海湾扇贝养殖过程中的流行病学调查研究

2001~2002年,对莱州湾养殖海湾扇贝进行了较系统地流行病学调查研究.以海湾扇贝养殖集中海区莱州市金城镇扇贝养殖场为定点调查和样品采集点.调查内容主要包括海湾扇贝各养殖期的死亡率和可疑病原生物检测,同时对pH,溶解氧,温度,盐度等理化环境因子进行连续监测.调查结果显示:海湾扇贝在0.5~1.3cm的幼贝阶段死亡率较高,达50%;随后死亡率降低,1.3~2.2cm的幼贝阶段死亡率约为20%,以后各阶段死亡率平稳,均在7%以下,累积死亡率约为60%.对环境理化因子的调查显示,pH,溶解氧、盐度的变化幅度不大,与扇贝死亡率无明显相关性;温度变化与死亡率有一定的相关性,即低温(20℃以下)可能是养殖海湾扇贝幼贝重要的环境胁迫因子,而高温(27℃左右)对海湾扇贝成贝生长无不良影响.通过对可疑致病性生物因子的调查研究及病理学观察表明,海湾扇贝在养殖过程中可感染多种微生物,其中原核微生物类立克次体(RLO)在养殖过程各生长阶段均可检出,即0.5,1.5,3.0,3.6和5.0cm的海湾扇贝RLO的感染率分别为15%,35%,80%,50%和20%;RLO的感染强度分别为1.0,1.5,16.0,11.5和5.0.在病原生物检查过程中,除RLO以外还发现有类支原体原核生物(MLO)寄生.结合感染强度和组织病理学的相关性分析,初步认为类立克次体(RLO)可能是海湾扇贝在海上吊养的幼贝阶段发病死亡的致病因子.     

栉孔扇贝大量死亡的流行病学调查研究

2001~2003年,对养殖的栉孔扇贝进行了较系统地流行病学调查研究.以栉孔扇贝养殖集中海区长岛县亚美扇贝养殖场为定点调查和样品采集点.调查内容主要包括栉孔扇贝各养殖期的死亡率和可疑病原生物检测,同时对pH、溶解氧、温度、盐度等环境理化因子进行连续监测.调查结果显示:栉孔扇贝在养殖初期幼贝阶段死亡率较低,随后死亡率逐渐升高,至8月24日月死亡率达最高点71%.9月份以后死亡率开始下降.至10月份累积死亡率达90%以上.对环境理化因子的调查显示,pH、溶解氧、盐度的变化幅度不大,与扇贝死亡率无明显相关性;温度变化与死亡率似有一定的相关性,即高温(月平均23℃以上)可能是养殖栉孔扇贝重要的环境胁迫因子.通过对可疑致病性生物因子的调查研究及病理学观察表明,栉孔扇贝在养殖过程中可感染多种微生物,其中原核微生物类立克次体(RLO)在养殖过程各生长阶段均可检出,其感染率和感染强度与扇贝死亡率呈现一致的趋势.在病原病理检测中,发现RLO的大量感染与组织细胞严重病理损伤密切相关.在病原生物检测过程中,除RLO以外还发现有类枝原体原核生物(MLO)和类病毒(VLP)寄生.RLO的人工感染实验结果说明RLO是栉孔扇贝重要的病原菌.结合感染率和死亡率、感染强度和组织病理学的相关性以及感染实验的结果分析,认为类立克次体(RLO)可能是栉孔扇贝养殖过程中大量死亡的主要致病因子.     

Cytogenetic analysis in two scallops (Bivalvia: Pectinidae) by PRINS and PI banding

Cytogenetic analysis was performed for the bay scallop(Argopecten irradians Lamarck 1819) and the Japanese scallop(Patinopecten yessoensis Jay 1857) by primed in situ labeling(PRINS) and propidium iodide(PI) banding techniques.The PRINS analysis revealed that major rRNA genes were clustered in two loci on the telomeric regions of the short arms on two acrocentric chromosome pairs in A.irradians and on two submetacentric pairs in P.yessoensis.The histone H3 gene sites differed in number and location between these two species.The C-band-like patterns revealed by PI staining varied considerably between these two species.A.irradians displayed terminal bands at long arms on all chromosomes,centromeric bands on some pairs and interstitial bands on five pairs.P.yessoensis exhibited only centromeric bands on all chromosomes.These results would contribute to the better understanding of karyotype evolution in A.irradians and P.yessoensis.     

紫扇贝与海湾扇贝种间杂交的研究

为推动中国扇贝养殖业的进一步发展,作者于2008年从秘鲁引进了紫扇贝(Argopecten purpuratus),尝试将紫扇贝与海湾扇贝(Argopecten purpuratus)进行杂交,以期培育出具有优势性状的杂交子代.利用引进的紫扇贝与海湾扇贝进行种间杂交,培育出紫扇贝(雌)×海湾扇贝(雄)杂交扇贝.实验证明紫扇贝的卵子与海湾扇贝的精子可正常受精,受精卵发育正常.杂交扇贝的生长速度在幼虫阶段和成体阶段均快于海湾扇贝.至收获时,杂交贝比海湾扇贝平均壳高、壳长和壳宽分别大27.3%,25.2%和19.3%,体质量增加107.0%,杂种优势明显.     

紫扇贝和海湾扇贝杂交家系的生长和通径分析

以紫扇贝(Argopecten purpuratus)和海湾扇贝(Argopecten irradians irradians)为亲本,建立了紫扇贝自交(ZZ)、海湾扇贝自交(HH)、紫扇贝(卵)×海湾扇贝(精)(ZH)和海湾扇贝(卵)×紫扇贝(精)(HZ)共4个试验家系.在养殖60、127 d时测定壳高、壳长、壳厚和体质量,并分析各养殖时期影响体质量的主要因素.结果表明:在各养殖时期,2杂交家系子代的壳高、壳厚以及体质量均表现出生长优势(P＜0.01),因此认为通过紫扇贝和海湾扇贝杂交方式是改善扇贝的良好方法.通径分析的结果表明,对于自交家系,壳长是影响体质量的主要影响因素,但对于杂交家系HZ来说,壳长(60 d)和壳厚(127 d)对体质量的决定作用最大;在杂交家系ZH,60 d时壳长和壳厚的协同作用对体质量的决定作用最大,127d时壳高的决定作用最大.因此对于两个杂交家系的选育,应按照不同性状对体质量的决定系数选择各时期的优势性状,以使子代的杂种优势充分表现.     

海湾扇贝4次引种后代的表型特征和遗传分化

分析了不同时期引入到我国的4个繁育历史清晰、未发生种质混杂的海湾扇贝养殖群体成体的壳形态指标和群体遗传结构。壳表型参数分析表明,海湾扇贝北部亚种(Northernbay scallop,Argopecten irradians irradians)的浙江养殖群体(ZJ)、加拿大新布朗斯威克群体(NB)、马萨诸塞-弗吉尼亚混合群体(M-V)及海湾扇贝南部亚种(Southern bay scallop,Arg-opecten irradians concentricus)的北卡罗来那群体(NC)等不同群体间在壳形态方面存在显著差异南部亚种的NC群体壳高与壳长基本相等[壳高与壳长的比值(H/L)达0.99,壳型宽壳宽和壳长的比值(W/L)达到0.59];而北部亚种3个群体的壳长均大于壳高,其中ZJ和NB群体的壳形态尤其偏长,其H/L分别是0.92和0.90,NB群体的壳宽显著小于其他群体,W/L仅为0.36。RAPD分析结果表明,ZJ、NB、M-V、NC群体的多态位点比例分别为31.82%、29.55%、28.79%和31.82%,平均杂合度分别为0.1078、0.1134、0.0966和0.1197,表明在我国独立繁育了19代的ZJ养殖群体仍然保持了与其他群体相近的遗传多样性水平。4个群体间的遗传分化系数(Gst)为0.1892,表明其中18.92%的变异来自不同群体间的遗传差异,说明4个群体在遗传上存在着较大的分化。从遗传距离分析,ZJ与NB较近,两者间的遗传距离为0.0319,而两者与M-V间的遗传距离相对较远,分别为0.0442和0.0524;NC与M-V间的遗传距离为0.0368。这些结果表明,从原产地引种到国外时间较早的ZJ、NB等2个群体与较晚引进我国的M-V群体之间的遗传距离已超过了M-V群体(北部亚种)与NC群体(南部亚种)之间的遗传距离,说明独立繁育了近20代后,ZJ群体和NB群体均已产生了较大的遗传分化,这种分化可能有利于海湾扇贝的品种培育。     

墨西哥湾扇贝的引种和子一代苗种培育

为将美国佛罗里达州产的墨西哥湾扇贝作为我国南海水域的养殖对象，于１９９１年１２月将壳高２．０－４．５ｍｍ的２２２个稚贝置于保温瓶内，控温在１５－１６℃，并每隔１－１．５ｈ充气数分钟，经３ｄ长途运输到青岛，稚贝全部成活。在室内控制条件下，培育至６月下旬，平均壳高达３３ｍｍ，性腺成熟，并采卵成功地培育出子一代。从子一代在海区养成的亲贝采卵分别在青岛，广西与福建培育出子二代。表明，从繁殖，生长等生物学判     

海湾扇贝体内一种球型病毒样颗粒及宿主细胞病理学

利用透射电镜对养殖中罹患“性腺萎缩症”的海湾扇贝（Argopecten irradians）做了观察,结果显示,在病贝的消化盲囊上皮细胞中感染有一种病毒样颗粒。该颗粒近球形,无囊膜,直径50～80nm。同时在细胞质内观察到许多泡状的包涵体以及病毒样颗粒的形成过程。受感染组织的病理学变化主要表现为细胞核染色质减少,核膜膨胀、部分溶解;内质网肿胀、核糖体脱落,线粒体嵴退化,溶酶体数量增多。     

海湾扇贝南移后繁殖期的变动

本文根据海湾扇贝的肥满度、肉柱百分数、性腺指数及消化脓指数等指标的周年变化，并结合性腺的组织切片来确定其繁殖期。结果表明，海湾扇贝南移后的繁殖期是从每年的10月下旬开始的，直到翌年5月下旬，其中4月为繁殖盛期。繁殖期间，扇贝的性腺分批成熟，分批排放，并有消退与恢复的现象。同时，海湾扇贝引进中国北方海区并南移福建后，其繁殖规律与原产地（美国大西洋沿岸）的繁殖期有很大的不同。     

不同浓度的KCI对海湾扇贝眼点幼虫附着变态作用的研究

本文在有附着基的条件下进行KCI溶液对海湾扇贝眼点幼虫的附着变态研究，并观察春成活情况。结果表明：KCI对眼点幼虫的诱导效应随KCI浓度和作用时间的增大而增大，但过高则抑制眼点幼虫的附着变态,而成活率则随浓度增加和处理时间延长而降低，其中30mmol/L效果最好。并进行了小型生产试验，效果较好。     

海湾扇贝(Argopecten irradians Lamarck)"性腺萎缩症"的组织病理学研究

利用组织学与组织化学染色方法,在光镜下研究了患"性腺萎缩症"海湾扇贝的组织病理学变化.结果表明,患病贝生殖细胞肿胀或萎缩,发育滞后;消化盲囊、鳃等器官组织也呈现明显的病理学变化特征,主要表现为结构紊乱,细胞变形、脱落甚至溃散,血细胞增生,出现强嗜碱性包涵体等异常结构.组织化学研究显示消化盲囊及消化道中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶含量下降;鳃、外套膜中多糖类物质含量增加等.     

海湾扇贝血细胞形态学比较研究

为给海湾扇贝的细胞免疫学研究提供基本依据,同时采用光镜和电镜技术观察海湾扇贝血细胞的形态特征,并进行血细胞酸性磷酸酶活性的初步分析.结果表明,海湾扇贝的血细胞可分为透明细胞和颗粒细胞2种类型.与透明细胞相比,颗粒细胞数目多,酸性磷酸酶活性高,细胞核呈肾形或卵圆形,核质比低,细胞质内颗粒状物质丰富,颗粒大小不一,可明显分为大颗粒细胞和小颗粒细胞2类.这些特征表明,海湾扇贝颗粒细胞和透明细胞的免疫学功能是明显不同的.     

扇贝糖胺聚糖提取和纯化方法研究──Ⅰ．提取方法研究

研究从海湾扇贝中提取扇贝糖胺聚糖的一种实用而有效的方法。提出用胃蛋白酶、胰蛋白酶和枯草杆菌中性蛋白酶结合的水解方法，并给出糖胺聚糖提取过程的工艺流程。     

扇贝氨基多糖的红外光谱分析

从海湾扇贝中提取出具有抗凝活性的氨基多糖，其中，氨基己糖含量为２２．６０％，己糖醛酸含量为２３．３０％，含硫量为６．６６％。样品经ＫＢｒ压片，于１０ＤＸ－ＦＴＩＲ红外光谱仪中进行光谱扫描，发现，该多糖具有典型的氨基多糖红外光谱，分子中含有－ＮＨ，－ＣＯＯ，－ＯＳＯ３＾－等氨基多糖特征基团。与氨基多糖标准品－肝素，６－硫酸软骨素和透明质酸的红外光谱进行比较分析，表明，扇贝氨基多糖与肝素的红外光谱相似     

中国北方海域扇贝重金属含量的比较与质量评价

于2005年10～11月在大连湾、秦皇岛、莱州湾、烟台、威海、胶州湾、胶南7个海域,进行了海湾扇贝(Argopecten irradians)和栉孔扇贝(Chlamys farreri)As,Hg,Pb,Cu,Zn5种重金属含量的调查。重金属含量的测定采用原子吸收法进行。结果表明:(1)重金属含量存在着组织差异性,贝边的含量高于贝柱;(2)取自同一海域的栉孔扇贝重金属含量高于海湾扇贝;(3)5种重金属的平均含量排序为:Zn>Cu>As>Pb>Hg;(4)胶州湾栉孔扇贝Zn有超标现象,贝柱和贝边中的含量分别是限量标准的1.24倍和1.59倍;Hg,Pb,As和Cu均未超标。     

海湾扇贝消化盲囊衣原体样生物的病理学研究

１９９２￣１９９５年研究了胶州湾养殖海湾扇贝消化盲囊内寄生的原核生物。光镜和电镜下可看到消化盲囊的组织病理变化和这种寄生物形成的包涵体。初步认为它是一种衣原体微生物,与近年来养殖海湾扇贝的大量死亡有密切关系。     

4种养殖扇贝的群体遗传多样性及特异性AFLP标记研究

应用AFLP技术对我国4种主要养殖扇贝进行了遗传分析.虾夷扇贝、海湾扇贝、华贵栉孔扇贝、栉孔扇贝4种养殖扇贝群体中,种内遗传相似度依次分别为0.841 5,0.786 3,0.719 0和0.673 1,香侬氏指数分别为43.52,58.87,80.16和92.83,栉孔扇贝和华贵栉孔扇贝的遗传多样性水平明显高于海湾扇贝和虾夷扇贝;AFLP标记共享位点分布表明,在4种扇贝中栉孔扇贝与华贵栉孔扇贝之间的共享位点最多,同时4种扇贝的种间遗传相似度也以栉孔扇贝和华贵栉孔扇贝之间为最高(0.769 5),海湾扇贝和虾夷扇贝之间为最低(0.662 6),揭示所研究的几种扇贝中栉孔扇贝和华贵栉孔扇贝的遗传关系最近(遗传距离为0.262 1);找到了21个种内特异性AFLP标记和种间共享标记,可用于种质鉴定和分子辅助分类.     

Effects of effective population size on the F2 growth and survival of bay scallop Argopecten irradians irradians(Lamarck)

In 2002, six cohorts ofbroodstock bay scallop Argopecten irradians irradians （Ne=1, 2, 10, 30, 50 and control） were randomly chosen from a population of bay scallop to produce offspring. After one year rearing, with the progeny matured, the similar experiment was done to produce the F2 generation. To determine the magnitude of Ne effects, the growth and survival rates in larvae and adult of six F2 groups were compared. Results showed that inbreeding depression existed not only in the Ne=1 group but also in the Ne=2 group. The growth and survival rates of the two groups were significantly lower than those of the other groups （Ne=10, 30, 50, control）, and there were no significant differences among the latter （P〉0.05）. At the same time, the amount of depression in the Ne=1 group was significantly higher than that of the Ne=2 group （P〈0.05）. These results indicated that the low effective population size （Ne）, which increases the possibility of inbreeding, could lead to some harmful effects on the offspring. So it is essential to maintain a high level of Ne in commercial seed production. Fta＇thermore, as the high fecundity of bay scallop might lead to increased inbreeding, selecting broodstock from different growout sites is recommended.     

海湾扇贝(Argopecten irradians)和太平洋牡蛎(Crasostreagigas)呼吸和排泄的研究

对海湾扇贝和太平洋牡蛎的呼吸和排泄进行了实验研究。结果表明,温度和贝的体重对两种贝类的耗氧率和氨排泄率都有明显的影响,且两因子间存在着交互作用。海湾扇贝的耗氧率（ＱＯ,ｍｇ／ｇ·ｈ）和氨排泄率（ＱＮ,μｇ／ｇ·ｈ）与温度（Ｔ,℃）和湿重（Ｗ,ｇ）存在下列关系：ＱＯ＝０．０４６Ｗ－０．２７２１．０８Ｔ,ＱＮ＝６．７９Ｗ－０．３２７１．０３Ｔ;太平洋牡蛎的耗氧和氨排泄率与温度、湿重存在下列关系：ＱＯ＝０．０８５Ｗ－０．１３０１．０６Ｔ,ＱＮ＝２．６６Ｗ－０．２３６１．０１Ｔ。