紫扇贝与海湾扇贝种间杂交的研究

为推动中国扇贝养殖业的进一步发展,作者于2008年从秘鲁引进了紫扇贝(Argopecten purpuratus),尝试将紫扇贝与海湾扇贝(Argopecten purpuratus)进行杂交,以期培育出具有优势性状的杂交子代.利用引进的紫扇贝与海湾扇贝进行种间杂交,培育出紫扇贝(雌)×海湾扇贝(雄)杂交扇贝.实验证明紫扇贝的卵子与海湾扇贝的精子可正常受精,受精卵发育正常.杂交扇贝的生长速度在幼虫阶段和成体阶段均快于海湾扇贝.至收获时,杂交贝比海湾扇贝平均壳高、壳长和壳宽分别大27.3%,25.2%和19.3%,体质量增加107.0%,杂种优势明显.     

海湾扇贝原种保持技术研究

利用1998和1999年引进的海湾扇贝(Argopecten irradians irradians)原种F1进行了连续2 a的原种保持实验,包括实验性及生产性两种规模,并用所得原种F3与对照群体进行比较,以探讨在国内进行原种保持的技术措施。2000年,实验性原种制备共培育出M贝(来源于Massachusetts州)原种F2330 kg,V贝(来源于Virginia州)原种F2320 kg,生产性原种制备共培育出原种F255 000 kg。2001年,实验性原种制备共培育出M贝原种F3和V贝原种F3均为280 kg,生产性原种制备共培育出原种F315 000 kg,原种F3的肉柱得率(15.42%)明显高于对照组(13.16%),依然保持了引进群体肉柱得率高的特性,因此在国内进行原种保持是可行的。     

墨西哥湾扇贝的引种和子一代苗种培育

为将美国佛罗里达州产的墨西哥湾扇贝作为我国南海水域的养殖对象，于１９９１年１２月将壳高２．０－４．５ｍｍ的２２２个稚贝置于保温瓶内，控温在１５－１６℃，并每隔１－１．５ｈ充气数分钟，经３ｄ长途运输到青岛，稚贝全部成活。在室内控制条件下，培育至６月下旬，平均壳高达３３ｍｍ，性腺成熟，并采卵成功地培育出子一代。从子一代在海区养成的亲贝采卵分别在青岛，广西与福建培育出子二代。表明，从繁殖，生长等生物学判     

海湾扇贝养殖群体遗传多样性的研究

用等位基因酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,研究了大连沿岸不同生态环境条件下的大李家湾低排筏、大李家湾高排筏、凌水桥、棋盘磨4个海湾扇贝养殖群体的遗传多样性.在4个群体的7种等位基因酶和闭壳肌蛋白中均检测到了22个基因位点,各群体的多态位点比例分别为22.73%,22.73%,22.73%,18.18%(P≤0.95)和27.27%,27.27%,31.82%,36.36%(P≤0.99);杂合度观测值分别为0.064,0.071,0.075,0.069;Hardy-Weinberg平衡偏离指数分别为-0.068,-0.020,-0.032,-0.050;近交系数分别为0.568,0.565,0.487,0.550;位点等位基因有效数分别为1.102,1.109,1.143,1.122;遗传变异综合评价指数分别为0.0060,0.0071,0.0088,0.0073.海湾扇贝养殖群体遗传多样性总体水平较低,但在这4个群体中,凌水桥群体的遗传多样性水平最高,大李家湾高排筏和棋盘磨群体的遗传多样性水平较高,大李家湾低排筏群体遗传多样性水平最低.     

基于RNA-Seq技术的海湾扇贝闭壳肌近交衰退的分子机理研究

了解近交效应对评估贝类长期育种的可行性及分析自交和全同胞交配子代的近交衰退有重要意义。海湾扇贝是典型的性腺雌区与雄区严格分开的雌雄同体型海洋贝类,行体外受精。它是研究贝类遗传近交衰退和交配系统进化的一个模式物种。目前双壳贝类的近交衰退研究多集中在表型和分子标记等方面,但基因组表达层面的研究较少。本研究比较了亲本遗传背景相同的海湾扇贝近交系F=0.5和杂交系闭壳肌组织的基因表达。表型方面：近交系和杂交系在某些生长性状有差异,其中近交系的壳长和总重低于杂交系。基因表达方面：自交系有1175个基因表达量上调,1390个基因表达量下调。差异表达基因主要集中在肌原纤维、收缩纤维和细胞质膜等。GO功能富集主要集中在转移酶、磷酸酶、蛋白激酶和活性肽等方面。差异明显的通路主要集中在氧化磷酸化通路和细胞凋亡通路。利用独立亲本的近交系和杂交系采用qRT-PCR技术,验证了近交系的差异表达基因主要参与氧化磷酸化通路和细胞凋亡通路, 说明自交能影响能量代谢和自稳态。     

海湾扇贝不同种群在磷酸葡萄糖变位酶基因位点的遗传结构与性状

１９９５年１月－１９９６年１２月,采用水平淀粉凝胶电泳技术,对美国海湾扇贝５个野生种群和１个养殖种群在磷酸葡萄糖变位酶基因位点（Ｐｇｍ）的遗传结构及相关性状进行了分析,共发现７个等位基因。ＭＶ（Ｍａｒｔｈａｓ Ｖｉｎｅｙａｒｄ Ｉｓｌａｎｄ）、ＮＹ（Ｌｏｎｇ Ｉｓｌａｎｄ）、ＣＴ（Ｓｔｏｎｉｎｇｔｏｎ）种群间等位基因频率分布无明显差异,内湾封闭性环境和人工近亲繁殖分别使ＷＦ（Ｗｅｌｌｆｌｅｅｔ）、     

海湾扇贝微卫星标记开发及其分离方式分析

利用尼龙膜吸附杂交法构建了海湾扇贝的(AC)_(15)、(AG)_(15)微卫星富集文库,随机挑取3 000个克隆,经菌落原位杂交二次筛选共获得阳性克隆1 268个(42.3%).经序列测定和生物信息学分析后得到521个独立的阳性克隆,其中微卫星506个,小卫星15个.微卫星中,完美型248个,占总数的49.0%;非完美型216个,占42.7%;复合型42个,占8.3%;其中AG/TC重复占70.4%(356个),AC/TG重复29.6%(150个).选择其中的55条序列设计引物,筛选出其中的20对引物检测它们在海湾扇贝CC10家系的双亲和94个子代个体中的分离情况,结果表明:(1) 其中6个位点在母本和子代中发生分离,10个位点在父本和子代中发生分离,4个为双亲共享位点;(2) 2个位点存在无效等位基因;(3) 16个位点符合孟德尔遗传定律,4个位点的子代个体基因型频率偏离孟德尔遗传定律.上述结果表明,这些微卫星引物可以用于构建海湾扇贝的遗传连锁图谱,并且所构建的富集文库适用于微卫星标记的大规模开发.     

海湾扇贝养殖过程中的流行病学调查研究

2001~2002年,对莱州湾养殖海湾扇贝进行了较系统地流行病学调查研究.以海湾扇贝养殖集中海区莱州市金城镇扇贝养殖场为定点调查和样品采集点.调查内容主要包括海湾扇贝各养殖期的死亡率和可疑病原生物检测,同时对pH,溶解氧,温度,盐度等理化环境因子进行连续监测.调查结果显示:海湾扇贝在0.5~1.3cm的幼贝阶段死亡率较高,达50%;随后死亡率降低,1.3~2.2cm的幼贝阶段死亡率约为20%,以后各阶段死亡率平稳,均在7%以下,累积死亡率约为60%.对环境理化因子的调查显示,pH,溶解氧、盐度的变化幅度不大,与扇贝死亡率无明显相关性;温度变化与死亡率有一定的相关性,即低温(20℃以下)可能是养殖海湾扇贝幼贝重要的环境胁迫因子,而高温(27℃左右)对海湾扇贝成贝生长无不良影响.通过对可疑致病性生物因子的调查研究及病理学观察表明,海湾扇贝在养殖过程中可感染多种微生物,其中原核微生物类立克次体(RLO)在养殖过程各生长阶段均可检出,即0.5,1.5,3.0,3.6和5.0cm的海湾扇贝RLO的感染率分别为15%,35%,80%,50%和20%;RLO的感染强度分别为1.0,1.5,16.0,11.5和5.0.在病原生物检查过程中,除RLO以外还发现有类支原体原核生物(MLO)寄生.结合感染强度和组织病理学的相关性分析,初步认为类立克次体(RLO)可能是海湾扇贝在海上吊养的幼贝阶段发病死亡的致病因子.     

Cytogenetic analysis in two scallops (Bivalvia: Pectinidae) by PRINS and PI banding

Cytogenetic analysis was performed for the bay scallop(Argopecten irradians Lamarck 1819) and the Japanese scallop(Patinopecten yessoensis Jay 1857) by primed in situ labeling(PRINS) and propidium iodide(PI) banding techniques.The PRINS analysis revealed that major rRNA genes were clustered in two loci on the telomeric regions of the short arms on two acrocentric chromosome pairs in A.irradians and on two submetacentric pairs in P.yessoensis.The histone H3 gene sites differed in number and location between these two species.The C-band-like patterns revealed by PI staining varied considerably between these two species.A.irradians displayed terminal bands at long arms on all chromosomes,centromeric bands on some pairs and interstitial bands on five pairs.P.yessoensis exhibited only centromeric bands on all chromosomes.These results would contribute to the better understanding of karyotype evolution in A.irradians and P.yessoensis.     

海湾扇贝4次引种后代的表型特征和遗传分化

分析了不同时期引入到我国的4个繁育历史清晰、未发生种质混杂的海湾扇贝养殖群体成体的壳形态指标和群体遗传结构。壳表型参数分析表明,海湾扇贝北部亚种(Northernbay scallop,Argopecten irradians irradians)的浙江养殖群体(ZJ)、加拿大新布朗斯威克群体(NB)、马萨诸塞-弗吉尼亚混合群体(M-V)及海湾扇贝南部亚种(Southern bay scallop,Arg-opecten irradians concentricus)的北卡罗来那群体(NC)等不同群体间在壳形态方面存在显著差异南部亚种的NC群体壳高与壳长基本相等[壳高与壳长的比值(H/L)达0.99,壳型宽壳宽和壳长的比值(W/L)达到0.59];而北部亚种3个群体的壳长均大于壳高,其中ZJ和NB群体的壳形态尤其偏长,其H/L分别是0.92和0.90,NB群体的壳宽显著小于其他群体,W/L仅为0.36。RAPD分析结果表明,ZJ、NB、M-V、NC群体的多态位点比例分别为31.82%、29.55%、28.79%和31.82%,平均杂合度分别为0.1078、0.1134、0.0966和0.1197,表明在我国独立繁育了19代的ZJ养殖群体仍然保持了与其他群体相近的遗传多样性水平。4个群体间的遗传分化系数(Gst)为0.1892,表明其中18.92%的变异来自不同群体间的遗传差异,说明4个群体在遗传上存在着较大的分化。从遗传距离分析,ZJ与NB较近,两者间的遗传距离为0.0319,而两者与M-V间的遗传距离相对较远,分别为0.0442和0.0524;NC与M-V间的遗传距离为0.0368。这些结果表明,从原产地引种到国外时间较早的ZJ、NB等2个群体与较晚引进我国的M-V群体之间的遗传距离已超过了M-V群体(北部亚种)与NC群体(南部亚种)之间的遗传距离,说明独立繁育了近20代后,ZJ群体和NB群体均已产生了较大的遗传分化,这种分化可能有利于海湾扇贝的品种培育。     

不同浓度的KCI对海湾扇贝眼点幼虫附着变态作用的研究

本文在有附着基的条件下进行KCI溶液对海湾扇贝眼点幼虫的附着变态研究，并观察春成活情况。结果表明：KCI对眼点幼虫的诱导效应随KCI浓度和作用时间的增大而增大，但过高则抑制眼点幼虫的附着变态,而成活率则随浓度增加和处理时间延长而降低，其中30mmol/L效果最好。并进行了小型生产试验，效果较好。     

Quantitative traits correlative analysis and growth comparison among different populations of bay scallop,Argopecten irradians

The shell traits and weight traits are measured in cultured populations of bay scallop, Argopecten irradians. The results of regression analysis show that the regression relationships for all the traits are significant (P<0.01). The correlative coefficients between body weight, as well as tissue weight with shell length, shell height and shell width are significant (P<0.05). But the correlative coefficients between the anterior and posterior auricle length with body weight as well as tissue weight are not significant (P>0.05). The multiple regression equation is obtained to estimate live body weight and tissue weight. The above traits except anterior and posterior auricle length are used for the growth and production comparison among three cultured populations, Duncan's new multiple range procedure analysis shows that all the traits in the Lingshuiqiao (LSQ) population are much more significant than those of the other two populations (P<0.01), and there is no significant difference between the Qipanmo (     

Selective feeding of bay scallop Argopecten irradians on phytoplankton community revealed by HPLC analysis of phytopigments in Bohai Sea,China

Understanding the feeding selectivity on phytoplankton by shellfi sh is currently a big challenge. In order to investigate the feeding behavior of bay scallop ( Argopecten irradians ) on phytoplankton, we compared its compositions of phytopigments in digestive glands with those in the surrounding seawater, and conducted fi ve consecutive investigations between July and November 2016 in a bay scallop culture area along coast of Qinghuangdao City, northwest of the Bohai Sea, China. Phytopigments in four-size fractionated phytoplankton of seawater (micro-(20-200 μm);nano(L)-[10-20 μm];nano(S)-[2.7-10 μm], and pico-[<2.7 μm]) and digestive glands of A . irradians were examined to investigate the selective feeding of A . irradians . Results show that fucoxanthin and peridinin constituted the major part of taxonomically diagnostic carotenoids (TDCs) in the micro- and nano(L)-phytoplankton in seawater. Compared with total phytoplankton biomass of seawater (TPB, sum of the four sizes), a substantial decrease of fucoxanthin proportion to total DCs in digestive glands was observed while that of peridinin, 19′-butanoyloxyfucoxanthin, alloxanthin and 19′-hexanoyloxy-fucoxanthin showed an obvious increase when those pigments were mainly confi ned to micro-sized phytoplankton (20-200 μm). However, zeaxanthin and prasinoxanthin were mainly confi ned to nano(s)- and pico-phytoplankton, of which the proportions in digestive glands were usually lower in TPB. The contribution of lutein to total DCs in digestive glands (with an average of 7.23%) increased compared with TPB of seawater (with an average of 0.63%) during all fi ve sampling times.     

海湾扇贝正反交两个家系形态学指标比较分析

以海湾扇贝(Argopecten irradians irradians)正反交两个F1代家系为材料,研究了壳长、壳宽、壳高、全湿质量、软体部质量和壳质量6个生长指标的分布特点。结果表明,各指标两两之间均显著相关,3个质量指标均完全符合正态分布(P>0.05),3个长度指标略偏离正态分布(0.01相似文献   

近交对壳金长牡蛎(Crassostrea gigas)幼虫期与稚贝期生长和存活的影响

以2014年构建的壳金长牡蛎(Crassostrea gigas)全同胞家系为亲本,通过近交和设置对照组的方法,研究了近交对壳金长牡蛎家系幼虫期与稚贝期生长和存活的影响。结果表明,在整个实验期间,壳金F1家系的壳高、壳长和存活率均小于对照组。壳金F1家系的壳高和壳长仅在1日龄、190日龄与对照组差异不显著(P0.05),存活率仅在20日龄时与对照组差异显著(P0.05)。幼虫期,壳金F1家系壳高的近交衰退率范围为0.85%—13.70%,壳长的近交衰退率范围为0.75%—10.83%,存活率的近交衰退范围为4.24%—27.44%。稚贝期,壳金F1家系壳高的近交衰退率范围为6.16%—9.90%,壳长的近交衰退率范围为1.76%—14.21%,存活率的近交衰退范围为1.92%—4.18%。     

A prokaryotic mycoplasma-like organism infection in the scallop Argopecten irradians

Intracytoplasmic infection with a prokaryotic mycoplasma-like organism (MLO) were characterized in the scallop Argopecten irradians, and the first report of such infection in this scallop was represented. Ultrastructurally these microorganisms are usually pleomorphic and variable in morphology and size, and appear in several cell types such as small spherical body, rod-shaped bodies and longer filament-shaped body. They lack a cell wall. These observations revealed that these types of the prokaryote showed some characteristics of a mycoplasma-like organism (MLO). MLO reproduced in two ways: binary fission and budding. The results of isolation and purification showed that a large number of MLOs existed in the tissues of diseased scallops. The results of experimental infection revealed that the MLO is pathogenic to the scallop Argopecten irradians.     

温度、盐度对海湾扇贝(Argopecten irradians)南北亚种回交幼虫生长和存活的影响

开展了海湾扇贝南北亚种杂交子代同海湾扇贝北方亚种间回交、杂交子二代及北方亚种对照组等群体的基因型和温度、盐度等环境因素之间的互作研究。研究结果表明,杂种F2和回交组别相对纯种组别存在生长优势。温度和盐度均对不同基因型群体的生产和存活产生显著的影响,其中在逆境温度下杂种F2和回交组能够更加适应并表现出更高的生长优势,而在盐度中结果却并非如此,这表明基因型和环境之间的互作机制比较复杂。研究结果为继续在不同海区环境下开展海湾扇贝回交育种提供了积极的理论依据和实践参考。     

海湾扇贝样品不同保存条件下DNA的提取及RAPD扩增比较

以海湾扇贝为材料，研究了鲜活样品以及采用冷冻保存、70％乙醇固定和10％福尔马林固定等方法保存的闭壳肌样品用于DNA提取的不同效果，并分析了不同保存条件下所提得DNA用于RAPD扩增的结果，研究表明，鲜活样品以及采肜冷冻保存和70％乙醇固定的样品可以得到很好的DNA，其质量和得率没有显著差异，利用上述DNA模板进行RAPD分析，可以获得一致性很好的扩增结果。10％福尔马林休固定样品则没有得到可用的DNA模板。采用70％乙醇固定保存海洋生物组织，是用于DNA提取及相关的分子生物学研究的快速、简易和有效的方法。     

光合细菌在海湾扇贝工厂化育苗生产中的应用研究

1999年2月6日－4月10日,在青岛市崂山区海水育苗场80m3水体育苗池中,进行了几株光合细菌混合菌液作为海湾扇贝（Argopectonirradians）幼体及稚贝培育期水质净化剂及辅助饵料育苗生产试验,取得了显著效果。浮游幼体生长速度提高了18．3％,浮游期成活率提高20．3％,幼本提前30个小时出现眼点,稚贝变态率提高14．5％,产量提高94％。     

海湾扇贝组织蛋白酶L基因编码区的克隆和分析

通过cDNA末端快速扩增技术(RACE),从海湾扇贝(Argopecten irradians)中克隆得到了组织蛋白酶L基因(AiCL)的编码区全长,为1095 bp,推测编码364个氨基酸.经比对与分析发现蛋白序列中存在4个组织蛋白酶L活性位点保守氨基酸:Q164,C170,H309,N329;6个极为保守的半胱氨酸...