长毛对虾卵子发生的细胞化学研究

本文利用细胞化学的方法研究长毛对虾卵子发生中主要生物大分子:核酸、蛋白质、糖类及酶的变化特点,并探讨引起这些变化的原因.     

长毛对虾精子形成的超微结构

于１９９３－１９９４年在厦门海区采集长毛对虾雄性成虾,取其精巢,输精管和精荚,采用ＪＥＭ－１００ＣＸⅡ透射电镜观察长毛对虾精子形成过程的超微结构,并根据顶体形成过程中超微结构的变化进行分期。结果表明：长毛对虾精子形成过程分为早期精子细胞,中期精子细胞,晚期精子细胞及成熟精子四个时期。在早期精子细胞阶段,细胞质中含有丰富的粗面内质网,其周围分布着许多大小不一的囊泡,囊泡融合前顶体囊,囊内合成前顶体颗     

长毛对虾、短沟对虾和日本对虾的染色体研究

目前,利用高新技术,如实行生殖和遗传操作进行对虾品种改良的设想正在中国、美国、澳大利亚和日本等国加紧实施,但对虾遗传和生殖学研究尚欠深入,限制了这项研究的进展。其中对虾染色体知识的贫乏和研究技术的短缺就是突出的一例。     

长毛对虾杆状病毒病研究

近年我国沿海各省市养殖对虾发生了特大的暴发性流行病,造成了极大的损失.本文报道1993年长毛对虾(Penaeus penicillatus Alcock)暴发性流行病的症状与危害,在病虾中肠、肝胰腺上皮细胞的细胞核和细胞质中以及腹肌纤维间质细胞质等组织中发现了大量的无包涵体的具有囊膜的C亚群杆状病毒,描述了该病毒的分布和形态特征及其引起宿主细胞的主要病理变化等,而正常虾组织无这些情况,为一类新的病毒病.     

氨对长毛对虾幼体的毒性

氨对长对虾各期幼体的毒性试验表明：蚤状幼体对氨最每天敏感，而仔虾幼体对氨的耐受性最强，在盐度３２，ＰＨ８．２０，水温２９．０℃时，无节幼体Ⅱ期，蚤状幼体Ⅰ期，仔虾第五天２４ｈ的ＬＣ５０值分别为１３．２０（１．１５）、９．９７（０．８７）、２６．９９（２．３５）和６０．８１ｍｇ／ｄｍ＾３ΣＮＨ＾＋４（ＮＨ３）－Ｎ＾１（５．３０ｇｍ／ｄｍ＾３ＮＨ３－Ｎ）．Ｚ１，Ｍ１，Ｐ５的４８ｈ的ＬＣ５０值分别为５．     

池养长毛对虾体长与体重的关系

本文报道池养长毛对虾体长在６．８－１２３．９ｍｍ范围内的体长与体重的关系。池养长毛对虾雌、雄群体的生长特点是雌虾快于雄虾。由雌雄混合、雌虾、雄虾群体的体重对体长的相关曲线都很接近。     

常用药物对长毛对虾无节幼体变态的影响

近年来,随着对虾工厂化人工育苗的普及,在育苗生产过程中对虾幼体的疾病逐渐增多和日趋严重,我们以长毛对虾无节幼体作为材料,通过单种药物与混合药物不同浓度的试验,观察其幼体的变态速度、变态率、活力等,为对虾人工育苗使用药物提供参考。 1 材料与方法 1.1 材料     

亚硝酸盐对长毛对虾幼体的毒性

长毛对虾幼体从无节幼体至仔虾期对亚硝酸盐的忍耐性依次增强。在盐度３２，ｐＨ８．２０和水温２８±０．５℃的条件下，无节，蚤状，糖虾，仔虾２４ｈ的ＬＣ５０值分别为７．６３，１５．０９，２２．９２和６４．５８ｍｇ／ｄｍ＾３ＮＯ２２－Ｎ；蚤状，糖虾，仔虾４８ｈ的ＬＣ５０值分别为１１．９，１１．４１和３７．３４ｍｇ／ｄｍ＾３ＮＯ２－Ｎ；仔虾７２ｈ和９６ｈ的ＬＣ５０值分别为２２．９４和１３．８１ｍｇ／ｄｍ＾３     

金属离子对长毛对虾酸性磷酸酶的影响

本文研究几种金属离子分别对健康虾和病虾酸性磷酸酶ＡＣＰａｓｅ（ＥＣ３．１．３．２）活性的影响。结果表明,Ｎｉ＾２＋、Ｍｇ＾２＋、Ｃｄ＾２＋对酶无明显抑制作用,Ｚｎ＾２＋、Ｃｕ＾２＋、Ｈｇ＾２＋对酶活力抑制明显。当Ｈｇ＾２＋离子浓度达０．５ｍｍｏｌ／ｄｍ＾２时,酶活力被抑制９６％和９５％;各金属离子对酶的抑制强度依次为Ｈｇ＾２＋〉Ｃｕ＾２＋〉Ｚｎ＾２＋〉Ｐｂ＾２＋〉Ｃｄ＾２＋、Ｍｇ＾２＋〉Ｎｉ＾２＋     

长毛对虾酸性磷酸酶功能基因的研究（I）

采用某些化学修饰剂修饰长毛对虾酸性磷酸酶的活性功能基因。结果表明，精氨酸残基、组氨酸残基、赖氨酸残基是酶活性功能基团，当酶活力下降时，伴随着紫外吸收光谱及荧光发射光谱的变化，显示酶活力与构象密切相关。健康虾酶对修饰剂的敏感性大于病虾酶。     

长毛对虾复眼感受系统的光谱特性

本实验用长毛对虾(Penaeus penicillatus)于1984年3—5月捕自厦门附近海域。以Ag—AgC1电极记录非麻醉状态下复眼的视网膜电图(ERG),着重从ERG波形、光谱特性方面,研究长毛对虾复眼感受系统。结果表明:(1)长毛对虾复眼明视ERG波形具波长特异性,在白光和颜色光(478,625 nm)适应下,蓝色(461,490 nm)刺激光所引起的ERG波形均与红色(616,642 nm)刺激光所引起的波形有明显不同。(2)暗视光谱敏感曲线(S_2曲线)峰值位于520—540 nm之间,明视S_2曲线的峰值较暗视S_2曲线峰值向短波段偏移约50 nm。蓝色光(478 nm)适应的S_2曲线峰值位于570 nm附近,红色光(625 nm)适应的S_2曲线峰值位于480 nm附近。此外,在蓝(480 nm)或红(642 nm)背景光下,随着背景光的增强,复眼对单色光敏感性的变化率有所不同。上述结果说明,长毛对虾复眼具有峰值分别约为480和570 nm的两感受系统。     

我国海域耳鲍(Haliotis asinisne)精子发生的超微结构研究

应用透射电子显微镜技术研究了我国海域耳鲍精子发生的全过程。结果表明,耳鲍精原细胞呈近椭圆形,染色质分布较均匀,线粒体较少;初级精母细胞较大,染色质凝聚成小块状,线粒体增多;次级精母细胞较初级精母细胞小,线粒体较多,部分线粒体发生融合,呈扁囊状。分化早期精细胞染色质凝聚成团块状,多数贴附于核膜内面,胞质中出现前顶体颗粒。分化中期精细胞染色质继续凝聚成较大的团块,线粒体在核的一端融合,形成数量少、体积大的线粒体,前顶体颗粒形成圆形外膜明显的前顶体。分化后期精核由近圆形变成长桶状,核内染色质凝聚并均质化,前顶体泡化发育成顶体,鞭毛形成,精细胞分化成精子。成熟精子为鞭毛型精子,由头部、中段和尾部(鞭毛)3部分组成。     

人工培育长毛对虾亲虾的实验研究

长毛对虾(Penaeus penicllatus)是福建、广东、广西和台湾的重要经济虾类,其增养殖业目前所遇到的主要困难之一是亲虾的人工培育,这个问题不解决,该养殖业的发展将会受到影响。基于此,我们做了人工培育长毛对虾亲虾的实验,以求探索解决这一问题的途径。     

长毛对虾(Penaeus penicillatus)SNP标记开发及亲子鉴定技术研究

长毛对虾是我国南方沿海地区的重要经济虾类。近年来,由于过度捕捞、病害频发以及海洋环境恶化,长毛对虾的自然资源量大幅减少。为补充自然资源,改善种群结构,1980年我国开始对长毛对虾开展增殖放流工作。然而,增殖放流的效果如何,目前尚缺乏有效的评估手段。以长毛对虾为实验材料,通过对其基因组进行de novo测序和重测序开发SNP (single nucleotide polymorphism)标记,最终建立长毛对虾的亲子鉴定技术。具体研究结果如下:长毛对虾基因组大小为1 335.76 Mb GC (guanine cytosine)含量为40.86%,N50为1 221 bp;以组装的长毛对虾基因组为参考基因组通过重测序进行SNP挖掘,共获得12 579 780个原始SNP位点,经筛选,优化及模型选择,最终建立了基于192个SNP标记的长毛对虾亲子鉴定技术,亲子鉴定成功率为100%(95%的置信度)。研究结果可为下一步长毛对虾增殖放流效果评估提供参考。     

鹰爪虾精子形成的超微结构研究

于1997年6月在青岛附近海域集性成熟的鹰爪虾、采用电子显微镜技术对其精子的形成过程及形态结构特征进行研究。结果表明，鹰爪虾精子细胞产生于精巢的生精小管，在输精管内进一步发育，逐渐形成成熟的精子，许多精子在输精管内聚集成团，外包胶质膜，形成许多精子囊。精子入海水中不运动。鹰爪虾精子后部具有特殊的细胞质区，内含有大量囊泡及膜层体。棘突从体部前端横向伸出，由许多纤丝平行紧密排列组成，外包质膜。从雄虾精子囊中取出的精子与雌虾纳精囊内的精子在形态结构上没有明显差别。     

人工控制越冬长毛对虾卵巢成熟的初步研究

本文报道了以人工越冬的长毛对虾Penaeus penicillatus为材料,以切除亲虾单侧眼柄的方法配合适当的生态条件,给予优质的饵料和精心饲养管理,促进亲虾提前成熟产卵,并培育出虾苗。亲虾越冬的存活率为52.91％。手术后亲虾存活率和促熟率分别为65.74％和59.12％。手术后10天即有一尾亲虾促熟产卵,大批成熟产卵是在手术后第25天。产卵后的亲虾经过4—7天的培育又能恢复成熟多次产卵,最多的产4次。从亲虾初次所产的卵径大小、受精率、孵化率及幼体成活率都与海区亲虾相接近,唯有产卵量比海区亲虾少,这是因为人工养殖的越冬亲虾个体小,同时在人工饲养条件下远远不如自然海区的生态条件和营养条件等缘故。越冬期间的水温为13.8—16.5℃,海水比重1.020以上。促进卵巢成熟期间的水温为20.3—27.2℃,海水比重为1.017—1.021。投喂新鲜的贝类、小杂鱼虾,投喂量以第二天略有剩余为度。     

日本对虾溶血素的活性测定及性能研究

于1997年10－11月,以青岛市红岛养殖场养殖的日本对虾为材料,采用分光光度法对其血淋巴中的溶血素进行活性检测,研究多种理化因子对其溶血性能的影响,以及日本对虾溶血素经细菌和虫草多糖肌肉注射刺激后的活性变化。结果表明,日本对虾溶血素的活性同对虾的健康状况密切相关。该溶血累经60℃以下处理溶血作用有所增强,在pH=5－9时溶血活性最高,Ca2＋、Fe2＋可增强溶血作用。注射大肠杆菌（2×107cells／尾）和虫草多糖能够诱导日本对虾溶血素的产生,使溶血活性有所提高;而注射哈维氏弧菌（7×107cells／尾）会导致对虾发病,降低溶血素的活性。     

中国对虾(Penaeus chinensis)四倍体诱导研究

利用光控和行为学原理,控制中国对虾在适当时候产卵,在一定的时刻以温度休克和细胞松弛素的方法诱导受精卵发育成为四倍体。作者发展了对虾染色体制备技术,以中肠和触角腺、精巢为材料,从后期幼体直到8～9cm左右次成虾均获得较好的分裂中相。染色体倍性检测结果表明,最好的四倍体诱导成功率达66.7％。共获得10cm左右的实验对虾几千尾。初步观察表明,四倍体中国对虾具有一定的生长优势。     

中国对虾输精管结构及精子形成

采用激光扫描共聚集显微镜及电子显微镜技术，对中国对虾输精管结构及精子的形成过程进行研究。结果表明，中国对虾的输精管可分为近端、中间、远端输精管及壶腹4部分，输精管壁各部分的基本结构相似，但分泌结构的结构有较大的差别。输精管自中间膨大部开始，管腔逐渐被一隔膜分为大小不等的两部分，较大的腔内充满了很多精子，输精管较小的腔内充满胶体状物质，中国对虾精子细胞在精巢内产生，在两条输精管内逐渐发育，经过细胞质的分化并与精子外部进行物质的交换，形成顶体、亚顶体及棘突。核的变化则经历了染色质的解凝和核膜的消失，最后形成成熟的精子。