摘除眼柄对中华绒螯蟹精巢发育及其氨基酸含量的影响

本文报道了摘除眼柄对中华绒螯蟹精巢发育及其氨基酸含量的影响,实验分成两组,即摘除眼柄实验组和对照组。结果表明：对照组粗巢内生殖细胞种类多,各期的生殖细胞都有,与之比较,实验组的种类少,只有精子期细胞,说明摘除眼柄可促进精巢发育,加快精子的形成,并使精巢发育同步化,摘除眼柄对精巢氨基酸含量有一定的影响,本文探讨了中华绒螯蟹性早熟可能的机制。     

中华绒螯蟹幼体消化系统发育的研究

于1986，1987两年的3－6月，在浙江平湖水产试验场等地采集中华绒螯蟹五期状幼体和一期大眼幼体，对其消化系统发育的研究表明：各期幼体消化道平均全长分别为0．912mm，1．332mm，1．628mm，1．998mm，2．221mm和2．644mm；胃在Z1中呈椭圆形，到Z3方才明显分化成贲门胃和幽门胃两部分；至于贲门胃内的研磨结构和幽门胃内的滤器则要到大眼幼体才完全形成；在各期幼体中，中肠均是消化道最发达的部分肠壁细胞呈圆柱状；肝胰管和中肠前盲囊在Z1中出现，而中肠后盲囊却要到Z2方才形成。     

中华绒螯蟹卵巢发育周期的组织学细胞学观察

于1989－1990年，用组织切片技术，结合外观特征，在光镜水平对浙北地区的中华绒螯蟹卵巢发育周期进行组织学、细胞学观察，并对从卵原细胞增殖到卵母细胞生长、卵子成熟及卵巢退化、重新发生等进行系统观察研究。研究表明，中华绒螯蟹可以观察到第一次成熟分裂中期相为成熟卵的标志，并以此标志将卵子发生分成四期、卵巢发育分成VII期。结果还表明，中华绒螯蟹雌蟹的成熟时间因所处的地理纬度不同而有所差异，浙北地区雌蟹促产怀卵的最佳时间是3月份并延至4月上旬；卵子必须借助海水及交配活动刺激才能达到成熟；因故无法产卵或一直生活在淡水中的成熟雌蟹其整个卵巢即退化，退化卵巢亦能重新发生，新生卵子的形态、发育时序与首次等待青春期蜕壳的蟹一致；孵后母蟹不仅能继续蜕壳生长，其卵巢也能重新发生，新生卵子的形态、发育时序如前一致；但在卵巢结构上彼此又有明显的区别。     

中华绒螯蟹受精卵离体培育的初步研究

用实验生态学的方法对培养中华绒螯蟹离体胚胎的条件进行了研究。结果表明,温度不仅直接影响胚胎的发育速度,而且通过影响水中真菌的繁殖间接但明显地影响胚胎的存活率。光照对胚胎发育的影响不明显,用０．０５￣０．１ｍｇ／Ｌ的孔雀石绿、２￣８ｍｇ／Ｌ的亚甲基蓝,２０￣５０ｍｇ／Ｌ的福尔马林或３￣５ｍｌ／Ｌ的制霉茵素都能有效地抑制水中真菌的生长,在无真菌感染的情况下,能有效地在４￣８℃保存离体河蟹胚胎６０ｄ,孵     

中华绒螯蟹幼蟹维生素C营养需求研究

在每100g等氮、等能纯化饲料中分别添加0,100,200,400,800,1 000mg维生素C(Vc)多聚磷酸酯(LAPP),用这样配制成的试验饲料饲喂已淡化5d的河蟹大眼幼体及后续幼蟹25d,探讨Vc对大眼幼体和幼蟹生长、存活、蜕壳频率及抗逆性的影响,同时探明幼蟹对Vc的适宜需求量,结果表明,饲料Vc添加量为100~400mg/100g时,可以保证幼蟹正常生长、存活和蜕皮,尤其以投喂添加Vc200mg/100g(C₂组)和400mg/100g(C₃组)饲料的Ⅲ期幼蟹增重率、存活率和平均蜕皮频率较高,其中C₂组(上述各指标值)分别为516.18%,62.83%,2.58,C₃组分别为458.89%,66.17%,2.61;饲料中缺少Vc时(如C₀组),Ⅲ期幼蟹的增重率、存活率和平均蜕皮频率最低,分别为265.31%,26.67%和2.26.饲料中Vc的添加量达到800mg/100g(C₄)和1 000mg/100g(C₅)时,幼蟹的蜕皮反而受到抑制,平均蜕皮频率降低,蜕皮周期延长,且存活率降低,到Ⅲ期幼蟹的增重率、存活率和平均蜕皮频率在C₄组分别为355.7%,31.33%,2.39,在C₅组分别为307.53%,28.56%,2.19.此外,各处理组幼蟹对抗逆性影响的试验表明,在一定的范围内,饲料中添加Vc能提高幼蟹的耐低氧能力和耐pH突变能力,而对耐盐度突变能力没有明显的影响.综合上述结果可以得出,为保持幼蟹良好生产性能,饲料中添加的Vc?     

两组不同饲料对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)卵巢发育及卵黄发生的激素调控

甲壳动物的卵巢发育及卵黄发生受到体内各种内分泌激素的调控。本文研究了两组不同饲料—脂类营养平衡组(A组,含有磷脂和HUFA)和不平衡组(B组,缺乏磷脂和HUFA)对中华绒螯蟹卵巢发育及卵黄发生的激素调控,运用放射免疫法和放射化学法分别测定了处于不同卵黄发生期的中华绒螯蟹的肝胰腺、卵巢、血淋巴中孕酮(PG)、雌二醇(E2)的含量及中华绒螯蟹大颚器(MO)合成与分泌甲基法尼酯(MF)的速率。结果表明:1)中华绒螯蟹体内三种组织(肝胰腺、卵巢和血淋巴)中均存在PG和E2,PG可能为E2的前体;2)早熟蟹的MO合成MF速率远远大于正常发育的幼蟹,MF的大量合成与分泌是促使早熟蟹产生的主要内分泌因素;3)B组饲料(含猪油)喂养的河蟹其MO合成MF的速率均高于A组饲料(含鱼油),且B组饲料的早熟蟹转化PG速度比B组饲料的早熟蟹快;4)PG和E2的脂类结合部位能结合外源性卵黄蛋白原(Vg),通过血淋巴的运输被卵泡细胞胞吞,最终与卵母细胞内的内源性Vg结合,共同形成卵黄体;5)多不饱和脂肪酸(如EPA和DHA)可能会抑制类固醇激素的产生。研究表明,MF是中华绒螯蟹的促性腺激素,具有促使PG合成和E2转化的作用,它们共同诱导河蟹卵巢发育及卵黄发生。     

中华绒螯蟹大水体高产育苗技术研究

中华绒螯蟹(Eriocheur Sinensis)俗称河蟹、毛蟹,为高等甲壳动物。中华绒螯蟹适应性强,价值高,风味独特,营养丰富,是一种极好的增养殖对象,也是水产品中出口创汇的主要品种之一。中华绒螯蟹的营养成分中蛋白质为14%,脂肪为5.9%,碳水化合物为7%,每100g蟹肉中维生素含量高达5960个国际单位,热量5.6×105J。近年来,我国河蟹养殖发展较快,苗种出现供不应求的局面,故人工育苗的产量急需提高。中华绒螯蟹育苗共分六期(Z1,Z2,Z3,Z4,Z5及大眼幼体),1998年,河蟹大水体人工育苗在注重高科技的前提下,使Z1变态Z2的成活率达到80%以上,Z1到Z4的成活率达到66.7%,Z1到M(大眼幼体)的成活率达到31.4%,单位水体出苗量8.94×104只/m3,出池的大眼幼体单位数量为7.84×104只/500g。     

中华绒螯蟹仔蟹维生素E营养需求研究

以酪蛋白、明胶，糊精和去维生素E的鱼油为原料，配制成等氨等能的半纯化基础饲料，每100g基础饲料中分别添加VE0，10，20，40，60，80mg制成试验饲料，对淡化5d的河蟹大眼幼体和后继仔蟹进行了为期25 d的饲养试验，探讨了VE对大眼幼体和仔蟹生长，存活、蜕皮的影响和适宜需求量，结果表明，每100g饲料中分别添20mgt 40mgVE时，Ⅲ期仔蟹的增重率，存活率和蜕皮频率均较高，分别为436．065，51．17％和2．54和487．61％，61．50％和2．58，而VE缺乏组，同期仔蟹的增重率。存活率和蜕皮频率最低，仅分别是264．94％、26．17％和2．21，但是当每100g饲料中VE的添加量提高到80mg时，仔蟹的上述三项指标，不但没有随之升高，反而明显下降，并与VE缺乏的对照组相接近，表明VE添加过量，也会抑制仔蟹的正常生长，存活和蜕皮。VE对仔蟹的正常生长发育，存活和蜕皮是必需的其适宜添加量为每100g饲料中添加20－40mg.     

β-胡萝卜素对中华绒螯蟹卵巢发育及免疫学指标的影响

通过投喂添加β-胡萝卜素质量比分别为50,100 mg/kg的实验饲料,饲养中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)60 d,探讨了对中华绒螯蟹卵巢发育及免疫学指标的影响。结果表明,β-胡萝卜素能够明显增加中华绒螯蟹的质量,提高养殖成活率;极显著提高中华绒螯蟹血细胞吞噬百分率(P<0.01);显著或极显著降低血清超氧化物歧化酶活力(P<0.05或P<0.01);极显著增加卵巢中总类胡萝卜素的含量(P<0.01);显著增加肝胰腺中总类胡萝卜素的含量(P<0.05);较明显增加中华绒螯蟹卵巢指数和卵母细胞直径,但对于肝胰腺指数、卵巢和肝胰腺蛋白质影响较小。     

中华绒螯蟹幼体中肠的超微结构

于1986,1987两年的3—6月,在浙江平湖水产试验场和华东师大培育池,采集中华绒螯蟹,利用透射电子显微镜观察其五期溞状幼体和一期大眼幼体。结果表明,Z_1和Z_2中肠上皮细胞呈椭圆形,Z_3以后逐渐转呈柱状;细胞游离面密生微绒毛,毛的基部具微纤丝。早期幼体阶段的中肠上皮细胞中,还另有囊状细胞和有分泌颗粒的细胞;上皮细胞中具线粒体、高尔基复合体、内质网、溶酶体等其它胞器。根据这些细胞的结构,可见中肠具营养物质的吸收和渗透调节的功能。除上皮细胞外,肠壁还有基膜、纵肌层和环肌层。     

中华绒螯蟹与日本绒螯蟹线粒体COI基因片段的序列比较研究

以相应引物 PCR扩增了黄河口中华绒螯蟹线粒体细胞色素氧化酶 I亚基基因 (COI)片段 ,PCR产物经 T载体连接之后进行克隆、测序 ,得到 70 9bp的碱基序列 ,其 A,T,G,C含量分别为 34.4 1% ,2 7.93% ,2 0 .0 3%和 17.6 3%。并比较它与珠江流域中华绒螯蟹 COI序列和日本绒螯蟹 COI序列的差异 ,发现黄河口中华绒螯蟹与珠江流域中华绒螯蟹 COI序列完全相同 ,而与日本绒螯蟹差异非常明显 ,70 9或 6 5 8(不计引物 )位点中核苷酸差异数为 32 ,核苷酸差异率为 4 .5 1%或 4 .86 % (不计引物 ) ,其中 2 5个位点为转换 ,7个位点为颠换。作者倾向于支持存在中华绒螯蟹和日本绒螯蟹 ,或它们为同一种的两个地理亚种的观点     

中华绒螯蟹人工育苗若干技术问题的探讨

本文对中华绒螯蟹亲蟹的选择、促产以及亲蟹培育、幼体培育、环境控制、饵料投喂及病害防治等技术进行了探讨．     

荧光标记微卫星分析人工饲养中华绒螯蟹的遗传多样性

分析中华绒螯蟹的遗传多样性,采集来自无锡、苏州和上海人工养殖样品102个,运用毛细管电泳检测荧光标记（FAM或HEX）的10个中华绒螯蟹微卫星DNA位点。在所有的3个群体中,单一位点等位基因数从15～42个,平均值为22．9;多态信息含量（PIC）和有效等位基因数（E）分别高达0．826和7．699。结果表明10个位点均为高度多态位点,中华绒螯蟹人工养殖群体具有较高的遗传多样性。欧氏遗传距离、遗传相似性和群体各亚群体内固定系数（Fst）平均值分别为0．439,0．825和0．099,结果显示不同的人工养殖群体之间也存在较大的遗传多样性。除上海群体在同步突变模式（SMM）下,近期不会有瓶颈（P=0．35）;所有群体在SMM和无限等位基因模式（IAM）下均有显著或极显著的瓶颈（P〈0．01或0．05）,结果说明科学的品种保护计划的迫切性。本研究首次选择遗传标记微卫星DNA评估中华绒螯蟹的遗传多样性,并采用高精度的毛细管电泳检测技术,将对中华绒螯蟹的品种保护和合理利国提倡科学依据。     

Effects of salinity on embryonic and larval development of Chinese mitten crab Eriocheir sinensis(Decapoda: Brachyura) and salinity-induced physiological changes

To investigate the effects of salinity on early development of Chinese mitten crab ( Eriocheir sinensis ), and the salinity tolerance mechanism of embryos, different developmental stages of embryos (gastrula, eyespot and pre-hatching stage), and hatched stage I zoea and megalopa, were exposed to a range of salinities (1, 5, 10, 15 (control), 20, 25, 30, 35 and 40). Hatching, survival and molting were monitored. Effects of 24-hour hypersaline (35) and hyposaline (1) stress on egg diameter, water content, Na +/K +-ATPase (NKA) activity, and crustacean hyperglycemic hormone (CHH) gene mRNA expression in embryos and megalopa, are reported. Embryos are more tolerant of low (≤ 5) than high (≥25) salinities, with optimum ranges for gastrula and pre-hatching stage embryos being 5-20, and for eyespot embryo and stage I zoea, 10-20. Most megalopa can molt to the first juvenile instar by day 5 at salinities between 1 and 40, whereas molting of megalopa stages was delayed at 40. Hypersaline conditions resulted in a loss of moisture, reduction of egg volume, and a signifi cant increase in NKA activity and CHH mRNA expression at some developmental stages. Hyposaline conditions did not affect moisture content or egg volume, but resulted in decreased NKA activity and CHH mRNA expression in embryos. For megalopa stages, NKA activity was significantly upregulated following both hypo- and hypersaline stress. Our results suggest high salinity will inhibit development and hatching of E. sinensis embryos, and low salinity will affect the survival of their stage I zoea. Increased NKA activity in embryos and megalopa stages might indicate a hyporegulation response under hypersaline conditions. These findings provide useful information for spawning ground protection of indigenous E . sinensis and enrich the knowledge of embryonic tolerance mechanisms of hyperregulating crustaceans following osmotic stress.     

中华绒螯蟹精子形成过程酸性磷酸酶的分布特征

将金属盐法与光镜、电镜技术相结合,研究中华绒螯蟹精子形成过程中酸性磷酸酶分布的变化。研究表明,在精子形成的早期,酸性磷酸酶由细胞质中的内质网小泡上产生,随后出现在细胞核内、顶体囊膜上及顶体管内,并且反应产物逐渐由分布均匀的细密颗粒聚集成分布均匀的较大的颗粒;当精子成熟后酸性磷酸酶均匀分布在顶体管中,反应产物颗粒比较大,穿孔器部分发现有少量酸性磷酸酶分布。     

日本绒螯蟹线粒体DNA序列研究I.12S rRNA

参考果蝇与蚤状     

中华绒螯雌体腹肢外骨骼组织学初步研究

用组织学方法初步研究了中华绒螯蟹雌体腹肢的体壁结构。在光镜下 ,腹肢体壁由外至内分为 2层 ,分别为角膜层和上皮细胞层。前者又可分为上角膜、外角膜和内角膜 3层 ,其中外角膜中的几丁质纤维形成明暗相间的条带 ;内角膜包括内层和外层 2个亚层。上皮细胞层常与粘液腺紧密相连。角膜层上有粘液腺的分泌导管。     

重金属离子对中华绒螯蟹肝胰脏和鳃丝SOD,CAT活力的影响

研究了 3种重金属离子 (Cu2 ,Zn2 ,Cd2 )对中华绒螯蟹肝胰脏和鳃丝 SOD,CAT活力的影响。实验结果表明 ,肝胰脏和鳃丝 SOD,CAT活力在 3种重金属离子作用下分别随取样时间变化显著 (P<0 .0 5 ) ,对 2种抗氧化酶活力的抑制均为肝胰脏 <鳃丝。 3种重金属离子在实验时间内对肝胰脏 2种抗氧化酶活力的影响呈峰值变化 ,低浓度组表现为促进作用 ,高浓度组在 96 h时为抑制作用 ;低浓度组在 72 h内能提高鳃丝 2种抗氧化酶活力 ,随后下降 ,至 96 h时表现为抑制作用 ,而高浓度组一直为明显的抑制作用 ,2种抗氧化酶活力表现出明显的时间、剂量效应关系。因此 ,肝胰脏和鳃丝SOD,CAT2种抗氧化酶可作为中华绒螯蟹毒理学的评价指标。     

早熟中华绒螯蟹眼柄视神经节对卵巢发育的生殖调控作用

采用组织切片技术于光镜下观察了早熟中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）眼柄视神经节的组织形态结构,以体外培养法研究早熟蟹眼柄视神经节对同种甲壳动物中华绒螯蟹和异种甲壳动物克氏原螯虾卵巢发育的影响,并以放射化学测定法测定早熟蟹眼柄粗提物及单侧或双侧眼柄镊烫后对大颚器生物合成甲基法尼酯（MF）的影响．结果表明,早熟蟹眼柄视神经节呈乳白色,椭圆柱形,外包一层黑色视网膜,由外髓、内髓、端髓3部分构成;端髓区域可明显区分3种类型的神经分泌细胞;早熟蟹眼柄视神经节对同种和异种甲壳动物的卵巢发育均有抑制作用;早熟蟹眼柄粗提物对MF生物合成的抑制作用随浓度的增加而增强．研究证实早熟蟹眼柄视神经节对卵巢的抑制作用较正常发育蟹弱,且对同种甲壳动物卵巢发育的抑制作用强于对异种动物．     

VC对河蟹血清和组织中超氧化物歧化酶及磷酸酶活性的影响

研究了饲料中添加不同含量VC 对河蟹体内超氧化物歧化酶 (SOD)、碱性磷酸酶 (ALP)和酸性磷酸酶 (ACP)活性的影响 .结果表明 ,饲料中不添加VC 时 ,河蟹肝胰腺、卵巢、血清和肌肉各组织中SOD、ALP和ACP活性各异 ,其中SOD活性大小顺序为肝胰腺 >卵巢 >血清 >肌肉 ,ALP活性顺序为肝胰腺 >血清 >卵巢 >肌肉 ,而ACP活性则为肝胰腺 >血清 >肌肉 >卵巢 .饲料中VC 添加量分别 2 .5× 1 0 - 3 、5.0×1 0 - 3 、1 0 .0× 1 0 - 3 和 1 5.0× 1 0 - 3 (m m)时 ,与对照组相比 ,河蟹不同组织中SOD活性显著下降 (p <0 .0 5或 p <0 .0 1 ) ,而ALP、ACP这两种酶的活性却显著升高 (p <0 .0 5或 p <0 .0 1 ) .但它们的变化幅度不同 ,其中就肝胰腺、卵巢、血清和肌肉中SOD活性而言 ,VC 添加量为 1 5.0× 1 0 - 3 (m m )饲料组分别比对照组的低1 41 .3 4 %、1 2 5.94%、1 1 6.67%和 1 1 5.79%;ALP活性 ,VC 添加量为 1 0 .0× 1 0 - 3(m m)饲料组分别比对照组高 93 .0 %、77.5%、1 66.3 %和 2 66.4%;ACP活性 ,VC的添加量为 1 5.0× 1 0 - 3 (m m)饲料组分别比对照组高 1 3 0 .7%、2 3 7.4%、43 7.6%和 2 65.5%.饲料中VC 添加量为 (5.0～ 1 0 .0 )× 1 0 - 3 (m m )时 ,可有效地增强河蟹非特异性免疫能力 .此外 ,本实验还就VC