活的非可培养状态霍乱弧菌的复苏

将活的非可培养状态的霍乱弧菌（ＥＩＴｏｒ生物型）注入兔肠结扎段中，通过兔肠可以使休眠的霍乱弧菌复苏，恢复成为可培养状态．复苏的霍乱弧菌具有很强的毒力，使兔肠结扎段肿胀、积水、内壁紫红色并出现溃疡。结扎段积液中含有约１０９ｃｅｌｌｓ／ｍｌ细菌。     

霍乱弧菌的越冬方式—活的非可培养状态及其检测方法

霍乱弧菌是河口与海洋环境中自然微生物区系的成员。霍乱弧菌在诸如低温、低盐和低营养物浓度的不良环境条件下,可以变成非可培养状态。利用活菌直接镜检技术和免疫萤光抗体染色技术证明,霍乱弧菌是活的非可培养状态。实验还证明霍乱弧菌的越冬是通过活的非可培养状态实现的。     

细菌活的非可培养状态研究进展

细菌活的非可培养状态(Viable but nonculturable state,VBNC)是指某些细菌在不良环境中所形成的休眠状态,常规条件培养下不能繁殖,却仍然保持代谢活性。VBNC细菌的形态、生理生化、遗传特征等都会发生变化,且能在适宜条件下复苏为可培养状态。这一概念是1982年中国海洋大学徐怀恕在美国马里兰大学访问期间,与Rita R. Colwell等首次提出的,在国内外引起了极大反响和关注。迄今为止,国际上已发表VBNC相关论文10 800余篇。本文在这些文献的基础上,针对VBNC细菌近40年的研究成果进行系统阐述,包括VBNC细菌的发现、主要类群和诱导因素、形成机制、生物学特征、检测和复苏方法以及环境VBNC细菌的分离培养等。目前绝大多数海洋微生物尚未获得纯培养,对VBNC细菌进行复苏或将成为分离培养海洋环境中未培养微生物的重要手段。     

副溶血弧菌菌株1211U的活的非可培养状态

将副溶血弧菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）菌株１２１１培养于低温贫养条件下,以平板菌落计数法（ＰＣ）和最大近似数法（ＭＰＮ）检测可培养细菌数,５０￣６０ｄ后表明可培养数下降为零。吖啶橙荧光显微镜直接计数法（ＡＯＤＣ）检测细菌总数,表明细菌总数始终变化不大,而活菌直接计数法（ＤＶＣ）检测到的活菌数保持在１０＾５个／ｍｌ。本实验证明了副溶血弧菌１２１１Ｕ株在一定的条件下或进入活的非     

非可培养状态哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)复苏后生理特征及毒力相关基因表达

将哈维氏弧菌SF1接种在自然海水中低温诱导进入活的非可培养状态,用添加营养物质后升温培养的方法进行复苏。用透射电镜观察不同状态哈维氏弧菌细胞形态和结构,研究哈维氏弧菌复苏后对不良环境的抵抗力,用RT-PCR检测丝氨酸蛋白酶基因Ser和rpoS基因的表达。结果表明,进入VBNC状态的哈维氏弧菌由杆状变为球状,体积比正常细胞小,复苏后恢复正常形态且对紫外辐射,热激的抵抗能力没有明显改变,对高渗透压的抵抗力减弱,而对冷激的抵抗力增强。复苏后的哈维氏弧菌对抗生素的敏感性没有改变。用RT-PCR未检测到在VBNC状态时Ser和rpoS基因的表达,而在复苏后的细胞均检测到该基因的表达,可能是其保持致病性的重要原因之一。     

大肠杆菌O157:H7的活的非可培养状态

将大肠杆菌 O157:H7培养于低温贫养条件下 ,以涂布平板法 (PC)和最大近似值法(MPN)检测可培养细菌数 ,95～ 115d后表明可培养菌数下降为零。吖啶橙荧光显微镜直接计数法(AODC)检测细菌总数 ,表明细菌总数始终变化不大 ,而活菌直接镜检计数 (DVC)检测到的活菌数保持在 10 6个 / m L。实验证明了大肠杆菌 O157:H7在一定的条件下可进入活的非可培养状态(VBNC)。     

间接酶联免疫吸附技术检测活的非 可培养状态的大肠杆菌O157：H7

大肠杆菌O157H7在低温贫营养的条件下可进 入活的非可培养状态（Viable but nonculturable state,VBNC），用常规的培养法无法将其检出。作者利用间接酶联免疫吸附技术（Indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assa y, ELISA）检测VBNC的大肠杆菌O157H7，发现此方法可以快速有效地将其检出，最小检测 浓度为10     

海水鱼类病原弧菌对对虾的致病力及其疫苗的免疫预防

鱼类致病弧菌（溶藻弧菌Vibrio alginolyticus, 创伤弧菌V.vulnificus，河弧菌生物Ⅰ型V.fluvialis Ⅰ，鳗弧菌Ⅴ.anguillarum和副溶血弧菌Ⅴ.parahaemolyticus）同样可使斑节对虾Penaeus monodon患病，现对斑节对虾的致病性和免疫保护力作了研究。通过肌肉注射感染实验，发现5种弧菌对斑节对虾均有不同的致病作用。从5种弧菌中筛选出强毒株，以其制成福尔马林灭活疫苗。通过注射、浸浴和投喂等3种方式接种的斑节对虾，除投喂效果不明显外，注射和浸浴接种均有一定的免疫保护力。在注射接种组中，随着疫苗浓度的提高，其免疫力有升高的趋势。说明在鱼虾的弧菌病中，疫苗能起到共同的防御效果，为商用鱼虾疫苗的生产提供了可能。     

我国某些红树植物花粉形态研究及其古环境意义

对我国11科11属14种（除红树科和海桑属之外）红树植物花粉形态作了光学显微镜的各种数据测定，并在扫描电镜下观察和摄片研究。这14种红树植物花粉是海榄雌，水芫花，水椰，榄李，红榄李，银叶树，小花老鼠勒，老鼠勒，海漆，杨叶肖瑾，玉蕊，桐花树，尖叶卤蕨，卤蕨，红树植物是热带-亚热带海岸潮间带的一种特有的指示植物，根据沉积物中出现的红树植物花粉种类和数量，可推测海滨红树林的演化，海面升降，海岸线变迁，追溯古海流和沉积物来源。     

大黄鱼溶藻弧菌病细胞病理变化的初步研究

对患有典型弧菌病症状的养殖大黄鱼（Pseudociaena crocea)的主要组织进行了细胞病理研究,结果显示,患病鱼的肝、肾、脾等组织细胞均出现程度不同的坏死现象,严重时整个细胞呈溶解状态。在此基础上对该病的致病机理和致死原因进行了探讨。     

不同渗透压下美国红鱼外周血细胞超微结构的变化

采用电子显微镜技术研究了不同渗透压条件下美国红鱼外周血细胞超微结构的变化。在海水中,红细胞为长椭圆形,核较小,无细胞器;淋巴细胞呈不规则圆形,核大,有伪足;单核细胞胞胞质中有少量的线粒体,核大且不规则;血栓细胞多呈泪滴状或纺锤状;粒细胞分为Ⅰ型和Ⅱ型粒细胞,Ⅰ型粒细胞中具有较多高电子密度的颗粒,Ⅱ型粒细胞中有密集的细管样结构。在淡水中,各类血细胞的核膜均有不同程度的水肿现象,红细胞核略有膨胀;淋巴     

用流式细胞仪研究秋茄叶肉细胞大小和叶绿素含量与海水盐度的关系

采用离析的方法,应用流式细胞仪研究福建九龙江河口北岸不同地段秋茄(Kandelia candel)成熟叶片的叶肉细胞大小和叶绿素含量与海水盐度之间的关系。结果表明：叶肉细胞的大小和细胞内叶绿素含量与海水盐度的关系都呈倒“Z”字形,单位体积叶肉组织叶绿素含量与海水盐度的关系呈“N”字形。其中海水盐度为10时,秋茄单位体积叶肉组织叶绿素含量最高,细胞表面积、光合面积最大;海水盐度8～10时,随着盐度升高,单位体积叶肉组织叶绿素含量、细胞表面积向有利于提高光合强度方向发展;海水盐度在10～23时,随着盐度的升高,单位体积叶肉组织叶绿素含量、细胞表面积逐渐减小,朝提高抗盐性方向发展。从形态学的角度为阐明红树植物耐盐机理提供了资料。     

鹧鸪菜组织和细胞培养的研究Ⅳ.藻体任意碎片的培养与损伤藻体再生的观察

把鹧鸪菜藻体切成大小不同的切段、以及任意切碎,培养于添加氮、磷素的消毒海水中,后者分10℃、15℃、20℃、25℃四种不同温度条件培养,结果全部切段、切碎片都很快再生出假根附着于基质,并再生出一至多个叶状体;叶状体长大后从基部长出新的假根成为完整的幼苗(再生苗)。试验表明,大的切段其再生苗生长快、长度大,但出苗率(一定长度的藻体长出再生苗数量)低。培养温度较高时(20—25℃),藻体任意切碎片再生速度快、附着速度快、数量多且较牢固。利用藻体切碎片来培养鹧鸪菜幼苗是可行的;培养的适宜温度为20℃以上、海水比重为1.010左右。本文还对鹧鸪菜损伤藻体再生的情况(繁殖生殖学)进行一些观察和描述。