微生物粘膜对杂色鲍幼虫附着和变态的影响

为了探讨广泛存在于海中基质表面的微生物粘膜对鲍幼虫附着和变态的诱导作用,研究了不同年龄微生物粘膜 ( 1 ～ 6 d ) 对杂色鲍幼虫附着和变态的影响.结果表明:1 ～ 6 d微生物粘膜均显著地诱导幼虫附着,其中 3, 5 和 6 d 微生物粘膜还显著地诱导幼虫变态;幼虫的附着率和变态率分别与微生物粘膜中的藻类密度和细菌密度呈显著的正相关性,推测藻类和细菌可能在幼虫的附着和变态中起着重要作用.垂直基质选择性试验结果表明,90 % 以上的幼虫附着在具 23 d 微生物粘膜的载玻片表面且变态率达 70 % 以上,进一步证实了微生物粘膜可以诱导杂色鲍幼虫的附着和变态,同时也证实了幼虫具备选择附着基质的能力.     

鱼类甲状腺轴对胚胎发育、仔鱼变态及性别分化的调控作用研究进展

鱼类甲状腺轴由下丘脑、垂体、甲状腺组成,下丘脑通过分泌促甲状腺激素释放激素、促肾上腺皮质激素释放激素调节垂体促甲状腺激素的合成和分泌,促甲状腺激素促进甲状腺滤泡合成并释放甲状腺激素(主要为甲状腺素—T4),T4运输至肝脏等外周组织中,经过脱碘转化形成生物活性更强的三碘甲腺原氨酸(T3),T3主要通过同核受体结合发挥生物学功能。甲状腺激素对鱼类胚胎发育、仔鱼变态及性别分化等早期生长发育过程具有重要调控作用:甲状腺激素为鱼类胚胎发育期所必须,外加适量甲状腺激素能够提高胚胎或仔鱼存活率;仔鱼变态过程中,某些外部形态变化及相关组织分化依赖甲状腺激素的调控,牙鲆等仔鱼变态期体内甲状腺激素水平及其受体表达量会显著升高;性腺发育期,甲状腺激素对调控鱼类性别分化方向可能具有一定作用。     

牙鲆发育中ALP基因表达图式及功能分析

为探讨研究碱性磷酸酶（ALP）在牙鲆发育变态中的表达与功能，采用组织学和分子生物学的方法对牙鲆ALP进行了研究。结果如下：1．组织化学染色显示原肠期胚体中即可以检测到ALP的活性。出膜后，在头和背部的活性比较强，而身体的内脏区域，活性较低，卵黄中没有表现出酶活性。仔鱼进食后，ALP开始在消化道中大量的表达，特别是在胃肠道粘膜层。2．牙鲆ALPcDNA全长为1811bp，预测能编码476个氨基酸的蛋白质。采用RT-PCR的方法在牙鲆卵到出膜后5天的时候不能检测到ALP基因表达，到变态前的仔鱼体内开始表达。在成鱼胃、肝、鳃、皮肤、皮下肌肉、肾中均能检测到ALP的表达。3．变态前的仔鱼身体总ALP活力约为出膜时的卵中酶活力的4倍，在变态期酶活力变化不大，但是在变态后期上升明显。甲状腺素（T4）在变态中对酶活力增加有明显的促进作用。作为甲状腺素合成抑制剂，硫脲（Tu）能降低仔鱼体内酶活性。4．使用ALP的活性抑制剂左旋眯唑（TRM）处理的仔鱼消化功能和头部骨骼的发育受到一定的影响。消化道内食物很少，消化道上皮层中ALP免疫显色反应减弱。头部骨骼中发现较多骨细胞死亡而只留下一些细胞碎片，超过95％的仔鱼不能完成右眼的移位就发生死亡，变态比对照组迟缓。5．定量PCR结果表明，变态中期ALP基因表达量只有初期的1／2，变态后期却明显上升到变态初期的2．5倍，T4和Tu处理对ALP基因表达产生影响的在中期和后期表现明显。中期T4组明显高于对照组和Tu组，变态后期T4组和Tu组均低于对照组。     

工厂化养殖杂色鲍致病菌副溶血弧菌的分离鉴定及其生理特性

从广东汕尾地区工厂化养殖的患病和死亡的杂色鲍(Haliotis diversicolor)及养殖海水中分离到3株优势菌,经回归感染试验,证实所分离的细菌为杂色鲍的致病菌。经形态、生理、生化等多项指标鉴定,该菌株为副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus),并经ATB微生物自动鉴定系统证实鉴定结果。在中国大陆,由副溶血弧菌使杂色鲍致病并大量死亡的事件,本文属首次报道。     

Neurophysiological control of swimming behaviour,attachment and metamorphosis in black-footed abalone (Haliotis iris) larvae

Experiments were conducted to test the effect of a range of chemicals on larval responses in swimming behaviour, attachment and metamorphosis of the black-footed abalone (Haliotis iris). The effect of antibiotics on larval survival was first tested within negative (filtered seawater) and positive (GABA at 10^?5, 10^?4 and 10^?3 mol L^?1) control assays over 3 days. This experiment corroborated the effectiveness of using antibiotics to improve survival of larvae without obvious synergistic interactions with the GABA inducer or confounding effects of potential bacterial interactions. Chemical treatments (acetylcholine, potassium chloride, dopamine and glutamine) were then tested at various concentrations for their ability to modulate swimming behaviour and induce larval attachment and metamorphosis over 14 days. Generally, larval state shifted from swimming to attached, and from attached to metamorphosed, in the control and treatments over time. However, the peak percentage of attached and metamorphosed larvae varied in time among chemicals and concentrations. While overall percent metamorphosis was minimally enhanced after 14 days of exposure to some chemical treatments at certain concentrations, all treatments displayed significant capacities to down-regulate larval swimming and induce early attachment and metamorphosis. Mortality was recorded throughout the duration of the experiment, and was generally low (<20%) across controls and most treatments for exposures of less than 12 days. Interpretations of specific results from this study are used to elucidate neurophysiological control of larval activities for this abalone species. Comparisons with other marine invertebrates highlight the specificities of chemical cues and endogenous regulatory mechanisms across relatively closely related taxa.     

Settlement and metamorphosis of Styela canopus Savigny larvae in response to some neurotransmitters and thyroxin

1IntroductionAs importantsteps in the life cycles of mostma-rine benthos,settlement and metamorphosis of theirplanktonic larvae influence directly the populationdistribution and fluctuation of benthos.Research onlarval settlement and metamorphosis of mari…     

杂色鲍血蓝蛋白HtH1基因第16内含子SNP密度的分析

单核苷酸多态性（SNPs）是继RFLP和SSR多态性标记之后的新一代遗传标记系统.本文采用EPIC的方法,分析了45个杂色鲍样品的血蓝蛋白HtH1基因第16内含子（H1 intron 16）的SNP数据.这45个个体分别来自日本、台湾和汕头3个不同海域的野生或养殖群体.日本群体的血蓝蛋白HtH1基因第16内含子呈现出长度多态性,共有3种不同长度,分别是1 900、780、440 bp,测序结果表明3个等位基因可以互相比对;而台湾和汕头杂色鲍养殖群体的均为1 900 bp.初步研究结果表明日本杂色鲍个体大约96 bp长的片段含有1个自身杂合SNP位点;台湾杂色鲍个体约133 bp含有1个自身杂合SNP位点;汕头杂色鲍个体约153 bp含有1个自身杂合SNP位点.13个台湾杂色鲍个体包含的SNP密度为约31 bp含有1个SNP;23个汕头杂色鲍个体包含的SNP密度为约21 bp含有1个SNP.这些数据表明现有的杂色鲍养殖群体包含了丰富的SNP位点,利用SNP分子标记进行高密度遗传图谱的构建是可行的.     

几种鲍壳主要化学组成的研究

本研究对九孔鲍和皱纹盘鲍鲍壳的几项主要化学成分进行了测定分析，对这两种鲍不同鲍龄鲍壳的化学成分的差异进行了研究。结果表明，这两种鲍鲍壳在总氮和磷含量上存在着显著差异；在磷、铁、锡和铅和含量上成鲍明显大于幼鲍。     

许氏平鲉三种促性腺激素释放激素基因的启动子克隆及生物信息学分析

促性腺激素释放激素(GnRH)是1种在下丘脑-垂体-性腺轴(Hypothalamus-pituitary-gonad,HPG)的活动中发挥关键作用的神经激素。研究采用染色体步移方法,从许氏平鲉的肌肉组织中克隆得到GnRH1、GnRH2和GnRH3共3个基因的启动子序列,长度分别为4,3.5和2.5kb。利用在线生物信息学软件对这3个GnRH基因的启动子进行预测分析,结果表明,3个基因均存在Sp1,Oct-1,C/EBP,CREB,Pit-1,NF-1,Brn,GATA-1,USF和MyoD等转录因子的结合位点,以及糖皮质激素受体(GR),雄激素受体(AR),雌激素受体(ER),黄体酮受体(PR),视黄酸受体(RAR)和视黄醇受体(RXR)等核受体的结合位点,推测其对GnRH的调控起到关键作用。但是甲状腺激素受体(TR)和嗅觉相关的Olf-1的结合位点只在GnRH1和GnRH2基因启动子中发现,而在GnRH3中没有预测出。本研究结果表明许氏平鮋不同类型的GnRH是受不同的机制调控的,从而在生理过程中发挥着不同的作用。     

皱纹盘鲍杂交幼鲍闽东内湾度夏初探

为探讨皱纹盘鲍杂交鲍幼鲍在闽东内湾度夏的生长与存活,以山东荣成两家育苗场培育的皱纹盘鲍Haliotis discus hannai杂交鲍幼鲍(XXK、DY)、福建东山岛培育的盘鲍H.discus discus幼鲍(DS)为材料,分别运输至福建霞浦内湾长腰海区、山东荣成爱连湾进行度夏培育.各幼鲍组XXK、DY、DS均为1龄苗种,起始壳长分别为31.51 mm±2.66 mm、30.76 mm±3.30 mm、30.63 mm±2.57 mm,且无显著性差异(P<0.05).经过6个月的培育,在南方闽东内湾培育条件下,皱纹盘鲍杂交鲍幼鲍组壳长的日增长率达95.34 μm/d±29.14μm/73.81 μm/d±29.37 μm/d,存活率为50.06%±0.25%、49.88%±0.17%;盘鲍组壳长的日增长率则为65.81 μm/d±29.71μm/d,存活率为28.81%±4.87%.作为对照,在北方培育条件下,皱纹盘鲍杂交鲍幼鲍组壳长的日增长率达67.85μm/d±29.01μm/d、63.749 μm/d±22.99 μm/d,存活率为78.90%±2.24%、86.56%±2.98%;盘鲍组壳长的日增长率则为27.87μm/d±29.21μm/d,存活率为43.19%±1.85%.双因素方差分析结果表明养殖环境与幼鲍来源,以及两者的交互作用均显著影响幼鲍度夏的生长发育.本研究结果对皱纹盘鲍杂交幼鲍在南方闽东内湾的养成提供了一定的参考.     

温度对杂色鲍不同群体生长率与存活率的影响

在16、20、24和28℃这4个设定的水温下,以杂色鲍（Haliotisdiversicolor）日本群体、台湾群体、越南群体和“东优1号”为材料,进行为期40d的养殖试验,对4个杂色鲍群体在不同温度下的壳长日增长率（LGR）和体重日增长率（WGR）进行比较．结果表明,“东优l号”杂色鲍群体在28℃时的LGR和WGR值分别达到162．23±15．79lxm／d和46．52±6．89mg／d,在4个温度下的LGR和WGR值都优于其他3个群体,台湾群体在较高温度（24和28℃）条件下的LGR和WGR值要高于日本群体,而日本群体在较低温度（16和20℃）时的值则高于台湾群体．双因素方差分析的结果进一步表明,温度对杂色鲍不同群体的生长率指标具有显著影响．     

Effect of estradiol-17β on pituitary-thyroidal axis of Japanese eel (Anguilla japonica)

In teleost sPeCies, it is well accepted that estradiol--l75 (E2 )is generated from ovarian fOl-licles stimulated by pituitary gonadOtropins (GTH) (Nagahama, l987). FUrthermore, E2 canstimulate hepatic vitellngenesis and elevate plasrna yOlk protein precursor vite1lOgenin, totalCa and W levels in several teleosts (KorSgaard and Petersen, l976, l978; Whiteheadet al., l978; Elliott et al., l979; Pertersen et al., l983; Wallace, 1985; tapigliati etal., 1999). On the other hand, many stud…     

不同水交换量下皱纹盘鲍转录组测序与分析

养殖过程的循环水交换量能够显著影响皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)的生理状态, 进而影响其养殖存活率和生长率, 然而不同循环水量对于皱纹盘鲍的生理状态影响的分子机制尚不明确。本实验以皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)为研究对象, 将鲍分别置于循环水交换频率为1次/d、2次/d、4次/d的条件下(编号为C0、T2和T4组)暂养3 d, 然后利用Illumina Hiseq 2500技术测定不同处理组鲍鱼的肌肉组织中转录组表达情况。结果表明, 单次换水组(C0)和多次换水组(T2和T4)间差异表达的基因个数较多, 分别为4 095和3 617个, 而T2与T4组之间的差异表达基因个数则较少, 仅为232个。对差异表达基因进行GO和KEGG功能分析显示, 单次换水组(C0)和多次换水组(T2和T4)间差异表达的基因主要集中在能量代谢和免疫反应相关通路或基因, 随机选取10个差异基因进行荧光定量PCR验证, 定量PCR结果与转录谱结果一致, 证实了转录组测序结果的可靠性。本研究说明了更高的水交换量下, 鲍的代谢和免疫相关通路被激活, 可能有助于鲍鱼维持较好的生理和免疫状态, 从而表现出更好的生长、存活等表型。     

Laboratory-scale evaluation of the potential of chemical containment for farmed abalone larval escapees

The sensitivity of abalone Haliotis midae larvae to low levels of toxicants was used to conduct a laboratoryscale experiment to determine the possibility of using chemical containment to prevent the escape of larvae from land-based culture systems, thereby reducing the environmental impact of farming operations. The cryoprotective agent, dimethyl sulphoxide or DMSO (Me₂SO), was used as a toxicant and embryos were exposed to increasing concentrations (0–25.60 mol l^–1) of DMSO for a period of 24 hours. Hatch-out rates of the control group (0.0% DMSO) did not differ from those obtained at 0.2% (2.56 mol l^–1) and 0.4% (5.12 mol l^–1) DMSO. An exposure level at and above 0.6% DMSO resulted in a significant decrease in the number of normal larvae. At an exposure concentration of 0.6% (7.68 mol l^–1) DMSO, 65% (SE 3.0) of the fertilised eggs hatched, compared to only 10% (SE 2.0) at a concentration of 1.0% (12.80 mol l^–1) DMSO. This study indicates the potential for use of DMSO as a form of chemical containment of abalone larvae, even at very low doses. It presents South African abalone farms with a chemical containment method that could potentially be used to prevent the unintentional escape of H. midae larvae from land-based operations.     

6—DMAP抑制九孔鲍受精卵第二极体的释放诱导三倍体

当50％九孔鲍受精卵出现第一极体后，用6－DMAP不同的浓度进行不同的持续时间诱导三倍体。结果表明，6－DMAP的诱导浓度为300μmol/dm^3、诱导持续时间为10min时，其诱导的三倍体率为90％以上，并且胚胎的孵化率高达85％，幼体的畸形率较低，为50％－55％。用该方法多次进行了九孔鲍三倍体生产诱导和苗种培育试验。本文还对6－DMAP的作用机理以及九孔鲍三倍体诱导中的诱导因子等问题进行了讨论。     

九孔鲍担轮幼虫畸形的形态与组织学研究

本文针对九孔鲍人工育苗中担轮幼虫出现的大量畸形现象，采用了组织病理学研究方法，通过石蜡切片的苏木精．曙红、苏木精．苏丹黑和苏木精．品红的染色结果表明：膜内畸形担轮幼虫的游离物质为多糖类，结合透射电子显微镜观察尚未发现病原体，初步推断九孔鲍担轮幼虫的产生并非病原性疾病；本文还阐述了九孔鲍担轮幼虫的基本结构，认为健康成熟的亲鲍和适宜的环境条件是减少九孔鲍畸形幼虫的关键，强调幼虫选育的重要性．     

盐度胁迫对黄条鰤消化生理和抗应激指标的影响

为探讨盐度突变对黄条鰤（Seriola aureovittata）幼鱼消化酶活力和抗应激指标的影响,设计了采用自然海水养殖的对照组盐度29（S29）和实验组盐度分别为35（S35）、15（S15）、10（S10）和5（S5）,对黄条鰤进行了120 h的急性胁迫实验,测定了各盐度条件下消化酶活力、超氧化物歧化酶（SOD）活力及甲状腺激素（T4）浓度的变化。结果显示：黄条鰤胃、肠、肝脏和幽门盲囊的脂肪酶活力,6 h时实验组与对照组差异不显著（P>0.05）,12 h后呈现随时间的增长而活力降低的现象,且实验组显著低于对照组（P<0.05）;蛋白酶活力胁迫24 h后,实验组显著低于对照组（P<0.05）。胃和肝脏蛋白酶活力胁迫6~12 h,S35显著高于对照组（P<0.05）。胃和肠的淀粉酶活力胁迫后,实验组均显著低于对照组（P<0.05）;肝脏淀粉酶活力胁迫6~12 h,S35均高于对照组,24 h后显著低于对照组（P<0.05）。S5的SOD活力随着时间的增加而降低,且差异显著（P<0.05）;S15和S35在120 h时SOD活力降低并接近对照组。各盐度组血清中T4的浓度在6~96 h显著高于对照组（P<0.05）,随后降低并在120 h时趋于稳定。综上所述,盐度胁迫对黄条鰤幼鱼消化酶活力、SOD活力和T4浓度影响较大,黄条鰤对盐度变化有较强的调节能力,相关生理指标变化可为黄条鰤养殖提供参考。     

Assessment of hormonal activity of UV filters in tadpoles of frog Xenopus laevis at environmental concentrations

Residues of UV filters used as ultraviolet absorbers in sunscreens, cosmetics and in light protection have been found in surface water and fish. Recently some of them were shown bearing estrogenic activity, however, very little is known about possible adverse effects to aquatic life. Here we investigate whether two UV filters, 4-methylbenzylidene camphor (4-MBC) and 3-benzylidene camphor (3-BC), interfere with the thyroid and sex hormone system during frog metamorphosis. Xenopus laevis tadpoles were exposed to 1, 5 and 50 μg/L of 4-MBC and 3-BC, respectively, for 35 days (NF stage 52–66). The rate of metamorphosis was not affected, and no obvious differences in body and tail length compared to controls were observed. Neither 4-MBC, nor 3-BC led to effects on the sex ratio or gross gonad morphology of X. laevis at stage 66. Our results indicate that these UV filters do not negatively affect the thyroid system and sex ratio of frogs at environmental concentrations.     

不同浓度苯并（a）芘对杂色鲍抗氧化酶活性的影响

为阐释不同浓度苯并（a）芘[B（a）P]对杂色鲍（Haliotis diversicolor）的毒性效应,以0.02、0.04和0.08 mg/dm^33个质量浓度的B（a）P对杂色鲍进行水体暴露胁迫,7d后检测肌肉、外套膜、鳃、性腺、肾和肝胰腺的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽S-转移酶（GST）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性及还原型谷胱甘肽（GSH）含量.结果显示：0.02 mg/dm^3的B（a）P暴露对杂色鲍抗氧化系统的影响不明显,而0.04、0.08 mg/dm^3的B（a）P则显著抑制了SOD、CAT和GPx酶活性以及GSH含量,同时对GST酶活性具有显著的诱导作用;实验还发现,不同组织抗氧化酶活性对B（a）P胁迫的敏感性响应存在较大差异,其中鳃、肾脏和肝胰腺的敏感性响应明显高于肌肉和外套膜.上述结果表明,苯并（a）芘暴露对杂色鲍抗氧化酶活性的影响具有明显的剂量-效应关系及组织差异性,杂色鲍的鳃、肾脏或者肝胰腺的抗氧化酶响应多环芳香烃胁迫的更敏感,可作为B（a）P污染的生物标志物.