咳喘宁对哮喘豚鼠IL-6、TNF-α的调节作用研究

目的：研究咳喘宁对哮喘豚鼠白细胞介素（IL-6）和肿瘤坏死因子（TNF-α）的调节作用。方法：将60只豚鼠随机分为空白组10只、造模组50只。利用呼吸道合胞病毒（RSV）感染豚鼠建立动物模型,加鸡卵白蛋白（OVA）诱导建立哮喘模型。造模组成功后再将其随机分为模型组,咳喘宁高、中、低剂量组,西药组,每组各10只。咳喘宁高、中、低剂量组分别给予不同剂量的咳喘宁口服液,西药组给予地塞米松+利巴韦林,空白组、模型组给予0.9%氯化钠注射液。经治疗7 d后,应用HE染色法检测咳喘宁对RSV哮喘豚鼠模型的治疗效果;收集支气管肺泡灌洗液（BALF）并采集心脏血,用酶联免疫吸附（ELISA）法分析血清、BALF中IL-6和TNF-α的含量。结果：血清、BALF中IL-6、TNF-α含量,模型组与空白组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,说明造模成功。咳喘宁高、中、低剂量组及西药组与模型组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。咳喘宁高剂量组与西药组比较,差异亦有统计学意义（P<0.05）。结论：咳喘宁可以降低炎性因子水平,控制气道炎症,调节IL-6和TNF-α含量,改善哮喘模型豚鼠的肺组织病理变化。     

益肾健骨颗粒对绝经后骨质疏松大鼠骨组织Wnt/β-catenin通路的影响

目的：探讨益肾健骨颗粒对绝经后骨质疏松（PMO）大鼠骨组织Wnt通路LRP5、Wnt3a、β-catenin蛋白表达的影响。方法：将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、实验组、阳性对照组,每组各10只。假手术组摘除卵巢周围少量脂肪组织,其余组均切除双侧卵巢以建立PMO模型。12周后测定大鼠双侧股骨骨密度以及骨质疏松骨组织LRP5、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平。结果：与假手术组比较,其余3组骨密度值均下降（P＜0.05）,说明造模成功;与模型组比较,实验组、阳性对照组骨密度值和LRP5、Wnt3a、β-catenin的蛋白表达水平均升高（P＜0.05）。结论：益肾健骨颗粒通过Wnt信号通路促进去卵巢大鼠成骨细胞增殖而改善PMO,效果明显。     

茯苓酸调节AMPK/GSK-3β/Nrf2信号通路对子宫内膜异位症大鼠内膜基质细胞铁死亡的影响

目的：探索茯苓酸调节腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）/核因子E2相关因子2（Nrf2）信号通路对子宫内膜异位症（EM）大鼠基质细胞铁死亡的影响。方法：将51只SD大鼠于腹腔内异位移植子宫内膜组织构建EM大鼠模型,并将其随机分为模型组、茯苓酸低剂量（3.5 mg/kg）组、茯苓酸高剂量（7.0 mg/kg）组、茯苓酸高剂量（7.0 mg/kg）+盐酸多索啡（0.2 mg/kg）组,每组各12只,另取12只SD大鼠只开腹不移植,设为假手术组,药物分组处理后测定各组大鼠异位子宫内膜体积、异位子宫内膜组织铁死亡指标［谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）水平、铁含量］、血清及异位子宫内膜组织炎症因子［肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）］水平、异位子宫内膜组织铁死亡相关蛋白［长链脂酰辅酶A合成酶4（ACSL4）、环加氧酶2（PTGS2）］与AMPK/GSK-3β/Nrf2通路相关蛋白表达。原代培养EM大鼠子宫内膜基质细胞,并将其随机分为对照组、茯苓酸低浓度（40 mg/L）组、茯苓酸高浓度（80 mg/L）组、茯苓酸高浓度（80 mg/L）+盐酸多索啡（10 μmol/L）组,以药物分组处理后,以CCK-8法、流式细胞术分别测定各组细胞增殖及凋亡;以试剂盒检测各组细胞铁死亡指标GSH及MDA水平、铁含量;以免疫印迹实验检测各组细胞铁死亡相关蛋白及AMPK/GSK-3β/Nrf2通路相关蛋白表达。结果：与假手术组相比,模型组大鼠异位子宫内膜体积、MDA水平及铁含量、血清及异位子宫内膜组织TNF-α及IL-6水平、ACSL4及PTGS2蛋白表达升高（P<0.05）,GSH水平、p-AMPK/AMPK、p-GSK-3β/GSK-3β及Nrf2蛋白表达降低（P<0.05）;与模型组相比,茯苓酸低、高剂量组大鼠异位子宫内膜体积、MDA水平及铁含量、血清及异位子宫内膜组织TNF-α及IL-6水平、ACSL4及PTGS2蛋白表达降低（P<0.05）,GSH水平、p-AMPK/AMPK、p-GSK-3β/GSK-3β及Nrf2蛋白表达升高（P<0.05）,且高剂量茯苓酸作用更强;盐酸多索啡可减弱高剂量茯苓酸对EM模型大鼠的作用。与对照组相比,茯苓酸低、高浓度组大鼠子宫内膜基质细胞活力、MDA水平及铁含量、ACSL4及PTGS2蛋白表达降低（P<0.05）,凋亡率、GSH水平、p-AMPK/AMPK、p-GSK-3β/GSK-3β及Nrf2蛋白表达升高（P<0.05）,且高浓度茯苓酸作用更强;盐酸多索啡可减弱高剂量茯苓酸对EM大鼠内膜基质细胞的作用。结论：茯苓酸可减轻EM大鼠炎症及铁死亡,抑制其子宫内膜基质细胞增殖及异位内膜生长,其作用机制可能是通过激活AMPK/GSK-3β/Nrf2信号通路来实现的。     

健脾消癌方对人结肠癌细胞中Wnt信号分子β-catenin、Axin及靶基因MMP-7、CD44的影响

目的：观察健脾消癌方对Wnt信号分子β-连环蛋白（β-catenin）、Axin及靶基因基质金属蛋白酶-7（MMP-7）、CD44的影响,探讨其抗结直肠癌复发转移的作用机制。方法：将对数生长期的HCT116细胞分为空白组,0.9%氯化钠注射液组,5-Fu组及健脾消癌方低、中、高剂量组,分别干预48h后,收集细胞,PCR检测β-catenin、Axin及MMP-7、CD44表达。结果：健脾消癌方含药血清可以降低人结肠癌HCT116细胞中β-catenin mRNA表达水平,上调Axin mRNA表达水平,明显抑制MMP-7 mRNA及CD44 mRNA的表达。结论：健脾消癌方抗结直肠癌转移侵袭的药理作用可能与其下调Wnt/β-catenin信号通路的信号分子β-catenin及上调Axin的表达水平并有效降低靶基因MMP-7、CD44的表达水平有关,这可能是健脾消癌方抗结直肠癌复发转移的重要分子机制之一。     

基于“本痿标痹”和Wnt/β-catenin信号通路的关系探讨CKD-MBD病机

慢性肾脏病-矿物质与骨异常（CKD-MBD）是慢性肾衰竭的常见并发症,骨细胞特异性Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号通路的表达在CKD-MBD的发生发展中扮演着重要的角色。中医学认为CKD-MBD的核心病机是本痿标痹,Wnt/β-catenin发病机制与本痿标痹的机制相似,均有复杂性、虚耗性、难愈性、不可逆性的特点。本文从中医学对本痿标痹和CKD-MBD的认识、本痿标痹和Wnt/β-catenin信号通路的关系来阐述CKD-MBD的病机,并认为痿痹兼顾法可通过促进Wnt/β-catenin信号通路表达从而达到缓解CKD-MBD的目的。     

壮医针挑疗法对哮喘小鼠miRNA-126/TSLP的影响

目的：观察壮医针挑疗法对哮喘小鼠miRNA-126/TSLP的影响。方法：选取6～8周龄的SPF级BALB/c小鼠,将其随机分为对照组、模型组、针挑组、阳性组、阴性组,每组各10只。对除对照组外的其余组小鼠采用卵清蛋白致敏及激发方法制备哮喘模型,针挑组采用壮医针挑疗法,阳性组给予miRNA-126抑制剂,阴性组给予miRNA-126激动剂,每天1次,连续干预7d。干预后对各组小鼠进行肺功能（FEV0.1、FEV0.2、FEV0.4/FVC、PEF）测定。眼球取血,采用ELISA法检测IL-4、IL-5、IL-10、IL-13水平;取外周血,采用RT-PCR法检测miRNA-126、TSLP基因的相对表达。结果：与对照组比较,模型组、阴性组肺功能各项指标均降低,IL-4、IL-5、IL-10、IL-13水平及miRNA-126、TSLP基因相对表达均升高,差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;与模型组比较,针挑组、阳性组肺功能各项指标均升高,IL-4、IL-5、IL-10、IL-13水平以及miRNA-126、TSLP基因相对表达均下降,差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论：针挑疗法治疗哮喘、改善肺功能的起效环节与其调节miRNA-126/TSLP基因表达、降低Th2型细胞因子水平有关。     

加味丹参饮通过PTEN/PI3K/Akt信号通路抑制IRI作用的研究

目的：探讨加味丹参饮预处理通过抑瘤基因/磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B（PTEN/PI3K/Akt）信号通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤（IRI）的保护作用及机制。方法：将75只雄性远交群（SD）大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、加味丹参饮组、加味丹参饮+PI3K/Akt通路抑制剂（LY294002）组、LY294002组,采用结扎大鼠冠状动脉左前降支30min后再灌注60min的方法制备IRI模型。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测各组大鼠心肌肌钙蛋白I（cTnI）表达;取心肌梗死边缘区心肌组织,采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）法检测心肌凋亡指数,采用免疫组化法检测各组大鼠心肌组织Akt、PTEN的表达。结果：与假手术组比较,模型组cTnI水平显著升高,大鼠心肌凋亡指数增加,PTEN、Akt表达均显著升高（P<0.05）;与模型组比较,加味丹参饮组cTnI水平均显著降低,Akt表达升高,心肌凋亡指数和PETN表达降低（P<0.05）;与加味丹参饮组比较,加入抑制剂后,cTnI水平均明显降低,Akt表达降低,PTEN表达升高（P<0.05）。结论：大鼠心肌缺血再灌注时,加味丹参饮可以通过降低PTEN表达,激活PI3K/Akt信号通路,抑制大鼠心肌细胞的凋亡,从而减轻心肌损伤,保护心肌。     

脾胃培源灌肠方对UC大鼠DOR、β-arrestinl、Bcl-2表达的影响

目的：研究脾胃培源灌肠方对UC大鼠δ阿片受体（DOR）、β-arrestin1、Bcl-2在结肠组织中表达的影响。方法：雄性SD健康大鼠120只,随机分为正常组,模型组,脾胃培源灌肠方大、中、小剂量组,美沙拉嗪组,每组20只。除正常组外,其余组均采用TNBS/乙醇法建立溃疡性结肠炎大鼠模型。正常组和模型组予0.9%氯化钠注射液3mL/d灌肠;美沙拉嗪组予美沙拉嗪悬浊液3mL/d灌肠;脾胃培源灌肠方大、中、小剂量组分别按含不同生药浓度（0.56g/L、0.28g/L、0.14g/L）的药液3mL/d灌肠,持续15d,第16天处死大鼠。采用免疫组织化学法和Real time-PCR检测大鼠结肠组织DOR、β-arrestin1、Bcl-2免疫阳性细胞表达及基因表达。结果：与正常组比较,模型组结肠组织DOR、β-arrestin1、Bcl-2免疫阳性细胞表达和mRNA表达显著升高（P<0.05）;与模型组比较,脾胃培源灌肠方大、中、小剂量组和美沙拉嗪组DOR、β-arrestin1、Bcl-2免疫阳性细胞表达和mRNA表达均降低（P<0.05）。结论：脾胃培源灌肠方通过对UC大鼠DOR、β-arrestin1、Bcl-2表达的影响从而发挥其治疗作用。     

基于PI3K/Akt/mTOR通路探讨半夏泻心汤对PLGC大鼠黏膜微环境的影响

目的：对胃癌前病变（Precancerous Lesion of Gastric Cancer,PLGC）模型大鼠从整体、细胞及分子水平的指标进行观察,分析其胃黏膜微环境的特点,并初步探讨半夏泻心汤对其胃黏膜的作用机制。方法：清洁级雄性SD大鼠70只,随机分成3组：模型组50只,造模加中药干预组10只,空白组10只。采用改良MNNG+复合法制备PLGC大鼠模型,于造模中期第10周、造模结束期第20周,各组随机抽取5只大鼠,分别从整体水平、细胞水平及分子水平检测半夏泻心汤对其胃黏膜微环境的影响。结果：1）启动子PTEN,造模加中药干预组较模型组表达高,但仍低于空白组;2）调控器PI3K/Akt/mTOR信号通路,PI3K、Akt、mTOR的表达造模加中药干预组较模型组低,但仍高于空白组;3）效应子HIF-1α及其下游基因,造模加中药干预组较模型组表达低,但仍高于空白组;上述结果差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：中药半夏泻心汤通过影响PLGC大鼠胃黏膜组织微环境变化的3个关键环节,即PI3K/Akt/mTOR信号通路中的启动子、调控器及效应子,从而影响并阻断PLGC的发生发展。     

益气活血化痰法对动脉粥样硬化大鼠NF-κB信号通路影响的实验研究

目的：通过观察益气活血化痰法对动脉粥样硬化（AS）模型大鼠核因子κB（NF-κB）信号通路表达的影响,阐明护心康片抗动脉粥样硬化的部分作用机制。方法：采用注射大剂量维生素D3注射液及喂养高脂饲料法制备大鼠动脉粥样硬化模型,随机分为护心康片高、中、低（1.64g/kg、0.82g/kg、0.41g/kg）剂量组,阳性对照组（阿托伐他汀钙片,2mg/kg）,模型组（蒸馏水,10ml/kg）和空白组。治疗12周后处死,采用双抗体夹心酶联免疫分析法（ELISA）检测血清炎症因子白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子（TNF-α）的表达水平;取动脉组织采用蛋白免疫印记法（Western blotting）检测NF-κB信号通路的蛋白表达量,用图像分析系统分析其灰度值,以目的蛋白与β-acting内参蛋白的比值来表示组织蛋白中NF-κB的表达量。结果：与模型组比较,护心康片中、高剂量组及阳性对照组的血清内炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平与NF-κB信号通路蛋白的表达水平均显著降低（P<0.01）。结论：益气活血化痰法通过下调NF-κB信号通路蛋白的表达水平,阻断该信号通路的活化,从而抑制模型大鼠炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的释放,达到抗动脉粥样硬化的作用。     

参桂保心方对心力衰竭大鼠Caspase-3及心室重构的影响

目的：通过观察参桂保心方对慢性心力衰竭（CHF）大鼠Caspase-3蛋白表达及其对心电图、血流动力学及心室重量指数等的影响,探讨该药保护心肌细胞、抑制心室重构的作用及其机制。方法：将90只雄性SD大鼠随机分为对照组15只和造模组75只,造模组腹腔注射ISO 3mg/（kg·d）制备CHF模型,4周后心脏彩超检测射血分数≤50%为造模成功。将其随机分为模型组,芪苈强心组,参桂保心高、中、低剂量组,每组15只,灌胃给药8周后记录各组大鼠心电图,监测血流动力学指标,测定心脏及心室重量指数,采用免疫组化、蛋白印迹法检测心肌Caspase-3蛋白表达。结果：治疗后参桂保心方高剂量组HR低于中、低剂量组及芪苈强心组（P<0.05）;各组HWI、VWI均下降（P<0.05）;芪苈强心组和参桂保心方高、中剂量组Caspase-3蛋白表达均降低,其中高剂量组优于其余2组（均P<0.05）。结论：参桂保心方可能通过减少Caspase-3蛋白表达,抑制心肌细胞凋亡,达到保护心肌细胞、抑制心室重构的作用。     

肝郁型哮喘小鼠模型MAL、CADM1、IL-6、IL-8、IL-33、TSLP、STAT3表达的实验研究

目的：观察肝郁型哮喘小鼠模型中T细胞成熟相关蛋白（MAL）、细胞黏附分子1（CADM-1）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）、白细胞介素-33（IL-33）、胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）、信号传导与转录激活因子（STAT3）的表达。方法：将Balb/c小鼠18只随机分为对照组（A组）、哮喘组（B组）、肝郁型哮喘组（C组）,每组各6只。按照慢性不可预知性温和刺激（CUMS）联合氢氧化铝及卵清蛋白（OVA）混合液腹腔注射致敏,OVA雾化激发的方式建立肝郁型哮喘小鼠模型与哮喘小鼠模型。观察造模前后各组小鼠体质量及糖水消耗量、强迫游泳不动时间等指标,以及肺组织病理改变情况。检测肺组织中MAL、CADM-1、IL-6、IL-8、IL-33、TSLP、STAT3蛋白及mRNA的表达。结果：A、C组体质量造模后第7、14、21、28天同时间节点组间比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。C组糖水消耗量造模前后比较,差异有统计学意义（P<0.05）。A、C组小鼠强迫游泳不动时间造模后组间比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。肺组织病理学结果显示,A组无炎症细胞浸润,B、C组有炎症细胞浸润。B、C组MAL、CADM-1、IL-6、IL-8、IL-33、TSLP的蛋白表达与A组比较,C组IL-6、IL-33的蛋白表达与B组比较,差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。B、C组MAL、CADM-1、IL-6、IL-8、IL-33、TSLP的mRNA蛋白表达与A组比较,C组MAL、CADM1、IL-6、IL-8、TSLP的mRNA蛋白表达与B组比较,差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论：本研究建立的肝郁型哮喘小鼠模型符合中医证候特点和哮喘病理特点,是较理想的肝郁型哮喘模型。肝郁型哮喘小鼠模型中MAL、CADM1表达下调,IL-6、IL-8、IL-33、TSLP表达上调。     

台风中降雨对中国高分3号合成孔径雷达观测信号的影响

Gaofen-3(GF-3), a Chinese civil synthetic aperture radar(SAR) at C-band, has operated since August 2016.Remarkably, several typhoons have been captured by GF-3 around the China Seas over its last two-year mission.In this study, six images acquired in Global Observation(GLO) and Wide ScanSAR(WSC) modes at verticalvertical(VV) polarization channel are discussed. This work focuses on investigating the observation of rainfall using GF-3 SAR. These images were collocated with winds from the European Centre for Medium-Range Weather Forecasts(ECMWF), significant wave height simulated from the WAVEWATCH-III(WW3) model, sea surface currents from climate forecast system version 2(CFSv2) of the National Centers for Environmental Prediction(NCEP) and rain rate data from the Tropical Rainfall Measuring Mission(TRMM) satellite. Sea surface roughness,was compared with the normalized radar cross section(NRCS) from SAR observations, and indicated a 0.8 correlation(COR). We analyzed the dependences of the difference between model-simulated NRCS and SARmeasured NRCS on the TRMM rain rate and WW3-simulated significant wave height. It was found that the effects of rain on SAR damps the radar signal at incidence angles ranging from 15° to 30°, while it enhances the radar signal at incidence angles ranging from 30° to 45° and incidence angles smaller than 10°. This behavior is consistent with previous studies and an algorithm for rain rate retrieval is anticipated for GF-3 SAR.     

降气平喘方对哮喘大鼠气道平滑肌细胞中ADAM33和ETS-1表达的影响

目的：探讨降气平喘方含药血清对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)中易感基因解整合素金属蛋白酶 33（ADAM33）和E26 转录因子-1（ETS-1）表达的影响及其作用机制。方法：通过卵清蛋白(OVA)致敏建立大鼠哮喘模型,另取SD雌性大鼠分组（降气平喘方组、孟鲁司特钠组）灌胃给药制备不同浓度的含药血清,即降气平喘方组血清分别配制为浓度5%、10%、15%的中药含药血清培养液,孟鲁司特钠组血清配制为30%浓度的西药含药血清培养液,分别对体外培养的ASMC进行同化干预24h。采用CCK8法测定不同含药血清对ASMC生长的抑制率,ELISA法检测各组细胞培养上清液中转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)的浓度,Western Blot法检测各组细胞中ADAM33、ETS-1蛋白表达情况。结果：培养出的细胞在细胞免疫荧光检测下鉴定成功;5%和10%中药血清组均能明显抑制ASMC的增殖(P<0.05或P<0.01);ASMC培养上清液中,10%中药血清组的TGF-β1和IL-6浓度较哮喘模型组明显降低(P<0.05);与哮喘模型组比较,10%中药血清组对ADAM33蛋白的高表达下调作用更显著（P<0.01）,10%、15%中药血清组及30%西药血清组对ETS-1蛋白的高表达下调更显著（P<0.01）。结论：降气平喘方可通过调控ADAM33和转录因子ETS-1表达,减少炎性细胞介质TGF-β1和IL-6释放以及改善气道重塑,达到干预和治疗哮喘的作用。     

推拿对骨骼肌损伤组织机化期TGF-β1、IL-6及TNF-α的影响

目的：研究在骨骼肌损伤组织机化期,推拿对组织中转化生长因子β1（TGF-β1）、白介素-6（IL-6）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量的影响,探讨推拿促进骨骼肌损伤修复的作用机制。方法：3月龄健康清洁级成年新西兰大耳白兔30只,雌雄各半,随机分为空白组（n=6）、模型组（n=12）、手法组（n=12）。空白组不进行任何处理;模型组和手法组采用自制重力锤打击右后肢股四头肌的方法制备骨骼肌损伤模型,手法组在造模后第5天（即组织机化期）开始进行推拿治疗,5min/次,2次/d,连续3d;干预结束后处死动物,切取损伤最严重处的病灶组织,使用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测组织中TGF-β1、IL-6及TNF-α的含量。结果：手法组TGF-β1水平均明显高于空白组及模型组,而炎性因子IL-6、TNF-α水平则高于空白组,低于模型组,差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论：推拿可通过调节TGF-β1的表达,有效减轻炎症反应,进而促进骨骼肌损伤修复,提高修复质量。     

金属离子对凡纳对虾N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的影响

本文报道了金属离子对凡纳对虾N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 (EC3. 2. 1. 52)活力的影响.结果表明,Li 、Na 和K 等对该酶活力没有任何效应.Ca2 、Mg2 、Mn2 对该酶有激活作用,而Ba2 、Al3 、Fe3 、Zn2 、Co2 、Cd2 、Hg2 、Pb2 和Cu2 对该酶活力均具有一定的抑制作用.以Hg2 的抑制作用最显著,Hg2 含量为 1. 5mmol/dm3 时可使酶活力完全丧失.进一步研究Zn2 的抑制作用动力学,结果表明:Zn2 对该酶的抑制作用属可逆的非竞争性类型,抑制常数为11. 95mmol/dm3.     

杂色鲍β-1，3-葡聚糖识别蛋白基因的克隆和表达

从杂色鲍（Haliotis disversicolor）的表达序列标签（EST）中首先鉴定出β-1,3-葡聚糖识别蛋白基因片段（beta-1,3-glucan recognition protein,saflgrp）。通过5’RACE获得5’端序列,并用由头至趾（headtotoe）PCR方法检测全长cDNA序列的正确...     

透骨血竭散外敷对类风湿性关节炎大鼠滑膜VEGF、ApoA-1表达水平的影响

目的：探讨透骨血竭散外敷对大鼠类风湿性关节炎(RA)的治疗作用及机制。方法：将SPF级雄性SD大鼠40只随机分成正常组、模型组、阳性对照组、透骨血竭散组,每组各10只。除正常组外,其余各组大鼠均予Ⅱ型胶原诱导性关节炎造模法建立RA模型。确定造模成功后第2天开始进行药物干预,阳性对照组予扶他林软膏外敷,透骨血竭散组予自制透骨血竭散外敷,连续14d,正常组、模型组不予处理。观察各组大鼠关节红肿情况;腹主动脉取血,采用ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的表达;滑膜免疫组化分析重组人血管内皮生长因子（VEGF）、血清载脂蛋白-1（ApoA-1）的阳性表达。结果：各造模组大鼠每周模型关节炎指数（AI）评分均≥6分,均有明显的RA临床症状和病理学改变;模型组IL-1β、TNF-α的表达量均高于正常组,差异有统计学意义（P＜0.05）。与模型组比较,阳性对照组、透骨血竭散组大鼠IL-1β、TNF-α表达量降低,透骨血竭散组低于阳性对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;各组大鼠滑膜APOA-1m RNA表达量差异无统计学意义（P＞0.05）;阳性对照组、透骨血竭散组VEGF mRNA表达量均明显低于模型组（P＜0.05）,透骨血竭散组低于阳性对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：透骨血竭散外敷可通过抑制IL-1β、TNF-α及VEGF mRNA的表达量发挥治疗RA的作用,其对滑膜APOA-1的表达无明显影响。     

龙虎交战针法对膝骨关节炎大鼠丝裂原活化蛋白激酶信号通道的影响

目的：观察龙虎交战针法对膝骨关节炎家兔关节软骨组织中丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）信号通路蛋白表达的影响,以探讨其作用机制。方法：建立膝骨关节炎大鼠模型,随机分为正常组、模型组、普通针刺组和龙虎交战组。正常组和模型组均常规饲养,不予治疗。普通针刺组和龙虎交战组分别采用常规针刺法和龙虎交战针法治疗。对各组大鼠进行行为学评分;取大鼠膝关节软骨组织,观察其病理形态变化;采用免疫组化观察软骨组织中丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）信号通路中ERK、P38MAPK、JNK蛋白的表达。结果：与正常组比较,模型组大鼠行为学评分降低,JNK、ERK、P38蛋白活性的表达升高（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,普通针刺组、龙虎交战组大鼠行为学评分升高,JNK、ERK、P38蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）,且龙虎交战组优于普通针刺组（P<0.05,P<0.01）。结论：龙虎交战针法能有效地调节MAPKs信号通路中ERK、P38MAPK、JNK蛋白活性的表达,降低MAPKs活性,从而有效缓解关节疼痛,促进关节软骨修复。这可能是龙虎交战针法治疗膝骨关节炎起效的作用机制之一。     

月华丸（胶囊）对耐多药结核菌感染自噬相关蛋白LC3的影响

目的：观察月华丸（胶囊）对结核分枝杆菌感染巨噬细胞自噬的影响,探寻其抗结核分枝杆菌的药效药理作用及其机制。方法：以月华丸（胶囊）含药血清干预感染结核分枝杆菌小鼠的单核巨噬细胞（RAW264.7）,实验共分为5组：阴性对照组、10%月华丸（胶囊）含药血清组、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）+月华丸（胶囊）含药血清组、自噬诱导剂雷帕霉素（Rep）组,另设未被感染的细胞为正常组。采用免疫荧光染色法检测LC3。结果：阴性对照组细胞胞浆中未见LC3蛋白颗粒。与阴性对照组比较,3-MA+月华丸（胶囊）含药血清组细胞胞浆中可见少量LC3蛋白颗粒,10%月华丸（胶囊）含药血清组及Rep组细胞胞浆LC3蛋白颗粒均明显增多,3-MA+月华丸（胶囊）含药血清组多于10%月华丸（胶囊）含药血清组。结论：月华丸（胶囊）含药血清能诱导被耐多药结核菌感染巨噬细胞自噬。