人工诱导合浦珠母贝多倍体的发生

用细胞松弛素B(C.B)(浓度1.2—1.5mg/L)和低温(12.0℃)处理诱导合浦珠母贝Pinctada martensii(D.)产生多倍体。抑制第一极体的三倍体诱导率达到40％左右;而抑制第二极体的三倍体诱导率分别为77％和52％。随着C.B处理时间的延长,则出现一定数量的五倍体。亚致死温度是低温诱导多倍体的合适温度。随着处理温度的降低和时间的延长,孵化率急剧下降,且非整倍体数量增加。结果提示,C.B处理和低温处理诱导多倍体的机制有所不同;后者不仅抑制极体排放和细胞分裂,而且影响染色体复制和分离。 抑制第一极体的C.B处理组的幼虫日增长率和幼贝大小均显著超过对照组。     

三倍体和二倍体合浦珠母贝育珠比较初步研究

利用人工诱导培育的三倍体合浦珠母贝Pinctada martensii(D.)进行插核育珠试验,并同处理组内的二倍体同胞进行比较。结果表明:三倍体合浦珠母贝的留核率和正圆珠比率分别为81.0％和58.8％,而二倍体则为71.3％和37.8％;在非正圆珠中两者的污珠率差别不大,但三倍体的尾巴珠和素珠的比率明显低于二倍体;三倍体的正圆珠珍珠层平均厚度和平均重量分别为381μm和163mg,二倍体分别为265μm和105mg,两者差异极显著(P<0.01)。初步表明,利用三倍体合浦珠母贝培育珍珠,能缩短育珠期,提高珍珠的产量和质量。     

合浦珠母贝三倍体和二倍体的生长比较

合浦珠母贝Pinctada martensii(D.)三倍体和二倍体的生长测定表明,三倍体成贝平均壳高、壳长、壳宽和体重均超过二倍体同胞,差异极显著(P<0.01)。特别是抑制第一极体形成的三倍体,经两年养殖,壳高、体重和肉重分别比二倍体增加13.01％,44.03％和58.37％。在繁殖期,三倍体的增长率显著超过二倍体。非繁殖期的大多数月份,三倍体的增长率和二倍体相差不大。因此,可以认为三倍体生长速度快主要是由于三倍体的生殖腺发育受阻,体内积累的能量转移到体细胞生长所致。     

合浦珠母贝人工诱导四倍体的研究

用细胞松驰素Ｂ（ＣＢ）、聚乙二醇（ＰＥＧ）和静水压抑合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ（Ｄ．）制第１次卵裂以及ＣＢ抑制极体形成诱导四倍体。ＣＢ抑制第１次卵裂在早期胚胎２－４细胞阶段发现四倍体,但８细胞阶段以后四倍体胚胎消失。ＰＥＧ和ＰＥＧ＋ＣＢ能诱导细胞融合产生四倍体,但处理组幼虫在担轮期死亡。ＣＢ抑制极体形成能诱导出较高比例的四倍体,在胚胎初期和担轮幼虫期分别占４０％和３０％以上。处     

合浦珠母贝人工诱导四倍体的研究

用细胞松驰素B（CB）、聚乙二醇（PEG）和静水压抑合浦珠母贝Pinctadamarlensii（D．）制第1次卵裂以及CB抑制极体形成诱导四倍体。CB抑制第1次卵裂在早期胚胎2-4细胞阶段发现四倍体,但8细胞阶段以后四倍体胚胎消失。PEG和PEG＋CB能诱导细胞融合产生四倍体,但处理组幼虫在担轮期死亡。CB抑制极体形成能诱导出较高比例的四倍体,在胚胎初期和担轮幼虫期分别占40％和30％以上。处理组幼虫进行培育,附苗后当贝苗长成4-5cm大小时通过鳃细胞染色体倍性检查,却没有发现四倍体。文中对四倍体是否能成活进行了讨论。     

合浦珠母贝精子激活机制的初步研究

分别用氨海水、不同盐度的氨海水、Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋,Ｃａ＾２＋、Ｍｇ＾２＋的氯化物及Ｎａ＾＋,Ｋ＾＋的硝酸盐和ＮＨ４Ｃｌ,ＮＨ４ＮＯ３,（ＮＨ４）２ＳＯ４和（ＮＨ４）２ＣＯ４为激活剂,对人工解剖获得的合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ精子进行激活,实验结果表明,合浦珠母贝业郛的细胞膜离子通道这闸门控制类型,其激活途径主要是通过ＮＨ４或ＨＣＧ类激素开启该闸门,发生Ｎａ和Ｃｌ的交换,使精子细     

合浦珠母贝精子的实验生物学初步研究

用光镜观测了海水盐度、pH、温度和激素对合浦珠母口Pinctadafucata精子的激活及运动情况的影响。结果表明,在pH为8．0的自然海水（盐度为30）中,精子不被激活,在pH为9．0—11．5的范围内80％以上的精子能被激活,其中在pH为10．0时的激活率最高,精子活力最强。在pH为9．5的条件下,观察了精子在盐度为10—45范围内的精子活力。在盐度为15—45范围内精子都能被激活,其中在盐度为30左右激活率最高,精子活力最强。同时发现,氢氧化钠没有激活作用。合浦珠母贝精子对温度的适应性很强,在15—40℃内精子激活率都很高。绒毛膜促性腺激素（HCG）也可激活,在浓度为500IU·ml~-1时激活率最高,而促黄体素释放激素A_2（LHRH-A_2）则没有激活作用。     

合浦珠母贝精子的实验生物学初步研究

用光镜观测了海水盐度,ｐＨ温度和激素对合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａｆｕｃａｔａ精子的激活及运动情况的影响,结果表明,在ｐＨ为８．０的自然海水（盐度为３０）中,精子不被激活,在ｐＨ为９．０－１１．５的范围内８０％,以上的精子能被激活,其中在ｐＨ为１０．０时的激活率最高,精子活力最强,ｐＨ为９．５的条件下,观察了精子在盐度为１０－４５范围内的精子活力,在盐度为１５－４５范围内精子都能被激活,其中在盐度为     

合浦珠母贝精子激活机制的初步研究

分别用氨海水、不同盐度的氨海水、Na~ ,K~ ,Ca~2 ,Mg~(2 )的氯化物及Na~ ,K~ 的硝酸盐和NH_4Cl,NH_4Cl,NH_4NO_3,（NH_4）_2SO_4和（NH_4）_2CO_4为激活剂,对人工解剖获得的合浦珠母贝Pinctadamartensii精子进行激活。实验结果表明,合浦珠母贝精子的细胞膜离子通道为闸门控制类型。其激活途径主要是通过NH~ _4或HCG类激素开启该闸门,发生Na~ 和Cl~-的交换,使精于细胞获得或释放能量而激活。pH太低则会影响它们的激活作用。     

合浦珠母贝卵子电击脉冲参数的初步研究

运用电脉冲转基因仪对合浦珠母贝卵子进行电脉冲处理以优化电穿孔法转基因的电击参数。实验中调制百分比：100％；脉冲间隔：1．0s：电极距离：2mm；脉冲个数：5个，参数保持不变。用不同的电脉冲参数组合（脉冲电压100-400V、脉冲持续时间0．5～3．0ms、脉冲频率10～50kHz，共28个组合）对卵子电击，然后加入精子进行授精，统计各组受精率和孵化率，以受精率和孵化率达到50％以上为衡量指标。结果表明，合浦珠母贝卵子对低脉冲频率和高电压非常敏感，当频率低于20kHz或脉冲电压高于400V时对卵子损伤较大。脉冲持续时间对其影响不大，适应范围较宽。优化的转基因电击脉冲参教组合为：脉冲电压1.0kV／cm，脉冲持续时间20ms，脉冲频率50kHz，或者脉冲电压1．5kV／cm，脉冲持续时间1．5ms，脉冲频率50kHz。     

珠母贝人工育苗技术的初步研究

2002年3月1日于海南陵水县黎安港湛江海洋大学珍珠试验站 ,在珠母贝年龄偏小、性腺发育尚未十分饱满的情况下 ,选取雄性2只、雌性10只 ,通过人工催产的方法 ,促使2雄8雌排放精卵 ,受精率为86.36 % ,受精后20h胚胎发育为直线绞合幼虫。在水温23.5～29.7℃ ,盐度30.6,pH8.1的条件下 ,幼虫经66d的培育 ,共出池3mm±0.3mm的珠母贝苗126.8万只 ,初步取得了珠母贝人工育苗试验的成功。     

三倍体合浦珠母贝不育性研究

对三倍体合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａｍａｒｔｅｎｓｉｉ（Ｄ．）春、秋两繁殖盛期的生殖腺进行了组织学观察，并对其配子形成及受精、发育进行了研究。结果表明：合浦珠母贝三倍体的生殖腺发育差，生殖细胞数量少，极少个体能见到成熟卵母细胞和精子；三倍体的配子能完成受精作用，能发育至直线铰合期。配子多为非整倍体，其染色体数目多为１４—２８，胚胎染色体数目主要为２８—４２，故胚胎不能正常发育。因此，三倍体合浦珠母贝是不育的．     

三倍体合浦珠母贝不育性研究

对三倍体合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ（Ｄ．）春、秋两繁殖盛期的生殖腺进行了组织学观察，并对其配子形成及受精、发育进行了研究。结果表明：合浦珠母贝三倍体的生殖腺发育差，生殖细胞数量少，极少个体能见到成熟卵母细胞和精子；三倍体的配子能完成受精作用，能发育至直线铰合期。配子多为非整倍体，其染色体数目多为１４－２８，胚胎染色体数目主要为２８－４２，故胚胎不能正常发育。因此，三倍体合浦珠母     

合浦珠母贝精子激活机制的初步研究

分别用氨海水、不同盐度的氨海水、Na＋,K＋,Ca2＋,Mg2＋的氯化物及Na＋,K＋的硝酸盐和NH4Cl,NH4NO3,（NH4）2SO4和（NH4）2CO4为激活剂,对人工解剖获得的合浦珠母贝Pinctada martensii精子进行激活。实验结果表明,合浦珠母贝精子的细胞膜离子通道为闸门控制类型。其激活途径主要是通过NH4＋或HCG类激素开启该闸门,发生Na＋和Cl－的交换,使精子细胞获得或释放能量而激活。pH太低则会影响它们的激活作用。     

三倍体合浦珠母贝的生殖腺观察

通过对三倍体合浦珠母贝Pinctada martensii(D.)春、秋两个繁殖盛期的生殖腺发育状况和性比观察,发现大多数三倍体在外观上没有生殖腺或者只有发育不全的生殖腺。组织切片检查结果表明,多数三倍体的生殖腺停留在休止期和增殖期,少数发育到生长期。没有一个三倍体的生殖腺发育达到成熟期。三倍体中,雌性占94.3％,雄性占5.7％。 三倍体的生殖腺中,初期的生殖细胞占多数,没有出现成熟的卵母细胞和精子。有些滤泡和生殖细胞萎缩退化。因此,三倍体生殖腺发育异常,三倍体合浦珠母贝是不育的。     

三倍体合浦珠母贝的生殖腺观察

通过对三倍体合浦珠母贝pinctada martensyy（D．）春、秋两个繁殖盛期的生殖腺发育状况和性经观察，发现大多数三倍体在外观上没有生殖腺或者只有发育不全的生殖腺。组织切片检查结果表明，多数三倍体的生殖腺停留在休止期和增殖期，少数发育到生长期。没有一个三倍体的生殖腺发育达到成熟期。三部体中，雌性占94．3％，雄性占5．7％。三倍体的生殖腺中，初期的生殖细胞占多数，没有出现成熟的卵母细胞和精子。有些滤泡和生殖细胞萎缩退化。因此，三倍体生殖腺发育异常，三倍体合浦珠母贝是不育的。