中国明对虾核糖体ITS1序列分析及其在对虾科系统分析中的应用

对采自不同群体的5个中国明对虾个体的核糖体RNA转录单元内间隔区1(ITS1)序列特点进行分析,并利用GeneBank数据库中已有的对虾科(Penaeidae)ITS1同源序列对对虾科虾类进行系统分析,探讨ITS1序列在对虾科系统及演化中的应用.结果表明,中国明对虾ITS1序列在个体间和个体内都表现出长度多态性,序列长度范围为637～652 bp,这种长度多态性主要是由于微卫星DNA简单重复序列的重复次数不同所造成.在中国明对虾ITS1序列中发现8个微卫星位点,根据目前已知的12种对虾的ITS1序列,发现某些微卫星位点只存于1种对虾中,如(CAGC)_(2-4)只存在于中国明对虾中,(CGGA)_(4-9)只存在于斑节对虾中,(GCGA)_4只存在于短沟对虾中.利用ITS1序列对12种对虾进行的系统分析表明,12种对虾分为4个类群,同种的不同个体,同属的不同种各自聚支,与形态分类比较吻合.对虾科属间遗传距离范围为0.313～0.977,平均值为0.633,远高于用线粒体基因片段得出的属间的遗传距离,支持将原对虾属的6个亚属提升为属的观点.     

口服免疫药物后中国对虾某些血淋巴因子的测定及方法研究

于１９９１年４－９月，以海捕中国对虾亲虾及养殖中国对虾为材料，运用单向免疫扩散（ＳＲＩＤ）方法测定对虾血淋巴免疫因子，并采用经改进后的Ｈｏｒｏｗｉｔｚ等人的方法测定对虾体内的酚氧化酶（ＰＯ）活性，目的在于运用该两种方法对口服不同免疫药物的养殖对虾的血淋巴免疫因子及ＰＯ活力进行测定。对亲虾和养殖对虾口服不同免疫药物前后的测定结果表明，几种情况下的对虾血淋巴中均存在类似ＩｇＭ的因子，血细胞中存在酚氧化     

中国对虾微孢子虫病的电镜观察

微孢子虫又称微粒子虫（Ｎｏｓｅｍａ），是微小的单细胞动物，分布广、危害大，已发现的种类有８００多种［１］，主要寄生于无脊椎动物和鱼类，特别是昆虫。在对虾疾病中，微孢子虫是所有寄生虫中危害最严重的一种。微孢子虫属于微孢亚门、微孢纲、微孢目、单丝亚目。寄生于对虾的微孢子虫属微粒子科（Ｎａｓｅｍａｔｉｄａｅ）；目前已报道４种微孢子虫寄生于对虾：奈氏微粒子虫（Ｎａｓｅｍａｎｅｌｓｏｎｉ）；对虾特汉虫（Ｔｈｅｌａｐａｎｉｐａｎａｅｌ）；桃红对虾特汉虫（Ｔｈｅｌａ－ｐａｎｉｐａｎａｅｌ　ｄｕａｒａｒａ）对虾…     

中国对虾一种C型杆状病毒的纯化技术及形态特征研究

染病中国对虾于１９９５年７月取自青岛崂山对养殖场。为探索对虾杆状病毒分离纯化技术，采用组织超薄切片技术对染病对虾进行电镜观察：被病毒感染的对虾经组织匀浆、差速离心和密度梯度离心，纯化出杆状病毒粒子；纯化的杆状病毒经钨酸钾负染色，于透射电子显微镜下观察形态结构。结果表明，中国对虾中肠组织     

11种天然药物对弧菌的体外抑制效果的观察

于１９９１年３－４月应用纸片法定量测定了海洋及陆地来源的１１种天然药物提取物地中国对虾的主要致病菌－弧菌的体外抑制效果，结果表明，对弧菌高度敏感的药物有５种，中度敏感的药物有３种，不敏感药物有３种，并且５种高度敏感药物的抑菌效果均优于绝大多数抗菌素。为在对虾养殖中选择高效，低毒的天然抗菌药物提供科学依据。     

海水鱼类病原弧菌对对虾的致病力及其疫苗的免疫预防

鱼类致病弧菌（溶藻弧菌Vibrio alginolyticus, 创伤弧菌V.vulnificus，河弧菌生物Ⅰ型V.fluvialis Ⅰ，鳗弧菌Ⅴ.anguillarum和副溶血弧菌Ⅴ.parahaemolyticus）同样可使斑节对虾Penaeus monodon患病，现对斑节对虾的致病性和免疫保护力作了研究。通过肌肉注射感染实验，发现5种弧菌对斑节对虾均有不同的致病作用。从5种弧菌中筛选出强毒株，以其制成福尔马林灭活疫苗。通过注射、浸浴和投喂等3种方式接种的斑节对虾，除投喂效果不明显外，注射和浸浴接种均有一定的免疫保护力。在注射接种组中，随着疫苗浓度的提高，其免疫力有升高的趋势。说明在鱼虾的弧菌病中，疫苗能起到共同的防御效果，为商用鱼虾疫苗的生产提供了可能。     

用16S rRNA基因的内切酶图谱快速鉴别几种对虾病原菌

坎普氏弧菌是青岛海洋大学生物系微生物实验室于１９８９－１９９０年自对虾养殖场中国对虾红腿病心脏及血淋巴中分离并鉴定的菌株，副溶血菌和溶藻胶弧菌两菌株于１９９４年９月得自中国科学院微生物研究所，为建立快速、准确的中国对虾病原菌的诊断技术，根据几种细菌的１６ＳｒＲＮＡ基因的序列，设计并合成该基因的多聚酶反应的引物ＰＬ１和ＰＬ２。并用该对引物分别从坎普氏弧菌、副溶血弧菌和溶藻胶弧菌的ＤＮＡ要品中扩增出分     

对虾传染性肌肉坏死病研究进展

对虾传染性肌肉坏死病(infectious myonecrosis,IMN)最初于2002年8月爆发于巴西Piaui州的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖场,并很快在巴西东北沿岸蔓延开来,目前已传至亚洲.2004年,经美国亚利桑那大学(University of Arizona)水产病害实验室研究,该病为一种新的对虾疾病,根据其症状,暂定名为传染性肌肉坏死病.     

海洋纤毛虫一新种——对虾聚缩虫

于1989年对采自江苏赣榆青浦养殖场对虾体表的纤毛虫研究中,发现一大型共栖种,经鉴定系一新种,定名为对虾聚缩虫Zoothamnium penaei nov. sp.。本种特征为:虫体呈罈状,具双层的口围缘,表膜无明显环纹而常为细菌及碎屑物所覆盖,群体中个员大小相差显著,柄为不规则对称式双叉形分枝。模式标本存放于青岛海洋大学水产学院动物室。     

中国对虾枝原体形态结构及主要超微病理变化

于１９９１年７月１９９２年７月在浙江省宁波，舟山两市暴发了中国对虾肠结节病，在宁海等地对虾养殖场，采集患肠结节病中国对虾，运用电镜观察患病中国对虾鳃丝，肝胰腺，中肠，肌肉等组织，检查枝原体的存在与否及其主要病理变化。     

中国对虾体表微型生物污着原因及防治法验证

用取自中国对虾Penaeaschinensis养成池人工挂片上的微型污着生物、单胞藻、蛋白胨和几种化学治疗药物在室内水族箱中对中国对虾进行试验，以验证对虾体表微型生物污着的原因，并探讨其防治方法。实验表明：中国对虾体表微型污着生物的组成和数量与加入蛋白胨有关，而与由挂片引入的微型污着生物关系不明显，说明对虾体表微型生物污着的主要原因是水环境中的有机物浓度增高。等鞭金藻Isochrysisgalbana可作为钟虫Vorticellasp.、聚缩虫Zoothamniumsp．、壶鞘虫Lagotiasp.等附着性纤毛虫的食物，但实验中其他几种单胞藻（牟氏角毛藻Chactocerosmuelleri、亚心形扁藻Platymonassubcordiformis、蓝藻Synechococcussp．盐藻Dunaliellasp．）则不能；福尔马林、硫酸铜、孔雀绿、制霉菌素和茶粕均可刺激对虾蜕皮，但以目前推荐给现场使用的药物浓度均难以杀死附着性纤毛虫；在实验的几种药物中，茶粕是刺激中国对虾蜕皮、减少体表微型生物污着最有效的药物。     

中国对虾素在大肠杆菌(Escherichia coli)中的重组表达

中国对虾素是从中国对虾血细胞中克隆得到的一种抗菌肽。为了进一步研究中国对虾素(CHP)的功能并为制备特异性抗体作准备，采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法，进行了对虾素原核表达的研究。根据从中国对虾血细胞中克隆得到的对虾素基因设计特异性引物扩增中国对虾素成熟肽基因(CHP)，插入原核表达载体pGEX-4T-1中，在E．coli BL21表达融合蛋白GST-CHP．结果表明，不同表达菌株的融合蛋白表达量为30％—34％，同一菌株在诱导5h后能达到最高表达量。利用GST亲和层析纯化融合蛋白，将融合蛋白用凝血酶裂解以得到CHP，其分子量约为5．6kDa，N-端测序结果与期望的成熟对虾肽序列一致。用液体生长抑制方法检测活性，表明重组GST-CHP蛋白及CHP均表现出对大肠杆菌的抑菌活性。     

渤、黄海秋汛对虾标志放流试验

为了解对虾(Penaeus orientalis Kishinouye)种群、移动分布规律和相应的捕捞强度,我们于1960-1963年在渤海海峡和越冬场对越冬和生殖洄游的对虾群体进行了标志放流初步试验1)之后,在解决了对虾蜕皮生长阶段的标志方法的基础上,又于1964-1978年专门对秋汛索饵对虾进行了标志放流试验,重点了解各产卵场对虾秋汛索饵期间的死亡和移动分布的特点以及秋捕对虾的捕捞强度,为生产单位秋捕对虾的渔场安排提供依据,以便合理利用对虾资源.     

对虾鳃虱亚科(甲壳动物亚门:等足目)的分类学与动物地理学研究进展

基于对虾鳃虱亚科(Orbioninae)的形态学特征,作者比较了属间存在的差异,对该亚科的分类学研究进展进行了归纳。总结世界范围内对虾鳃虱亚科的地理分布特征,解析该亚科动物地理区系特征。迄今,对虾鳃虱亚科包括8属39种,分别为:异对虾鳃虱属(Anisorbione Bourdon,1981,1种);偏对虾鳃虱属(Asymmetrorbione Boyko,2003,2种);表对虾鳃虱属(Epipenaeon Nobili,1906,8种);小对虾鳃虱属(Minicopenaeon Bourdon,1981,4种);圆对虾鳃虱属(Orbione Bonnier,1900,8种);仿偏对虾鳃虱属(Parasymmetrorbione An,BoykoLi,2013,1种);拟对虾鳃虱属(Parapenaeon Richardson,1904,13种);仿拟对虾鳃虱属(Parapenaeonella Shiino,1949,2种)。在中国各大海域共发现对虾鳃虱亚科物种6属18种。对虾鳃虱亚科形态特征:头前板和底节板发达,体形较大。从形态特征推测的系统发育关系,作者认为对虾鳃虱亚科是寄生亚目寄生于鳃部中比较进化的类群、其地理分布范围受寄主对虾总科分布的限制、物种分布相对集中、主要分布范围于印度-西太平洋海域。根据该亚科主要属种的地理分布信息,作者推测该类群的演化是从环热带古地中海闭合开始,直到始新世。     

养殖对虾微型生物污着症的特征

于1991年3 - 9月和1992年3 - 9月，在中国沿海广东、海南、福建、浙江、江苏、山东、河北、天津和辽宁等9个省市的养殖场采集中国对虾、斑节对虾和长毛对虾3种对虾标本，运用显微和亚显微观察方法，对养殖对虾的微型生物污着症进行研究。结果表明，患该症的对虾其体表污着生物群落通常由微型生物组成，包括各种细菌、藻类和原生动物，主要类群是具柄的缘毛美纤毛虫；其他观察到的常见类群包括丝状和非丝状的细菌、附着性藻类和吸管虫类；在养成期偶尔发现有营薛虫和藤壶等大型污着生物。对育苗期和养成期中国对虾体表的扫描电镜观察发现：在某些对虾体表，污着群落具有明显的分层现象。对虾体表的不同污着程度与其体表污着群落的不同发育阶段有关。据此，认为对虾体表微型生物污着症可能是一种慢性的疾病综合症。     

对虾免疫防御中的阳离子和阴离子抗菌肽

综述了对虾免疫防御中扮演重要角色的几种抗菌肽的研究进展。人们首先从对虾中分离到阳离子抗菌肽，即对虾肽（penaeidin），对其性质、抗菌谱和分布与合成部位等进行了研究。并克隆到了该类抗菌肽的基因。最近又在两种对虾的血淋巴中分离到了3种独特的具有抗真菌活性的肽类。与已发现的抗菌肽不同的是这3种肽带负电荷，与血蓝蛋白C－端序列的一致性达95％－100％，由此表明它来自对虾呼吸作用蛋白－血蓝蛋白的裂解片断。免疫检测表明，这种由血蓝蛋白限制性水解产生的抗菌肽与对虾的免疫反应有关。     

摄食对中国对虾能量代谢影响的初步研究

于 1996年 5～ 6月在水温 2 5℃时测定了两种规格中国对虾 ( Penaeus chinensis)摄食沙蚕和配合饲料后的耗养率和氨排泄率。小规格中国对虾摄食配饵的代谢率略高于摄食沙蚕 ,而大规格组中摄食沙蚕的代谢率大于摄食配饵组。小规格中国对虾摄食配饵和沙蚕的代谢能比未摄食组提高了 33.2 2 %和 2 7.4 0 %;大规格中国对虾摄食配饵和沙蚕的代谢能比未摄食组提高了 34 .78%和 4 0 .0 5%。中国对虾摄食后的氨排泄率明显增加 ,表明蛋白质在摄食代谢中具有重要作用。     

化学诱变剂在实验海洋食物链中的流动以及遗传毒性的检测

于１９８９年３月－１９８９年９月，利用极谱测定法研究了无机诱变剂Ｃｄ在３级实验食物（链从褐指藻经中国对虾至欧氏六线鱼）中的传递，并对积累Ｃｄ的中国对虾和欧氏六线鱼肌肉和内脏灰样进行了紫露草微核测定。结果表明，Ｃｄ浓度在传递中依次减少；经过６ｄ喂食，Ｃｄ从褐指藻到中国对虾的传递比例为６６．６％；经过７ｄ喂食，Ｃｄ从中国对虾到欧氏六线鱼的传递比例为２９．９％。ｔ测验发现，处理组对虾内脏灰样与肌肉灰样之     

对虾与鱼、贝类封闭式综合养殖的实验研究

于1995－1999年采用陆基实验围隔法系统地研究了对虾与鱼、贝类封闭式综合养殖的基础问题，所选取的材料为中国对虾、台湾红罗非鱼、缢蛏与海湾扇贝，研究出了4种优化结构养殖模式。结果表明，4种模式的组成及各成分间生物量（收获前）的比值分别为：对虾的养殖效果都比同样条件下的对虾单养模式显著优越；其中最好的虾、鱼、贝三元综合养殖模式将产量提高了28％，投入氮的利用率提高了85％。同时采取封闭式的养殖方法，向浅海输出的氮只占养殖输入氮的6％－8％，从而显著降低了对浅海的污染。     

中国明对虾囊胚和原肠胚细胞的分离和培养

尝试了多种方法分离中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)囊胚细胞和原肠胚细胞并进行了细胞培养.结果表明,解剖法适用于囊胚细胞,自行设计的压片法适用于原肠胚细胞.在培养起始阶段,通过降低血清浓度和缩小培养体系可使中国明对虾囊胚细胞和原肠胚细胞迅速贴壁并铺展,囊胚细胞铺展后有明显的生长晕,中后期原肠胚细胞较易达到半汇聚状态.值得注意的是,中国明对虾囊胚细胞在不同培养液中培养可发生形态上的分化.本实验方法有望用于对虾细胞分化机理和对虾细胞建系的研究.