华贵栉孔扇贝的三倍体诱导及生长比较

分别用细胞松弛素Ｂ（ＣＢ，浓度０．５ｍｇ·Ｌ（－１））和低温（１０℃）处理诱导华贵栉孔扇贝Ｃｈｌａｍｙｓｎｏｂｉｌｉｓ产生三倍体。抑制第一极体的三倍体诱导率分别达到４４．１％和３１．８％；而抑制第二极体的三倍体诱导率分别为９０．２％和７２．７％（胚胎初期检查）。ＣＢ处理组幼虫的日增长率显著超过二倍体（ｐ＜０．０１）。养殖半年后，三倍体在壳高、壳长、壳宽和体重方面均显著大于二倍体（ｐ＜０．０１）；而养殖１３个月后，三倍体的肉重和闭壳肌重分别比二倍体增加３９．５％和６７．４％。在繁殖期，三倍体在外观上没有生殖腺。     

不同卵密度对太平洋牡蛎三倍体诱导效果影响的研究

本实验主要研究用70mg／L浓度的6－MDAP（二甲基氨基嘌呤）对太平洋牡蛎的受精卵进行三倍体诱导，研究受精卵的密度对诱导效果的影响，以及诱导后受精卵的孵化率和畸形率。实验结果表明：当受精卵的密度为4万个／ml时三倍体率最高，相应的孵化率最高，综合来看，4万/ml的卵密度是生产上较好的受精卵处理密度。     

长牡蛎壳橙品系三倍体的人工诱导

本研究采用了细胞松弛素B (CB)和6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)两种诱导方法对长牡蛎(Crassostrea gigas)壳橙品系进行三倍体诱导,分析了两种诱导方法的不同条件下幼虫的三倍体率、孵化率、D形幼虫畸形率以及幼虫生长和存活。研究表明,虽然细胞松弛素B (CB)和6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)诱导的三倍体率差异不显著(P0.05),但同种方法中不同处理条件下长牡蛎壳橙品系的三倍体率、孵化率和D形幼虫畸形率差异显著(P0.05)。综合三倍体率、孵化率、D形幼虫畸形率这三个指标;在水温25～27℃、盐度30、受精后15 min时,使用浓度为0.5 mg/L的CB溶液,持续诱导20 min为CB诱导的最适诱导条件;在水温25～27℃、盐度30、受精后15 min时,使用浓度为300μmol/L的6-DMAP溶液,持续诱导15 min为6-DMAP诱导的最适诱导条件。幼虫生长和存活的观察结果表明,三倍体诱导组与对照组生长差异显著(P0.05),CB诱导组和6-DMAP诱导组的幼虫壳高平均日增量分别为(15.83±1.44)μm和(15.27±0.48)μm,均高于对照组(12.10±0.42)μm;三倍体诱导组与对照组幼虫存活率差异不显著。研究结果为长牡蛎壳橙品系的遗传改良提供了参考资料。     

6-DMAP诱导缢蛏三倍体的研究

用6-DMAP抑制受精卵第二极体排放的方法诱导缢蛏三倍体的试验．结果表明：6-DMAP在100～500μmol／dm^3处理浓度范围内均可以诱导出三倍体，随着药物处理浓度和处理时间的提高，三倍体倍化率和D形幼虫畸形率有不同程度的提高，而D形幼虫孵化率会随之下降．综合来看，在30％卵子受精并出现第一极体，6-DMAP浓度为300μmol／dm^3和处理持续时间为20min时的处理组的处理效果优于其他处理组组合．     

太平洋牡蛎杂交三倍体与诱导三倍体的生长比较

本文以中国太平洋牡蛎二倍体自交作为对照,比较了诱导三倍体群体及其杂交三倍体的早期表型性状.通过对各试验组卵径、卵裂率、D幼率、D形幼虫大小、生长、存活率和倍性等指标进行测定,进一步评估了2种诱导方法的有效性.结果表明:与诱导三倍体群体相比,杂交三倍体表现出明显优势,D幼率、D形幼虫大小均大于诱导三倍体群体,且差异显著(P＜0.05);稚贝期壳长和壳高生长也显著快于诱导三倍体群体(P＜0.05).至附着,杂交三倍体的存活率很高,显著优于诱导三倍体群体.就三倍体率而言,杂交三倍体达到100％,而诱导三倍体群体仅为51.00％士11.79％.由上得知,杂交三倍体更适合应用于大规模生产.     

太平洋牡蛎杂交三倍体与诱导三倍体的生长比较

本文以中国太平洋牡蛎二倍体自交作为对照,比较了诱导三倍体群体及其杂交三倍体的早期表型性状。通过对各试验组卵径、卵裂率、D幼率、D形幼虫大小、生长、存活率和倍性等指标进行测定,进一步评估了2种诱导方法的有效性。结果表明:与诱导三倍体群体相比,杂交三倍体表现出明显优势,D幼率、D形幼虫大小均大于诱导三倍体群体,且差异显著(P<0.05);稚贝期壳长和壳高生长也显著快于诱导三倍体群体(P<0.05)。至附着,杂交三倍体的存活率很高,显著优于诱导三倍体群体。就三倍体率而言,杂交三倍体达到100%,而诱导三倍体群体仅为51.00%±11.79%。由上得知,杂交三倍体更适合应用于大规模生产。     

静水压休克诱导大黄鱼三倍体

采用静水压休克方法诱导大黄鱼三倍体，在水温20-26℃条件下，卵受精后2min用450kg/cm^2的静水压处理大黄鱼受精卵2min，三倍体诱导率65.6%，孵化率相对对照组达70%。文中还就处理条件与三倍体诱导率和胚胎存活率关系进行了讨论。     

利用不同盐度诱导长牡蛎三倍体的研究

采用低盐度(4、6、8、10、12、14、16)和高盐度(40、45、50、55、60、65、70)在40%~50%受精卵出现第一极体时处理10和15min,进行长牡蛎三倍体的诱导。在低盐度诱导三倍体实验中,随着盐度降低,D型幼虫孵化率逐渐降低,处理10和15min的卵裂率差异显著(P0.05),孵化率差异不显著(P0.05)。当盐度为8时,处理受精卵10与15min,三倍体诱导率最高分别可达84.4%和91.0%,两处理组三倍体诱导率差异显著(P0.05)。在高盐度诱导三倍体实验中,随着盐度升高,D型幼虫孵化率逐渐降低,处理10和15min的卵裂率和孵化率均差异显著(P0.05)。当盐度为55时,处理受精卵10min,三倍体诱导率最高为80.3%;当盐度为60时,处理受精卵15min,三倍体诱导率最高为97.1%,两处理组三倍体诱导率差异显著(P0.05)。研究发现,在盐度为8和60条件下,40%~50%的受精卵出现第一极体时,处理15min,长牡蛎三倍体诱导率最高。     

6-DMAP诱导太平洋牡蛎三倍体——4.四倍体现象的研究

１９９６～１９９７年,在进行６－二甲基氨基嘌呤（６－ＤＭＡＰ）诱导太平洋牡蛎产生三倍体的实验过程中,发现一定数量的四倍体。解剖法获取精卵,人工授精。染色体倍性鉴别采用染色体计数法。（１）三因素四水平Ｌ１６（４５）正交设计。试验平行重复２次。最高四倍体诱导率为４０．０±０．０％。太平洋牡蛎四倍体各诱导因素的最优水平组合：当精卵混合２０ｍｉｎ时,将受精卵浸泡在含６－ＤＭＡＰ４５０μｍｏｌＬ－１的海水中１０ｍｉｎ;决定四倍体产生的三因素的主次顺序：６－ＤＭＡＰ浓度→诱导时机→诱导持续时间。（２）三因素三水平Ｌ９（３４）正交设计。试验平行重复３次。最高四倍体诱导率为９．６±４．９％。诱导太平洋牡蛎四倍体各因素的最优水平组合：当５０％受精卵出现第一极体时,将受精卵浸泡在含６－ＤＭＡＰ４５０μｍｏｌＬ－１的海水中１５ｍｉｎ;决定四倍体产生的三因素的主次顺序：诱导时机→６－ＤＭＡＰ浓度→诱导持续时间。     

6—DMAP抑制九孔鲍受精卵第二极体的释放诱导三倍体

当50％九孔鲍受精卵出现第一极体后，用6－DMAP不同的浓度进行不同的持续时间诱导三倍体。结果表明，6－DMAP的诱导浓度为300μmol/dm^3、诱导持续时间为10min时，其诱导的三倍体率为90％以上，并且胚胎的孵化率高达85％，幼体的畸形率较低，为50％－55％。用该方法多次进行了九孔鲍三倍体生产诱导和苗种培育试验。本文还对6－DMAP的作用机理以及九孔鲍三倍体诱导中的诱导因子等问题进行了讨论。     

利用咖啡因和热休克诱导太平洋牡蛎三倍体

报道采用咖啡因和热休克相结合的方法 ,抑制受精卵第二极体释放诱导太平洋牡蛎三倍体的优化方案。实验结果表明 ,三倍体诱导率随着咖啡因浓度的增高而增高 ,D形幼虫的孵化率却随着咖啡因浓度的增高而降低 ;所进行 30～ 36℃热休克温度试验 ,其对三倍体诱导率影响不大 ,但对孵化率影响明显。在 2 3～ 2 5℃条件下 ,当 50 %受精卵出现第一极体时 ,用浓度为 2 g/ L的咖啡因 ,结合 33℃± 1℃的热休克 ,处理牡蛎受精卵 15min,三倍体诱导率达 80 %以上 ,孵化率在 4 5%左右。通过此法诱导的三倍体群幼虫的成活与生长情况与其二倍体群体无明显差异。     

三种化学诱导剂诱导太平洋牡蛎三倍体的比较研究

从三倍体率、D幼孵化率、幼虫生长速度、生产成本等方面比较了细胞松驰素 B、二甲基氨基嘌呤、咖啡因三种化学诱导剂诱导太平洋牡蛎产生三倍体的效果。 CB的三倍诱导率最高 ,为91.5% ,但 D幼孵化率最低 ,仅为 5.8% ,且成本最高 ,为 6 - DMAP和咖啡因的 4倍和 50倍。 6 -DMAP的三倍体诱导率略低于 CB,为 88.0 % ,但 D幼孵化率最高 ,为 6 0 .5% ,其成本仅为 CB的1/ 4。咖啡因的三倍体诱导率最低 ,为 82 .4 % ,幼虫孵化率为 30 .2 % ,但其成本最低 ,仅为 CB的 2 %和 6 - DMAP的 8%。三种诱导剂诱导的三倍体群幼虫在生长速度及成活率方面无显著差别。     

杂色鲍和九孔鲍三倍体的化学诱导

本文首次报道了用化学药物法（ＣＢ、咖啡因以及高ＰＨ高钙溶液）休克杂色鲍和九孔鲍受粗卵诱导产生三倍体的试验结果。结果表明,用ＣＢ诱导杂色鲍,三倍体诱导率高达５９．０￣７６．２％;用咖啡因诱导杂色鲍和九孔鲍,三倍体导率低,分别为３０￣２０％。本就它们在诱导中的作用机理进行了讨论。     

细胞松弛素B对菲律宾蛤仔三倍体诱导及早期胚胎发育的影响

采用0.25 mg/L、0.5 mg/L、0.75 mg/L、1.0 mg/L细胞松弛素B(CB)抑制第二极体(PB2)的释放诱导菲律宾蛤仔三倍体,观察三倍体蛤仔的早期胚胎发育。结果表明:CB的浓度对菲律宾蛤仔三倍体的诱导以及胚胎发育影响显著(P<0.05),0.5与0.75 mg/L CB处理组诱导率较高,分别达89.4%与89.2%;各组第一极体(PB1)同步释放,处理组PB2受到明显抑制;CB处理浓度与胚胎发育速度呈负相关,与各发育阶段的畸形率及畸形程度呈正相关。综合诱导率及早期胚胎发育状况,0.5 mg/L是CB诱导菲律宾蛤仔三倍体的适宜浓度。     

6-DMAP诱导黄河口近江牡蛎(Crassostrea ariakensis)三倍体的研究

用6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)进行了黄河口近江牡蛎(Crassostreaariakensis)的三倍体诱导,以卵裂率、孵化率、诱导三倍体率和三倍体诱导组幼虫的生长率、存活率、三倍体率为指标,研究了诱导浓度、起始诱导时间、诱导持续时间三个因素对黄河口近江牡蛎三倍体的诱导效果。结果表明,三因素对近江牡蛎三倍体诱导效果的影响程度为起始诱导时间>诱导持续时间>诱导浓度。温度25℃,诱导浓度为300—450μmol/L,起始诱导时间为受精后14min,诱导持续时间为15min时,诱导三倍体率可达51.39%—71.67%,卵裂率、孵化率、幼虫壳高日平均生长率和幼虫平均存活率分别能达到65.16%—81.57%、61.25%—86.78%、8.76—9.88μm/d、69.16%—73.29%,眼点幼虫时期三倍体率达53.33%—62.16%。本研究为黄河口近江牡蛎的三倍体诱导提供了理论依据。     

杂交与三倍体诱导对海湾扇贝(Argopecten irradians)幼虫的复合作用

基于2×2交叉实验设计,通过杂交和6-DMAP等诱导处理,构建了二倍体自交组、二倍体杂交组、三倍体诱导自交组和三倍体诱导杂交组等四个实验组家系,探讨了海湾扇贝(Argopecten irradians)幼虫期生长及存活的杂种优势和6-DMAP诱导处理效应的复合作用。分别计算各家系的孵化率,测定了各家系幼虫期第1、5、10天幼虫个体的壳长以及第5天和第10天各家系幼虫的存活率。利用一般线性模型(general linear model (GLM))计算表型变量的原因方差组分,评估了杂交和6-DMAP处理对扇贝幼虫生长和存活的影响。结果显示:6-DMAP处理组孵化率要显著低于非处理实验组(P0.05)。三倍体诱导自交组第5天幼虫存活率显著低于其他组(P0.05),到第10天三倍体自交组全部死亡。三倍体诱导杂交组第10天存活率低于二倍体组但不显著(P0.05)。在第1天幼虫生长中,三倍体诱导杂交组幼虫壳长显著小于其他组(P0.05),第5天幼虫生长中,三倍体诱导杂交组壳长则显著大于其他组,而三倍体诱导自交组则显著小于其他组(P0.05)。在第10天幼虫生长中,二倍体自交组显著小于二倍体杂交组和三倍体诱导杂交组组(P0.05)。上述结果显示扇贝幼虫生长期的杂种优势和三倍体诱导效应间存在一定相互作用。     

中国对虾生物能量学研究Ⅰ——温度、体重、盐度和摄食状态对耗氧率和排氨率的影响

实验于１９９６年５月～９月对３种规格养殖中国对虾在不同条件下的耗氧率和排氨率进行了测定。结果表明,温度、体重、盐度和摄食状态对其代谢有显著影响。耗氧率（ＱＯ）和排氨率（ＱＮ）与温度正相关,ｌｎＱＯ＝０．０５８Ｔ－２．８９４;ｌｎＱＮ＝０．０７６Ｔ＋１．１１６;而与体重呈负相关,ＱＯ＝０．５１５Ｗ－０．１２６;ＱＮ＝２５．０５Ｗ－０．１９９。在盐度５～３５范围内,中国对虾（３．０２５ｇ±０．０８８ｇ）的耗氧率和排氨率在盐度２８时最小。中国对虾（３．１３ｇ±０．０７２ｇ）摄食沙蚕和配合饲料,在饱食状态下耗氧率比饥饿状态下分别提高了８３．９％和２９．３％,排泄率增加了１１３．８％和９３．６％,表明摄食时蛋白质代谢增加显著。     

提高太平洋牡蛎三倍体诱导率的几项技术措施

本文根据1996－2000年从事牡蛎三倍体育苗与养殖技术研究的生产试验中，主要从加强亲贝蓄养，让亲贝充分成熟；卵子的离体海水促熟培育，让卵子发育同步；洗卵处理；受精卵密度的掌握；三倍体诱导参数；外部环境条件等六方面探讨了如何提高牡蛎三倍体诱导率，以满足规模化生产的需要，推动牡蛎三倍体养殖业的发展。     

热休克诱导斑马鱼异源三倍体的研究

于１９９７年５月在广东省珠海市集斑马鱼和豹纹斑马鱼,采用热休克方法研究阻止第三极体排放诱导异源三倍体斑马鱼的适宜条件。按正交实验方案组合诱导参数,结果表明：在卵受精后２ｍｉｎ,采用３９℃持续处理２ｍｉｎ,三倍化率可达５３．８％,原肠期相对存活率为９１．０％,尾芽期相对存活率为９１％,孵化期相对存活率为９１．１％。本研究分析了热休克处理的参数与三倍体出现率和胚胎相对存活率的关系,并得出诱导参数中起始     

两种方法诱导太平洋牡蛎三倍体在生产上的应用效果

本文就太平洋牡蛎三倍体育苗中，常用的低温休克法和6－DMAP法进行了生产性试验比较。其结果为：在三倍体诱导率方面，低温休克的三倍体率低且不稳定，6－DMAP法诱导三倍体率高且稳定；在生长方面，低温休克法诱导的三倍体在养成期的生长和成活均差于6－DMAP法诱导的，三倍体率差异明显，但在幼虫期二者差异不显著。