内超氧化物歧化酶（SOD）的活性明显高于海带901，二者显著正相关。说明海带SOD活性的高低与其对褐藻酸降解菌的抗性大小有一定的相关性。     

改进的海带夏苗培育法研究——三论海带育苗系统中脱苗和烂苗原因分析及其预防措施

我国常规的海带夏苗培育法,培育期比较长,成本较高,容易导致幼苗病烂。我们根据海带类在极地低温下能渡过漫长极夜的生态特性,改革了五十年代推广、沿用至今的夏苗培育法,即将生长良好的配子体贮存在0°～-2℃低温、无光、静水条件下,在出库下海前约70天将贮存的配子体恢复到常规夏苗培育条件时,便正常地生长发育为生产上所需要的健康     

改进的海带夏苗培育法研究——再论育苗系统中脱苗烂苗的原因及其预防措施

用现行的海带夏苗培育法,自采孢子到培育成1—3公分的幼苗,约70天就够了。因当时海面水温尚未降到19℃以下,不适于幼苗生长,不能出库下海,必须在育苗库中再“多培育”一段时间。在我国,愈是南方,其“多培育期”愈长,例如在福建省就要“多培育”120天。而现行育苗库中的培育条件又不能满足幼苗在“多培育期”继续健康旺盛地大量生长,所以采孢子后,用较弱光强,较低温度等方法抑制生长,以防止幼苗生长过速过大。达样不仅成本高,管理麻烦,甚至导致幼苗罹病腐烂,脱苗烂苗。     

海带中褐藻酸盐组成的研究

将海带(Laminaria japonica)进行蒸馏水沥洗和晾干处理,定量测定海带中褐藻酸及其结合的金属元素的含量。结果表明:海带中的褐藻酸是以多种褐藻酸盐的形式存在,海带中的褐藻酸盐主要是由褐藻酸镁、钾、钠、钙、锂、硼和锶等组成(占褐藻酸盐总量的96.96％)。本文提出了海带中各种褐藻酸盐的含量以及海带对海水中各种金属元素的富集倍数。     

褐藻酸降解菌的产酶条件研究

以海带病烂处分离到的别单胞菌属（Alkteromonas)的褐藻酸降解菌菌株A1为研究对象，在该菌的产酶条件进行了研究。结果表明，产酶的最适温度20℃，褐藻酸钠浓度（质量分数）0．5％－0．6％，pH7.5，盐度15，氮源为（NH4)2SO4，培养时间72h。     

海藻工具酶研究I.褐藻酸降解菌的分离鉴定及其褐藻酸酶形成条件研究

海带、裙带菜病烂处分离得到５株褐藻酸降解菌，经鉴定属于埃氏交替单胞菌（Ａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓｅｓｐｅｊｉａｎａ）（菌株Ａ１０１、Ａ１０２，Ａ１０３、Ａ１０５）、麦氏交替单胞菌（Ａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓｍａｃｌｅｏｄｉｉ）（菌株Ａ１０４）．菌株Ａ１０２发酵培养时，褐藻酸形成条件的研究表明，培养基含０．３％～０．６％的褐藻酸钠，０．５％的蛋白胨，ｐＨ７．５，装量为５００ｃｍ３三角瓶装２００ｃｍ３培养基，在２５℃下培养１４４ｈ较为适宜。