裙带菜原生质体的分离和培养

本文以裙带菜(Undaria pinnatifida(Harv.)Suringar)为材料,进行原生质体分离和培养研究。取得以下结果: 1、使用海螺酶(sea snail enzymes)和纤维素酶(cellulase,Onozuka R-10),酶解裙带菜细胞壁,在一定的条件下,能够大量地分离成活的裙带菜原生质体。 2、实验表明,氯化钠可作为分离裙带菜原生质体研究中的一种理想的渗透刑。 3、荧光增白剂染色镜检法可作为鉴定裙带菜原生质体的一种辅助方法,并适用于原生质体再生壁的观察。 4、光照(2000—2500Lux)能促使原生质体再生细胞壁,含有蔗糖(W/V,1％)的培养液有助于原生质体再生细胞壁。 5、分离的裙带菜原生质体,经培养,已能长成幼体。     

海带雌配子体对碘的反应

藻类对碘的吸收和利用已有不少研究，Fries观察到碘对多管藻(Polysiphonia)的生活是绝对必要的。Iwasaki观察到碘对紫菜某一阶段的生长有刺激作用．Pedersen观察到碘对水云等褐藻的生长是必要的。     

海带丝状雌配子体孤雌生殖的初步研究

比较了两种温度、两种光照强度、4种培养基对海带丝状雌配子体孤雌生殖的影响 ,实验结果表明 ,温度为 10 .0± 0 .5℃、光照强度为 30 0 0 lx、含铁氮磷营养海水培养基是适宜孤雌生殖的条件。在温度、光照强度和培养基 3种因素中 ,培养基组成是影响孤雌生殖速度和效率的最重要因素 ;通过比较找到了 3个孤雌生殖速度较快的丝状雌配子体品系。     

海带雌配子体对无机碳的利用

采用ｐＨ漂移技术（ｐＨ－ｄｒｉｆｔ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）,对海带雌配子体克隆的碳素营养进行了研究。结果表明,海带雌配子体对无机碳的利用能力较弱,其ｐＨ补偿点为８．８５,ＣＯ２补偿点为１．６３５μｍｏｌ／Ｌ。与ＨＣＯ＾－３利用有关的抑制剂：Ａｃｅｔａｚｏｌａｍｉｄｅ（Ａｚ）,４’４’－ｄｉｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｏｓｉｌｂｅｎｅ－２,２－ｄｉｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ（ＤＩＤＳ）,４－ａｃｅｔａｍ     

海带丝状雌配子体弧雌生殖的初步研究

比较了两种温度、两种光照强度、４种培养基对海带丝状雌配子体孤雌生殖的影响,实验结果表明,温度为１０．０±０．５℃,光照强度为３０００ｌｘ,含铁氮磷营养海水培养基是适宜孤雌生殖的条件,在温度、光照强度和培养基３个弧雌生殖速度较快的丝状雌配子体品系。     

铜对海带雌配子体和幼孢子体生长发育的影响

用不同浓度的铜来处理海带(Laminaria japomca Aresch)雌配子体和幼孢子体中，发现：①海带雌配子体和幼孢子体对微量的铜是很敏感的，在铜浓度为10ppb的情况下，营养生长和发育排卵受到了明显的抑制。②．50ppb的铜可以完全抑制海带雌配子体的排卵。③在铜浓度为250ppb的情况下，雌配子体和幼孢子体不能健康生长，而趋于死亡。④海带幼孢子体对同一浓度铜的敏感性高于雌配子体。     

氯化汞对裙带菜和海带雌配子体生长和发育的影响

汞是熟知的毒物(Bidwell 1979)。近二十年来随着工业的发展，海洋重金属的污染在世界许多海区已有发现．关于生物对汞、镉、铅等重金属的吸收、积累和代谢过程，常因生物种类、体重、性别等不同而有差异。如紫贻贝(Mytilus edulis)     

海带雌配子体对X射线的反应

已知电离射线如X射线等对生物有强烈的诱变作用[4]。X射线和Y射线对海带雌配子体的效应已有初步观察[1-3]。过去用于海带实验的是雌雄配子体混合在一起的材料，如果发生突变，不易观察到，这是因为受精后是二倍体。这里我们对能行孤雌生殖的纯系海带的雌配子体进行了实验。     

硼对海带雌配子体生长的影响

硼对高等植物生长的影响，已有不少的研究．有人认为它是植物生长所必需的元素，有人不同意这个意见。硼对海藻的效应，研究的不多．McBride等的观察指出，硼对小球藻的生长没有什么影响。Lewin的实验表明，硼对硅藻的生长是必需的．Nasr等的观察指出，     

海带雌配子体对吲哚乙酸反应的初步观察

吲哚乙酸(IAA)对高等植物细胞的刺激作用已有不少研究。它对某些藻类的效应也有一些观察。例如Provasoli(1958)的实验指出，低剂量吲哚乙酸对石尊(Ulva lactuca)有刺激生长的作用，浓度较高时(0．3mg／升)则有抑制作用。Conrad等的实验指出，吲哚乙酸(3mg／升)可以促进丝藻(Ulothrix subliblssima)的生长，提高湿重13倍。     

日本蟳(Charybdis japonica)微卫星位点的分离及遗传多样性分析

采用磁珠富集法,以生物素标记的(cA)12寡核苷酸为探针,构建了日本蟳基因组微卫星富集文库.通过PCR法从文库中共筛选出89个微卫星位点,其中完全型(perfect)共75个,占84.27%;不完全型(imperfect)12个,占13.48%;复合型(compound)2个,占2.25%.根据微卫星位点的侧翼序列,设...     

浸洗对淡干海带中主要金属元素含量及海藻酸盐组成的影响

以烟台海域淡干海带为实验材料,对浸洗前后其主要金属元素含量及海藻酸根阴离子基团含量进行了研究。结果表明:淡干海带经过浸洗后钾、钠元素含量下降60%以上,镁元素含量下降31.6%,钙、锶元素含量下降小于10%,海藻酸根阴离子基团相对含量上升了一倍;通过比较主要金属阳离子和海藻酸根阴离子基团含量,证明浸洗之后的海带样品中各金属元素主要以海藻酸盐的形式存在于海带中,计算得到各类海藻酸盐含量(湿重,wt%)依次为:海藻酸钾22.2%、海藻酸钙14.6%、海藻酸镁11.4%、海藻酸钠10.5%。XRD(X-Ray Diffraction,X射线衍射)分析表明海带浸出物含有无机盐类物质,在浸洗之后海带样品无明显无机盐的衍射峰,证明浸洗可除去海带样品中的无机盐。     

日本新糠虾(Neomysis japonica)卵巢发育与卵子发生

结合日本新糠虾雌性生殖系统的解剖特征和组织结构特点,首次对日本新糠虾卵巢发育及卵子发生进行分期,并对各期卵巢发育时间及卵巢长与体长间相互关系进行分析。结果表明,日本新糠虾雌性生殖系统由卵巢和输卵管组成。卵巢呈“H”形,分左右两叶,两叶间有呈近三角形横桥连接,横桥内侧为生殖上皮。卵巢实质不分叶,卵细胞由横桥向两侧卵巢迁出并逐渐发育变大。卵子的发生经历5个阶段,分别为卵原细胞、卵黄合成前期卵母细胞、内源性卵黄合成期卵母细胞、外源性卵黄合成期卵母细胞和成熟期。滤泡细胞随着卵细胞的迁移而迁移,卵细胞发育后期出现滤泡细胞与卵母细胞相融合现象。卵巢发育分为5个时期,分别为未分化期（以卵原细胞为主,约为孵化后的18d）、小生长期（以内源性卵黄合成期卵细胞为主,约为孵化后的22d）、大生长期（以外源性卵黄合成期卵细胞为主,约为孵化后的25d）、成熟期（以成熟卵细胞为主,约为孵化后的28d）和退化期（为排卵后卵巢,约为孵化后的32d）。退化期卵巢中未见有结缔组织增生,而实质中存在着大量早期卵细胞,滤泡细胞呈多层分布于卵细胞周围。输卵管自卵巢末端生出,开口于第6胸肢基部内侧腹甲上,随卵巢发育,管腔渐增大。日本新糠虾卵巢长与体长间有正相关。     

长石莼（缘管浒苔）（Ulva linza）原生质体再生与分化发育初步研究

采用细胞酶解技术获得长石莼（缘管浒苔）原生质体,再通过细胞培养观察原生质体再生以及各种分化发育途径。结果表明,长石莼（缘管浒苔）主要存在3种分化发育途径：1）部分原生质体可直接分裂形成有假根或无假根得单细胞苗。2）部分原生质体分裂成规则细胞团或不规则细胞团,最后形成苗簇。3）部分原生质体可发育为孢子囊／配子囊,其中部分...     

日本鳗鲡(Anguilla japonica)对日本沼虾(Macrobrachium nipponense)的捕食效应

采用捕食者.猎物间捕食效应研究方法,研究了日本鳗鲡对3种体长规格日本沼虾的捕食效应.结果表明:(1)日本鳗鲡与日本沼虾的主要活动时段均为17:00至翌日5:00,期间日本沼虾的活动量随其体长规格的增大而减少,日本鳗鲡的主要捕食时段为0:00-5:00,其对体长2.4cm左右的日本沼虾有较强的追捕行为;(2)日本鳗鲡对日...     

基于de novo高通量测序的曼氏无针乌贼(Sepiella japonica)ESTs中微卫星位点筛选与特征分析

对均一化转录组测序获得的47604个曼氏无针乌贼的微卫星序列进行分析,结果表明,乌贼转录组中微卫星位点丰富,每1402nt的EST中就有一段不小于12nt长度的微卫星序列。单碱基重复是EST微卫星序列的主要形式(38.69%),其次依次为三碱基(31.14%)、二碱基(26.35%)、四碱基(3.29%)、五碱基(0.38%)、六碱基(0.14%)重复,短序列类型占微卫星总量的96.18%。同碱基类型的微卫星序列组成又存在差异,AC(54.51%)和AG(31.22%)是最常见的二碱基重复序列;而AGC(16.37%)和AAC(14.06%)是最常见的三碱基重复序列。通过引物设计和体系优化,共筛选到了24对多态性微卫星位点,对来自福建漳州海域的35只野生曼氏无针乌贼(Sepiella japonica)个体进行群体遗传学检测,结果表明,每个位点检测到的等位基因数3—10个不等(均值5.9个);平均杂合度观测值(Ho)和期望值(H_e)分别为0.518和0.681。除2个位点外所有位点的多态信息含量(PIC)都大于0.5。Hardy-Weinberg平衡检测表明,仅4个位点有显著偏离(P0.05),未检测到连锁不平衡现象。这表明转录组高通量测序技术适于乌贼微卫星位点的开发,获得的SSR标记可用于今后乌贼资源遗传评估和科学有效管理过程。     

三种养殖模式下日本鳗鲡(Anguilla japonica)养成品体色和肌肉品质的差异

随机选取池塘专养(M1)、日本沼虾套养(M2)以及水库放养(M3)三种养殖模式养成的肛长(25.91±3.26)cm的日本鳗鲡作为研究材料, 比较研究了三者间在表皮色差、背肌组织物理特性和肌肉营养成分组成及含量上的差异。结果表明: (1) M1表皮色差与M2、M3均具显著差异(P<0.05), 三者背、腹间的体色差异程度呈M1>M2>M3 (P<0.05); (2) 背肌物性指标中均具显著差异的为粘着性、弹性和回复性, 前者测定值呈M1>M3>M2 (P<0.05), 后两者均呈M3>M1>M2 (P<0.05), M3背肌最发达, M1纵肌肌束纤维排列较M2紊乱; (3) 肌肉营养成分中仅水分和灰分含量均具显著差异, 依次呈M3>M1>M2 (P<0.05)和M3>M2>M1 (P<0.05), 蛋白质含量高于脂肪含量的仅为M3; (4) 三者间肌肉脂肪酸、氨基酸组成均完全相同, 含量排序也均基本一致, 但多种不饱和脂肪酸含量却均具显著差异(P<0.05)。     

海带浸泡液腐植质的分离及其性质

对海带综合利用生产中剩下的浓缩浸泡液所含腐植质进行了分离,并对分离出的腐植酸、富里酸和乙醇可溶物三级分做了化学表征和性质研究,包括三级分的得率、紫外和红外光谱分析,元素、官能团、氨基酸和总糖含量分析,分子量分布,以及它们对鱼卵生长和褐藻酸钠粘度的影响。     

钝顶螺旋藻部分原生质体及单细胞的制备与培养

于1992年1月-1994年4月，进行超声波处理方法制备钝顶螺旋藻部分原生质体以作为基因工程受体，以及制备单细胞用于固体平板克隆化培养的研究。研究结果表明：超声波以20kHz频率、15W功率作用30s，可使藻丝体断裂成15．0±1．6个细胞长度；延长作用时间，至2－6个细胞长度时，细胞壁结构遭到破坏，形成部分原生质体；继续作用，可形成少量原生质体和大量单细胞。断裂藻丝体、部分原生质体、单细胞以及原生质体均可涂布于固体培养基上再生或生长。以一定密度涂布单细胞与原生质体，能够形成彼此分开的单个克隆，可用于筛选及遗传分析。本文提供了一种节省溶菌酶的制备螺旋藻透性体的方法，超声波作用利于外源基因的导入，而涂布培养利于进一步的筛选和形成克隆。