''''93中国对虾流行性肝胰腺坏死综合症研究 Ⅰ.病毒和类支原体合并感染对虾肝胰腺

本文首次报道今年浙江省对虾大范围流行性肝胰腺坏死综合症及患病对虾肝胰腺组织中类支原体与病毒的合并感染。     

养殖对虾暴发性流行病—中国对虾肝胰腺坏死病研究

1993年我国沿海各省市养殖对虾发生了暴发性流行病,造成了极大的损失。本文报导我们在浙江省舟山市调查和研究的结果,发现肝胰腺坏死杆状病毒和弧菌并发感染是引起对虾死亡的主要原因。     

中国对虾肝胰腺细小病毒的纯化与鉴定

于１９９１年９月－１９９３年底，利用在青岛市沙子口对虾养殖场采采的中国对虾病虾肝胰腺样品，采用一种改进的酒石酸钾－甘油密度梯度离心法，对原先称之为肝胰腺细小样病毒的一种对虾病毒进行纯化。通过电子显微镜观察，提取病毒核酸用不同核酸酶处理并结合电泳等方法，对病毒的基本生物物理和生物化学特性作鉴定，结果表明，用酒石酸钾－甘油密度梯度离心法，可获得良好的病毒纯化效果；纯化后的病毒颗粒显示正二十面体立体对称     

中国对虾肝胰腺细小病毒感染的免疫病理学研究

于１９９２－１９９３年,用兔抗对虾肝胰腺细小病毒ＩｇＧ和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔ＩｇＧ建立免疫组织病理检测技术,并用来肝胰腺小病毒感染和中国对虾肝胰腺组织作病理学分析,该方法利用抗原－抗体之间特异性结合的特点,首先令兔抗肝胰腺细小病毒抗体与相应的病毒成分结合,然后以酶标记的羊抗兔免疫球蛋白抗体与已结合到病毒上的抗体作用,并通过酶显色反应,揭示病毒和相应病变结构的存在,结果显示,免疫酶染色技术将病     

中国对虾中一种与肝胰腺细小病毒混合感染的呼肠孤病毒的初步鉴定

于１９９１年９月在青岛市沙子口镇对虾养殖场采集中国对虾病虾，采用酒石酸钾－甘油密度梯度离心法从病虾肝胰腺中分离出一种呼肠孤科病毒，并通过电子显微镜观察和提取分析病毒基因组核酸等方法初步鉴定，结果显示，该病毒在酒石酸钾－甘油密度梯度离心纯化时与肝胰腺细小病毒混合存在，病毒颗粒为有包膜的正二十面体立体对称结构；带包膜的完整颗粒直径在６４－６６ｎｍ；裸露核衣壳平均直径为５３．２ｎｍ，病毒基因组由分成１０     

凡纳滨对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)研究进展

自2009年以来,一种新兴的虾类疾病－急性肝胰脏坏死病(AHPND),对全球对虾养殖业造成了巨大的损失。已有研究表明,该病病原是一类含有特殊毒力因子的弧菌,主要是副溶血性弧菌(VPAHPND)。本文将从该病的发生与流行、病原、检测方法、防控措施等方面的最新研究成果进行阶段性的总结,以期为该病症的防控技术提供参考。     

中国对虾(Penaeus chinensis)肝胰腺上皮细胞质中杆状病毒增殖的电镜观察

对中国对虾肝胰腺上皮细胞进行透射电镜观察。指出：对虾杆状病毒可在肝胰腺上皮细胞的胞质内增殖，与以细胞核内形成包涵体为特征的增殖方式明显不同。溶酶体在增殖过程中内吞濒临解体的线粒体和病原体，利用线粒体内嵴提供的能量，有规律地组装成杆状病毒的包涵体。这一结果为探讨对虾暴发大面积死亡的病因分析提供了新的途径。     

对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)流行病学、诊断方法及防控措施的研究进展

自2009年以来,一种新兴的虾类疾病——急性肝胰腺坏死病(AHPND),对全球对虾养殖业造成了巨大的损失.已有研究表明,该病病原是一类含有特殊毒力因子的弧菌,主要是副溶血性弧菌(VPAHPND).根据已发表的文献对该病的发生、流行、病症、病原、检测方法和防控措施等方面进行阶段性的总结,以期为该病症的防控技术提供参考.     

赤潮异弯藻对中国对虾感染白斑综合症病毒的影响

白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)是近年来危害我国乃至世界对虾养殖业的主要流行病原[1-4].WSSV病毒暴发流行范围广、致病性强,自出现以来给对虾养殖业造成了巨大的损失.对虾病毒病的发生是对虾自身的健康状况、病原生物,以及环境条件等各种因素综合作用的结果,外界环境因子或者内环境的变化会引起对虾机体抵抗力下降,从而易受病原生物的感染而发病;同时病原生物的侵入又使机体免疫能力下降而更易受环境因子的胁迫导致疾病突发,因此研究环境因子对病原生物以及对虾抗病力的影响是确保养殖业健康发展的重要环节.     

中国对虾暴发性流行病病原体研究Ⅱ. 病原体的分离纯化

本文利用不同地区典型病虾的头胸部和肝胰腺,通过差速和超速离心,进行了病原体的分离纯化.结果表明,各地样品提纯后,均可见大量杆状病毒,其长度为380-410nm,直径为90-100nm,与组织切片所观察到的病毒颗粒相比,其长度较大,而直径较小.感染实验结果表明,该种病毒是造成中国对虾暴发性流行病的病原体.     

中国对虾卵细胞中病毒的初步研究

对中国对虾卵巢和受精卵细胞进行了电子显微镜超微结构观察，发现卵巢内有球状病毒粒子，大小为80nm左右。受精卵细胞内有传染性皮下和造血组织坏死病毒（IHHNV）感染，其严重影响对虾受精卵的发育，从获得的结果来看，中国对虾病毒（IHHNV）垂直传播的可能性极大。     

中国对虾人工诱导雌核发育的研究：II.紫外线辐射对精子顶体反应和受精…

研究了３６５ｎｍ波长紫外线辐射中国对虾精子对其顶体反应和受精能力的影响，结果表明，低剂量上线辐射促进精子发生顶体反应，大剂量辐射使精子失发生顶体反应的生理机能并死亡，３６５ｎｍ波长紫外线能够透过精英和纳精覆盖，对其内精子起到杀伤作用，精液稀释液在紫外线下辐射５～８ｓ仍有部分精子具有受精能力，但胚胎在早期阶段即死亡，人工诱导雌核发育的过程中，紫外线辐射精液释液５～８ｓ可获得遗传物质失活的精子（激活源     

中国对虾球形病毒的初步研究

用电子显微镜对中国对虾进行病毒的检测，发现一种新的球形病毒，这种病毒直径约８０～１００ｎｍ，具有包涵体，形态上有两种电子密度，球形病毒数量较多，分布在细胞质中，细胞核中没有发现，主要侵染对虾的肠、鳃、肌肉、肝胰腺等组织；宿主细胞的病理变化表现为内质网水肿，线粒体内嵴肿胀及局部溶解，酶原颗粒和粘蛋白原变性等；球形病毒与杆状病毒混合感染是对虾爆发流行病的主要病因     

中国对虾(Penaeus chinensis)淋巴组织培养 细胞中一种球形病毒的超微结构研究

运用电镜技术在中国对虾淋巴组织培养细胞中发现了一种球形病毒。病毒 粒子存在于细胞核和细胞浆内,平均直径80～110nm左右,具有囊膜,核心具有较高的电子密 度。在细胞核及细胞浆内均形成圆形或椭圆形的病毒包涵体。感染病毒的培养细胞出现增长 缓慢或停止生长的现象,部分细胞坏死;电镜下可以观察到一系列细胞病理变化。     

中国对虾(Penaeus chinensis)的白点综合征病毒(WSSV)的提纯和核酸提取

作者从发生白点综合征的中国对虾中,提取了一株白点综合征病毒,用电镜对纯化的病毒进行了形态学观察,并对病毒纯化过程中蛋白酶抑制剂的使用及离心速度的选择进行了探讨。经蔗糖密度梯度离心,分取各带负染后电镜观察,病毒条带位于４０％～５０％蔗糖梯度之间,其完整毒粒长２２５～２７０ｎｍ,直径７５～８８ｎｍ,有的完整毒粒带有很长的尾,病毒衣壳长２５０～３２０ｎｍ,直径６０～８０ｎｍ。在匀浆使用的缓冲液中加入蛋白酶抑制剂ＰＭＳＦ,可得到完整的带包膜的病毒颗粒,比不使用ＰＭＳＦ的提纯效果要好。经３０００ｒ／ｍｉｎ离心５ｍｉｎ,５０００ｒ／ｍｉｎ离心２５ｍｉｎ,去除大部分的组织碎片,经１００００ｒ／ｍｉｎ离心１ｈ,可使大部分病毒沉淀。并采用传统的方法对病毒核酸进行了提取,其基因组经初步分析为ｄｓＤＮＡ。     

中国对虾(Penaeus chinensis)糠虾肌肉组织中球形病毒的超微结构研究

本文用电镜技术对中国对虾糠虾肌组织进行病毒检测,在平滑肌和横纹肌组织中均检出一种球形病毒粒子,直径为80－100nm,具有核包涵体;平滑肌组织中,病毒粒于存在于肌纤维和核膜中,核内具有不规则形态病毒包涵体;横纹肌组织中,病毒粒子存在于肌浆网和肌浆中。病变肌组织中,肌纤维变形,肌浆网膨胀,核膜水肿。     

中国对虾肝胰脏细小病毒病的直接荧光抗体法诊断研究

中国对虾肝胰脏细小病毒（ｈｅｐａｔｏｐａｎｃｒｅａｔｉｃｐａｒｖｏｖｉｒｕｓｄｉｓｅａｓｅ,ＨＰＶＤ）是一种广泛流行于中国对虾中的危害性较大的疾病。由于该病没有特异的肉眼症状,因此早期、快速诊断方法的研究就十分重要。作者曾完成了ＳＰＡ协同凝集试验法和免疫金银染色法的诊断研究。本文用直接荧光抗体法进行研究,观察其诊断效果。结果是,将抗ＨＰＶ的荧光抗体滴加到对虾肝胰脏组织涂片以后,在某些样品的肝胰脏上皮细胞中出现了圆形、椭圆形,大小６～１３μｍ的黄绿色荧光物。经比较,该荧光物的大小和形状与同一样品病理组织切片上经Ｈ－Ｅ染色后上皮细胞中出现的ＨＰＶ包涵体是一致的。由此认为,这些存在于肝胰脏上皮细胞内的荧光物是ＨＰＶ包涵体,而直接荧光抗体法用于诊断中国对虾ＨＰＶ是有效可行的。     

养殖中国对虾肝胰脏细小病毒病的免疫金银染色法诊断研究

80年代以来 ,肝胰脏细小病毒病在养殖中国对虾中广泛流行并造成了一定的损失。作者采用免疫金银染色 (immunogold silver staining,IGSS)技术 ,对患病对虾肝胰脏中的细小病毒(Hepatopancreatic parvovirus,HPV)进行了免疫组织化学的研究。结果表明 ,经 IGSS染色的病虾肝胰脏上皮细胞核内出现了黑色的、圆形或椭圆形、大小为 3～ 15μm的结构。由于该结构与 H- E染色切片上出现的肝胰脏细小病毒包涵体在发生部位、形态和大小上皆一致 ,故而认为该结构为HPV包涵体。证明 ,免疫金银染色法是一种可应用于中国对虾肝胰脏细小病毒病诊断的有效方法。     

中国对虾体表感觉毛结构和功能的研究 Ⅰ.头胸部附肢上感觉毛的形态和分布

利用解剖镜和扫描电镜观察了中国对虾头胸部附肢上各种体表感觉毛的外部形态以及它们的分布模式。根据感觉毛的外部形态可将其分为嗅毛(aesthetasc hair)、锥状刚毛(cuspidate seta)、简单光滑刚毛(simple seta)、鳞状刚毛(squamous seta)、锯状刚毛(serrate seta)、细齿状刚毛(serrulate seta)、羽状刚毛(plumose seta)、轮生羽状刚毛(pappose seta)、CAP 器官(CAP organs)、齿状刚毛(tooth-shaped seta)、栓状毛(peg sensilla)等11种类型。本文还分析了体表感觉毛的形态和分布与功能之间的相互关系。