对虾病毒病暴发前期病毒和弧菌相互作用关系

模拟天然继发感染研究对虾病毒病暴发前期病毒和弧菌的关系。结果显示,弧菌先感染再病毒感染组比病毒先感染丙弧菌感染组死亡率高、死亡快、生长慢、免疫功能低下。表明弧菌的潜伏感染对病毒的增殖有利,而病毒的潜伏感染对弧菌的继发感染没有明显的促进作用。说明病毒性流行病的暴发前期可能是由弧菌先感染,使对虾体内环境发生变化而助长病毒感染,其中对虾的免疫力下降是关键。     

溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾白斑综合征病毒的抑制作用

从患病凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)体内提取白斑综合征病毒(WSSV),PCR证实WSSV毒性,将病毒粗提液稀释10-2、10-3、10-4和10-5倍,攻毒实验表明,最佳攻毒剂量为10-4倍稀释液。对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)分别注射0.05、0.10、0.15 mg/m L的溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)肽聚糖,免疫24 h后感染WSSV,测定其免疫保护率和肝胰腺的免疫学指标,探讨溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾抗WSSV的影响。结果表明:对虾的保护率随着肽聚糖的浓度增大而增大,与对照组相比,0.05、0.10、0.15 mg/m L组的保护率分别为36.67%、46.67%、56.67%;实验组凡纳滨对虾肝胰腺中的酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮合成酶(NOS)活力与对照组相比的差异有统计学意义(P0.01)。溶藻弧菌肽聚糖可有效增强凡纳滨对虾自身的非特殊性免疫能力,提高抗WSSV的能力。     

凡纳滨对虾和斑节对虾对WSSV敏感性的比较

用6.0×104拷贝、1.2×104拷贝和6.0×103拷贝3种剂量白斑综合症病毒(WSSV)对凡纳滨对虾和斑节对虾进行人工注射感染,比较了两种对虾对WSSV敏感性的差异。结果表明,凡纳滨对虾死亡时间随病毒剂量降低而延长,斑节对虾死亡时间没有明显差异;随病毒剂量的降低,凡纳滨对虾人工注射感染后病毒复制高峰时间显著延长,斑节对虾感染后病毒复制高峰时间相同,WSSV在凡纳滨对虾体内比在斑节对虾体内复制慢。对虾携带WSSV数量最低为3.3×107拷贝.g-1,最高为4.3×108拷贝.g-1。凡纳滨对虾比斑节对虾对WSSV的抵抗性更强。     

溶藻弧菌肽聚糖和vp28-siRNA对凡纳滨对虾白斑综合征病毒的抑制作用

对感染白斑综合征病毒(WSSV)的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)分别注射0.05和0.10μg/μL的vp28-si RNA,干扰效果实验表明,si RNA最佳浓度为0.10μg/μL。凡纳滨对虾感染WSSV 24 h时注射0.10μg/μL的vp28-si RNA,检测免疫后不同时间点的干扰效果。结果表明:在注射vp28-si RNA 6 h后,实验组与对照组WSSV病毒拷贝数差异有统计学意义(P0.05);在48 h时实验组病毒拷贝数急剧下降,对照组则保持较高水平,可较好干扰WSSV病毒复制,干扰效果持续120 h,对凡纳滨对虾的保护率为40%。凡纳滨对虾用0.10 mg/m L肽聚糖(Peptidoglycan)免疫24 h后感染WSSV,检测6、12、24 h注射vp28-si RNA的保护率。结果显示:6 h注射组的保护率为80%,12 h注射组为63.33%,24 h注射组为56.67%。凡纳滨对虾在肽聚糖和vp28-si RNA作用后,可增加其对WSSV抗感染作用,降低死亡率,干扰时间越早,对对虾的保护率越高。     

溶藻弧菌疫苗对凡纳滨对虾免疫功能的影响

应用溶藻弧菌疫苗饲喂凡纳滨对虾,测定了弧菌疫苗对凡纳滨对虾免疫指标的影响以及 疫苗的免疫保护作用。结果发现,投喂弧菌疫苗后,溶菌活力在12～20d内迅速增强,在20d时 活力达到最高,VF1组高于VF2和VF3组,但VF2和VF3之间差异不显著;凝集效价在投喂后的 第8天开始升高,在14d时达到最高,实验组的凝集活力均高于对照组,但实验组之间无明显的差 异;而超氧化物歧化酶(SOD)活力和溶血活力变化不明显。以每克饲料含疫苗细胞1.0×109、 1.0×108和1.0×107个的浓度投喂,对凡纳滨对虾的免疫保护率分别为66.7%、46.7%和13.3%。 可见弧菌疫苗对凡纳滨对虾的免疫保护率随疫苗浓度的增大而升高。     

溶藻弧菌对凡纳滨对虾血清中一氧化氮及氧自由基的影响

对凡纳滨对虾注射浓度为1×105、1×106、1×107mL-1的溶藻弧菌悬液,在注射后4、12、24、48、72和120 h于腹血窦取血,测定其血清中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量,以及一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物岐化酶(SOD)活力。结果表明,注射溶藻弧菌后,凡纳滨对虾血清中NO含量及NOS活力显著高于对照组,且NOS活力最大值出现时间较NO早;而SOD活力先升高后下降,MDA含量在SOD活力开始下降后逐渐升高,说明一氧化氮系统对凡纳滨对虾感染的溶藻弧菌有清除作用,并能在一定程度上对损伤过程中生成的氧自由基产生作用。     

溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾虾青素、免疫指标及保护率的影响

从溶藻弧菌中提取肽聚糖,以0.05、0.1、0.15 mg/mL 3种浓度为注射凡纳滨对虾后,测定血淋巴中的血细胞数目、酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合成酶(NOS)的活性和虾青素的含量,探讨溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾虾青素含量、免疫指标、免疫保护率的影响。结果表明:注射不同质量浓度的溶藻弧菌肽聚糖都对血清中的血细胞数目、PO、SOD、NOS活性影响显著(p值﹤0.05),对虾青素的含量影响极显著(p值﹤0.01);虾青素的含量与血细胞数目、PO、NOS活性变化趋势无明显的相似性,与SOD活性变化有相似的变化趋势;0.05 mg/mL组的免疫保护率为40%,0.1 mg/mL组为53.33%,0.15 mg/mL组为66.67%。溶藻弧菌肽聚糖可有效地增强凡纳滨对虾非特异免疫力,提高对溶藻弧菌的抗病力,虾青素含量与SOD活性的高低变化趋势相似。     

对虾白斑症病毒(WSSV)部分克隆片段的序列测定及PCR扩增

对克隆的 WSSV基因组 Xba 1.8kb片段进行序列测定 ,根据所测定的核酸序列 ,通过计算机软件分析 ,设计出一对 PCR引物。所设计的 PCR引物能从纯化 WSSV及患白斑症的对虾组织中扩增出长为 92 1bp的目的 DNA片段 ,并且能检测出 0 .2～ 0 .4μg病虾肌肉组织中的 WSSV。健康对虾、感染MBV的斑节对虾仔虾及 SINPV的扩增结果均为阴性。表明所建立的 WSSV PCR检测法灵敏而且特异。     

“克毒丹”和“虾丹特”提高斑节对虾成苗率的初步探讨

１９９３年,全球虾病大流行,使虾产量下降１２％,而我国虾病则从南到北发生了空前的大暴发,致使年产量大幅度地下降了一半以上［１］,因而养虾业遭受惨重损失。据分析,这次虾病流行的原因主要有：工农业和生活污水污染沿海,使养虾业直接受害;虾池老化,自净能力较差;对虾育苗滥用抗菌素,致病菌因而获得抗药性;更为严重的是,有多种病毒性病原侵害对虾苗种和成虾,致使对虾的抗病机能减弱,当减弱到一定的程度时,加上环境、水质、营养和细菌等不良因素,使虾病暴发,在短时间内遭受毁灭性的打击。目前,已发现的对虾病毒共１０余…     

Interaction of Haematopoietic Tissue Cultures of the Dublin Bay Prawn,Nephrops Norvegicus(L.),with the Causal Agent of Luminous Vibriosis Vibrio Harveyi

Vibrio harveyi cells (dose = ＞ 103 cells mL 1) and extracellular products (ECP; ＞25μg m L-1 of total protein concentration) destroyed haematopoietic cultures of Nephrops norvegicus within 24 h of exposure. Cytopathic effects (CPE)started after 4 h of exposure to the bacterial cells, with some granularity in the cytoplasm, mostly in cells in the outer periphery of the explant growth. At the end of the infection, a considerable number of nuclei remained attached to the substrate,apparently unaffected. Following exposure to ECP, initial deterioration was observed at 2 h with the presence of granularity in the cytoplasm of＜ 20% cells, and few cells displayed small vacuoles around the nuclei. Parallel results were obtained using whole animal experiments, with V. harveyi cells being lethal to nephrops within 24 h.     

Interaction of haematopoietic tissue cultures of the Dublin Bay Prawn, Nephrops norvegicus (L.), with the causal agent of luminous vibriosis Vibrio harveyi

Vibrio harveyi cells (dose—<10³ cells mL⁻¹) and extracellular products (ECP; >25 μmg mL⁻¹ of total protein concentration) destroyed haematopoietic cultures of Nephrops norvegicus within 24 h of exposure. Cytopathic effects (CPE) started after 4h of exposure to the bacterial cells, with some granularity in the cytoplasm, mostly in cells in the outer periphery of the explant growth. At the end of the infection, a considerable number of nuclei remained attached to the substrate, apparently unaffected. Following exposure to ECP, initial deterioration was observed at 2 h with the presence of granularity in the cytoplasm of<20% cells, and few cells displayed small vacuoles around the nuclei. Parallel results were obtained using whole animal experiments, with V. harveyi cells being lethal to nephrops within 24 h.     

Studies on the ingestion characteristics of giant freshwater prawn, Chinese prawn and giant tiger prawn

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＡｔｐｒｅｓｅｎｔｇｉａｎｔｆｒｅｓｈｗａｔｅｒｐｒａｗｎ (Ｍａｃｒｏｂｒａｃｈｉｕｍｒｏｓｅｎｂｅｒｇｉｉ) ,Ｃｈｉｎｅｓｅｓｈｒｉｍｐ (Ｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ)ａｎｄｇｉａｎｔｔｉｇｅｒｐｒａｗｎ (Ｐ .ｍｏｎｏｄｏｎ)ａｒｅｔｈｅｍａｉｎｓｈｒｉｍｐｓｆｏｒｃｕｌｔｕｒｅｉｎＣｈｉｎａ.Ａｓｗｅｋｎｏｗ ,ｆｅｅｄｓｔｕｆｆｃｏｓｔｉｓａｍａｊｏｒｅｘｐｅｎｓｅｉｔｅｍｉｎｃｕｌｔｕｒｅｐｒａｃｔｉｃｅ.Ｏｖｅｒｆｅｅｄｉｎｇｗｉｌｌｎｏｔｏｎｌｙｗａｓｔｅｆｅｅ…     

无菌人工养殖海水中副溶血弧菌噬菌体与宿主的消长动态

在3组一定浓度的副溶血弧菌菌液中分别加入3种浓度的副溶血弧菌噬菌体,第12天各实验组再次分别加入一定浓度的副溶血弧菌或副溶血弧菌噬菌体,比较各组水体中副溶血弧菌噬菌体及其宿主的动态关系。结果表明,副溶血弧菌噬菌体可使宿主下降至一定浓度并与之保持动态平衡关系,实验组1、2、3中副溶血弧菌浓度从2.43×106 mL-1分别下降至6.2×104、9.2×104、7.46×105 mL-1,并以此浓度范围维持下去。高浓度副溶血弧菌噬菌体与其宿主之间平衡关系的稳定性较好,再次加入副溶血弧菌,高、中浓度组分别在1 d和4 d后副溶血弧菌下降至平衡时的数量级浓度,并持续下去。低浓度组副溶血弧菌组有所上升,并持续下去。再次加入副溶血弧菌噬菌体对副溶血弧菌浓度影响较小(P>0.05)。     

壳多糖对罗氏沼虾、斑节对虾苗生长和抗菌防病作用研究

探讨壳多糖（chitosan）对虾苗的生长和抗菌防病的作用。用玻璃缸培育罗氏沼虾和斑节对虾苗,在水体中添加不同浓度的壳多糖,人为感染气单胞菌或弧菌,观测虾苗的生长和抗病情况。结果表明：（1）在培养水体中加入壳多糖（50×10-6）能净化水质,防止水质恶化,因而可进行不换水育苗;（2）壳多糖（25×10-6～100×10-6）可抑制气单胞菌和弧菌的生长繁殖,增强抗病能力,提高虾苗的成活率;（3）适宜浓度25×10－6～50×10-6）的壳多糖对虾苗的生长有促进作用。     

Influence of dietary probiotic Bacillus TC22 and Prebiotic fructooligosaccharide on growth, immune responses and disease resistance against Vibrio splendidus infection in sea cucumber Apostichopus japonicus

The effects of probiotic Bacillus TC22 (isolated from intestine of infected sea cucumber) and prebiotic fructooligosaccharide (FOS) on growth, immunity and disease resistance in sea cucumber Apostichopus japonicus were studied. Six experimental diets were formulated with combinations of three levels of TC22 (0, 107 and 109 CFU g-1 diet) and two levels of FOS (0 and 0.5%) in a 3 × 2 factorial experiment. At the end of the 8-week feeding trial,animals were challenged by injecting Vibrio splendidus. The results revealed that the specific growth rates (SGR) of sea cucumbers were not affected by TC22 and FOS, or the interaction between TC22 and FOS (P > 0.05). However,there were significant interactions between TC22 and FOS for immune response and disease resistance in sea cucumbers (P < 0.05). When sea cucumbers were fed with TC22 at 109 CFU g?1 feed and 0.5% FOS alone or in combination, the phagocytosis, respiratory burst and phenoloxidase activity of sea cucumber coelomocytes were significantly enhanced;the disease resistance against V. splendidus infection was also increased significantly (P < 0.05).However, dietary combination of TC22 at 109 CFU g-1 diet and 0.5% FOS did not yield significantly higher efficiency than either TC22 at 109 CFU g-1 diet or 0.5% FOS used alone (P > 0.05). Therefore, further studies should examine the effects of combinations of other levels of FOS(> 0.5% or < 0.5%) and TC22 on the immunity and disease resistance of sea cucumbers.     

鳖甲溃疡和穿孔病的病原及其防治

对鳖甲溃疡和穿孔病的病原进行了研究,提出了勒氏假单胞菌（Pseudomonaslemoignei）、产碱菌（Alcaligenessp）和枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）3种病原菌;同时在病原药敏试验的基础上筛选治疗药物（鳖康乐1号）,并进行了生产性防治试验。     

降温降水对池塘水环境影响及诱发鳜鱼疾病的研究

探讨气候变化（降水、降温）与养殖鳜鱼（Ｓｉｎｉｐｅｒｃａ ｃｈｕａｓｔｓｉ）池溏主要水生态因子关系问题。结果表明,降水、降温会引起藻类种群的改变,进而溶氧变化,最终影响鱼的健康,低溶氧是诱发鳜鱼疾病的首要水化因子。所以,气侯变化是生态因子变化继而诱发鳜鱼疾病的催化剂。水中营养盐浓度影响藻类生长。