贻贝发育早期酯酶和过氧化物酶活性

采用组织化学和分光光度技术对贻贝(Mytilus edulis)发育早期酯酶(Esterase,EST)和过氧化物酶(Per-oxidase,POD)活性进行了研究,以探讨贝类早期发育过程中的免疫防御机制。EST和POD均存在于贻贝的卵母细胞、胚胎和幼虫中,但在各个发育时期的分布和含量不同。组织化学定位结果表明,从卵母细胞到D型面盘幼虫各个发育时期的胚胎和幼虫均呈EST强阳性和POD阳性;卵母细胞核区较大且颜色较浅;桑椹期开始出现不同细胞阳性的强弱差异;原肠胚、担轮幼虫和D型面盘幼虫细胞间阳性强弱的差异逐步增大。分光光度测定结果表明,α-醋酸酯酶活力,卵母细胞最低,受精卵略有提高,卵裂期胚胎提高较大且达最高峰,囊胚、原肠胚和担轮幼虫又逐渐下降,D型面盘幼虫下降较大;α-丁酸酯酶活力,卵母细胞较高,受精卵略有提高且达到最高峰,卵裂期胚胎到D型面盘幼虫各个时期逐渐下降,D型面盘幼虫最低。不依赖卤素POD活力,卵母细胞最低,受精卵提高较大,囊胚达到最高峰,原肠胚、担轮幼虫和D型面盘幼虫逐渐降低。依赖卤素POD活力与不依赖卤素POD活力的变化规律相似,但受精卵提高较小,而卵裂期提高较大。EST和POD可能在贻贝的发育早期抵抗病原微生物侵染方面发挥重要作用。     

中国鲎的生殖习性和早期胚胎发育

本文首次详细报道了中国鲎(Tachypleus tridentatus)的产卵季节、产卵场条件、产卵方式、怀卵量及排卵量。中国鲎卵径有季节变化,此与国外报道有所不同。中国鲎的卵裂属全裂到表裂的一种过渡形式,最先在有假分裂沟的一极开始卵裂,分裂核不断增加数目并从卵黄中外移,然后分别与所在部分卵质共同形成一层分裂球居于胚的表面,形成胚膜,被此细胞层包围在内的许多呈多角形细胞相当于昆虫卵裂期的“卵黄细胞”,卵裂结果形成表裂囊胚。胚基发生位置决定于卵内细胞核分裂后向表面移动和聚集的方向以及细胞质在卵子皮质分布情况,并非固定于卵子呈扁平的一侧。本文应用活体染色法就染色粒的性质作了初步探索并就胚体在染色后发生死亡的原因和正式卵裂开始前出现假分裂沟问题作了初步分析。     

我国的鱼类细胞核移植??

鱼类作为水产养殖业的一大支柱品种 ,其良种培育对提高鱼类产量至关重要。我国是鱼类养殖历史最悠久的国家之一 ,向来重视应用生物技术对养殖品种进行改良 ,其中最好的例子之一就是利用细胞核移植技术来创造鱼类优良品种。即使在生物技术不断发展的今天 ,这一细胞核移植技术在鱼类新品种培育方面仍是一项很有潜在应用价值的技术。特别是把细胞核移植技术与现代生物技术相结合 ,有望创造出具有巨大经济价值的鱼类新品种。１我国鱼类细胞核移植的成果细胞核移植是一种应用精细的显微操作 ,将一种动物的细胞核移植到同种或异种动物的去核成熟卵…     

用mRNA差异显示技术分析中华绒螯蟹早期发育的基因表达

用中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis)未受精卵、受精卵、二细胞胚、囊胚、原物胚为材料，提取总RNA，分别用Oligod T12GA、GC、AC3种锚定引物合成以上5种材料的cDNA第一链，然后以此cDNA为模板用30种随机引物进行PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳分析。得出了5个早期发育的特异表达片段。结果表明，未受精卵、受精卵、二细胞胚之间的差异不大，都表面为母型调控，囊胚期有新mRNA的转录，开始进入合子型调控。     

皮层蛋白和Arp2/3蛋白复合物在文昌鱼原肠期胚胎表达图式的分析

脊椎动物胚胎发育过程中,经卵裂和囊胚期积累了一定数量的细胞后,在原肠期开始出现明显的细胞运动,囊胚表层的细胞通过一个称为组织者(Spemann and Mongald'sorganizer)的结构进入胚胎的内部,经过内陷、内卷、汇聚、延伸等一系列细胞运动,按照既定的方向迁移到达目的地,参与构建各个胚层,这一过程称为形态发生运动。形态发生运动是脊椎动物胚胎发育必不可少的重要步骤,在这一过程中,特定的单个细胞或成群细胞的定向迁移,对于三个胚层(外胚层、中胚层、内胚层),以及由这些胚层所产生的特定组织器官的发育与分化,具有决定性影响。     

贻贝(Mytilus edulis)发育早期酸性和碱性磷酸酶活性

采用组织化学和分光光度技术对贻贝卵、胚胎和早期幼虫酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性进行了定位和定量研究,以探讨贝类早期发育过程中的免疫防御机制。组织化学显示,从卵细胞到D型面盘幼虫各个时期都呈ACP和AKP阳性,卵细胞中阳性颗粒较大且分布比较均匀,受精卵中央着色较深,卵裂期核区呈强阳性且大分裂球内阳性颗粒较多,原肠胚和担轮幼虫外层细胞阳性较强,面盘幼虫外套膜边缘膜、内脏团和面盘基部呈强阳性。生化测定ACP和AKP活力,均是卵细胞最低,随着发育酶活力逐步提高,其中ACP活力在受精后和囊胚期明显提高,囊胚期达到最高峰,其后又略有下降;AKP活力在卵裂期、担轮幼虫和面盘幼虫提高较大,面盘幼虫期酶活力最高。ACP和AKP可能在贻贝的发育早期抵抗病原生物侵染方面发挥重要作用。     

毛嵌线螺的研究Ⅰ.繁殖及幼虫发生特征

毛嵌线螺(Cymatium pileare)的繁殖过程包括交配、产卵、孵育及幼虫从卵囊中游出等4个阶段。交配一般在产卵前10～15d进行,产卵后母体并不离开卵群,而是持续静伏在卵群的开口上进行孵育,直至其中的幼虫离开卵囊。温度和盐度对毛嵌线螺受精卵的发育有重要影响,在22～30℃的适宜温度区域内,将受精卵孵育成能自由生活的晚期面盘幼虫需438日度左右的总积温。毛嵌线螺受精卵的发育与其他前鳃类腹足动物相似,包括卵裂、囊胚期、原肠期及面盘幼虫期4个阶段。     

哲罗鱼(Hucho taimen)卵巢滤泡细胞发生的超微结构研究

采用透射电镜技术,进行了哲罗鱼卵巢滤泡细胞发育的研究.结果表明,哲罗鱼滤泡细胞发育分为5个时期:零散滤泡膜细胞期、单层扁平滤泡膜细胞期、多层扁平滤泡膜细胞期、颗粒细胞分泌期和颗粒细胞退化期.滤泡细胞经卵巢基质细胞分化,由卵巢边缘经“穿梭包围运动”将卵母细胞包裹.早期滤泡细胞在卵母细胞外侧呈连续单层排列,并不具备任何功能,随着卵母细胞发育,滤泡细胞分化成具有功能性的三层结构,随后滤泡细胞协同卵母细胞合成部分卵膜.当卵黄积累旺盛时,滤泡细胞参与了外源性卵黄物质的运输、加工和修饰,鞘细胞间大量的微丝具有协助卵巢排卵的作用.在卵巢排卵后,滤泡细胞与未发育的卵母细胞形成闭锁卵泡,对卵细胞残体和碎片还具有吞噬、消化等作用.     

毛嵌线螺的研究Ⅰ.繁殖及幼虫发生特征

毛嵌线螺（ Ｃｙｍａｔｉｕｍ ｐｉｌｅａｒｅ）的繁殖过程包括交配、产卵、孵育及幼虫从卵囊中游出等４个阶段．交配一般在产卵前１０～１５ｄ进行,产卵后母体并不离开卵群,而是持续静伏在卵群的开口上进行孵育,直至其中的幼虫离开卵囊．温度和盐度对毛嵌线螺受精卵的发育有重要影响,在２２～３０℃的适宜温度区域内,将受精卵孵育成能自由生活的晚期面盘幼虫需４３８日度左右的总积温．毛嵌线螺受精卵的发育与其他前鳃类腹足动物相似,包括卵裂、囊胚期、原肠期及面盘幼虫期４个阶段．     

虾夷扇贝TET基因在配子发生和早期发育中的表达模式

DNA甲基化参与调节动物配子发生和胚胎发育过程,TET基因负责DNA主动去甲基化,在基因印迹去除和细胞全能性获得中起重要作用。为了解海洋贝类配子发生和胚胎发育过程中DNA去甲基化如何发生,本研究以虾夷扇贝为研究对象,鉴定了其TET基因,并分析了该基因在性腺和胚胎幼虫发育中的表达变化。结果表明,虾夷扇贝基因组中含有1个TET基因(PyTET),该基因长39127 bp,包含10个外显子,编码1592个氨基酸,其蛋白具有完整的2OGFeDO超家族的加氧酶结构域。在性腺发育过程中,PyTET基因表达峰值出现在休止期精巢和增殖期卵巢,原位杂交结果显示其在精原细胞、精母细胞中均有表达,在卵母细胞中的表达明显高于卵原细胞;在早期发育过程中,其峰值出现在囊胚期。以上结果提示虾夷扇贝配子发生和胚胎发育过程中均发生了DNA主动去甲基化,这将有助于系统了解表观调控在贝类发育中的作用。     

中国明对虾囊胚和原肠胚细胞的分离和培养

尝试了多种方法分离中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)囊胚细胞和原肠胚细胞并进行了细胞培养.结果表明,解剖法适用于囊胚细胞,自行设计的压片法适用于原肠胚细胞.在培养起始阶段,通过降低血清浓度和缩小培养体系可使中国明对虾囊胚细胞和原肠胚细胞迅速贴壁并铺展,囊胚细胞铺展后有明显的生长晕,中后期原肠胚细胞较易达到半汇聚状态.值得注意的是,中国明对虾囊胚细胞在不同培养液中培养可发生形态上的分化.本实验方法有望用于对虾细胞分化机理和对虾细胞建系的研究.     

金鱼单尾鳍形成的研究

于1984—1985年应用PEG(聚乙二醇)浸泡不同发育时期的金鱼卵子,运用UV(紫外线)辐射卵子植物性半球卵质,进行尾鳍发育实验。结果表明,两种处理方法均可以导致双尾鳍金鱼变成单尾鳍鱼。在5％—18％PEG溶液中浸泡96h,单尾鳍形成率为16％—83.3％;UV辐射10—20min,单尾形成率为40％—66.7％。作者认为,是PEG和UV影响卵子中某些细胞质而诱导金鱼产生单尾鳍的。为此,可以提出一个假说,即金鱼卵子中存着一种调控物质,这种物质一旦被损伤、切除,便导致单尾鳍的形成。此种物质位于植物性半球之中,它随着胚胎的发育而流向胚盘。实验表明,性状的表达为细胞质所控制。     

魁蚶母源大防御素在子代发育早期的动态变化

母源免疫因子能够通过卵细胞、母乳等方式转移给子代,在免疫系统发育成熟之前发挥重要的免疫保护作用,但贝类中的相关报道较少。为探索贝类非特异性免疫因子在子代发育早期的表达规律,本研究以魁蚶(Scapharca broughtonii)为研究对象,通过qRT-PCR和ELISA分析了大防御素在魁蚶胚胎及幼虫早期发育过程中mRNA和蛋白质的动态变化特征。结果显示,魁蚶卵子受精后发育至壳顶幼虫期,大防御素mRNA和蛋白质的表达变化趋势基本相同,即从受精卵期开始下降,至囊胚期最低,自担轮幼虫期表达量开始上升;与对照组相比,幼虫发育至担轮幼虫期,鳗弧菌(Vibrio anguillarum)处理组的大防御素升高更为显著,mRNA和蛋白的表达水平都基本高于对照组,说明鳗弧菌刺激能够上调担轮幼虫期后魁蚶幼体体内大防御素的表达量。总的来说,研究结果表明魁蚶母源性大防御素能够通过卵子传递给后代,从卵细胞受精后开始被消耗,当幼虫发育至担轮幼虫可能开始自身合成。     

人工养殖条件下多齿围沙蚕亲体培育和繁殖生物学的初步研究

通过生态学及组织学方法对人工养殖条件下多齿围沙蚕(Perinereis nuntia Savigny)亲体培育条件及繁殖生物学进行了研究.结果表明,多齿围沙蚕雌雄异体,非成熟季节外观上无法辨别雌雄,性成熟时,雌(异沙蚕体)灰绿色,雄(异沙蚕体)红白色.生殖细胞起源于体腔膜上皮,不久就释放到体腔中,在体腔内卵原细胞和精原细胞http://ebook/成都,今夜请将我遗忘/index.htm分裂增殖形成卵原细胞群和精原细胞群,体腔中充满了外形不规则或近圆形的滋养细胞,细胞内可见嗜伊红颗粒,滋养细胞之间可见发达的微血管.卵原细胞群不断增殖发育,至初级卵母细胞后游离至体腔中继续发育为次级卵母细胞和成熟卵子;精原细胞群形成精子合胞体(syncytium),各级精母细胞在合胞体内发育,直至形成成熟精子时才分散游离.水温18℃以上,多齿围沙蚕的生长体经培育才可能形成异沙蚕体.特别是在经历了一定的低温期后,再提高温度可以有效的促进异沙蚕体形成.胚胎发育的适宜温度为18～25℃;适宜盐度为25～32.胚胎发育过程经历卵裂期、囊胚期、原肠期、担轮幼虫期、后担轮幼虫期、膜内游毛幼虫期等阶段,在水温25℃、盐度30条件下,从受精至孵出3刚节幼虫约需65 h.3刚节游毛幼虫至10刚节幼体约需28 d.     

犬齿牙鲆胚胎及仔、稚、幼鱼形态发育观察

犬齿牙鲆(Paralichthys dentatus)卵为端黄卵,受精卵浮性,卵径950~1100μm,油球径200~225μm.在水温20.5~22.0℃,盐度33条件下培育,受精后1 h 20 min 进入卵裂期,6 h 10 min 进入囊胚期,11 h 20 min 进入原肠胚期,19 h 10 min 发育到胚孔封闭期,胚体形成,26 h 50 min 尾芽出现,33 h 35 min心跳开始,48 h 10 min 开始孵化出仔鱼.初孵仔鱼平均全长2.59 mm±0.02 mm,在培育水温为17.0~21.0℃,盐度24~34条件下,胚后发育时序为:1日龄~9日龄为仔鱼前期,10日龄平均全长5.52 mm±0.05 mm,卵黄囊和油球完全吸收进入仔鱼后期;40日龄平均全长20.82 mm±0.67 mm,各鳍鳍条发育形成进入稚鱼期;65日龄平均全长41.13 mm±0.88 mm,全身鳞被完整进入幼鱼早期     

Developmental duration and morphology of the sea star asterias amurensis, in tongyeong, Korea

The process of embryogenesis and larval development of the asteroid sea star Asterias amurensis (Lütken) was observed, with special attention paid to morphological change and larval duration. In reproductive season, mature sea stars were collected under floating net cages, located in Tongyeong, southern Korea. The mature eggs are 138 μm in average diameter, semi-translucent and orange in color, sperms in good condition appear light cream to white-gray in color. Embryos develop through the holoblastic equal cleavage stage and a wrinkled blastula stage that lasts about 9 hours after fertilization. Gastrulae bearing an expanded archenteron hatch from the fertilization envelope 22 hours after fertilization. At the end of gastrulation, rudiments of the left and right coelom are formed. By day 2, larvae possess complete alimentary canal and begin to feed. At this stage, the larva is called early bipinnaria. In 6day-old larvae, the pre- and post- oral ciliated bands form complete circuits and the bipinnarial processes start to develop. By day 12, the lateral and anterior projection of the larval wall processes along the ciliated bands begins to thicken and curl, and the ciliated bands become more prominent. By day 32, early brachiolaria are presented with three pairs of brachiolar arms. Advanced brachiolaria with a well-developed brachiolar complex (three pairs of brachia and central adhesive disc) occur 6 weeks after fertilization. In the field, spawning of the sea star was observed in April to May, settlement form larvae and just settlements seem to occur from June to July, and early juveniles occur from August to September. Although we had not described the end of brachiolaria stage, it can be tentatively estimated that the duration of the pelagic stage of A. amurensis is 40 to 50 days.     

广西涠洲岛黄廯蜂巢珊瑚、肉质扁脑珊瑚的胚胎和幼虫的早期发育

研究造礁石珊瑚的有性繁殖来探索珊瑚礁的生态修复是近年来的热点。本文于2018年5月采集广西涠洲岛自然海域中的黄廯蜂巢珊瑚(Favia favus)和肉质扁脑珊瑚(Platygyra carnosus)至室内养殖,收集受精卵,观察和记录其胚胎和幼虫的早期发育过程。结果显示,黄廯蜂巢珊瑚和肉质扁脑珊瑚都是雌雄同体,体外受精,在月圆后5~8 d产卵;发育过程都经历卵裂期、囊胚期、原肠胚期以及浮浪幼虫期;两者的卵母细胞都不含虫黄藻。本研究记录了涠洲岛造礁石珊瑚的有性繁殖行为,为进一步利用有性繁殖来进行珊瑚礁的生态修复提供了理论基础。     

Toxicity of a fuel oil to the eggs of parhyale hawaiensis and amphithoe valida (amphipoda)

Experiments were carried out on the toxicity of a fuel oil to developing embryos and juveniles of two marine amphipods. Parhyale hawaiensis eggs were able to develop from early germinal disc stage (early eggs) to juvenile form in concentrations of 10 (2 ppm) up to 40% (8 ppm) WSF, but deleterious effects were evident in hatching success of eggs and survival of juveniles at concentrations ≥ 10% WSF. The juveniles that hatched from those eggs in higher WSFs had greater mortality than the juveniles that hatched from the eggs exposed to lower WSFs. Survival of juveniles from late eggs (cephalic region differentiated) was also greater than those from early eggs. Amphithoe valida eggs were more sensitive to the WSF of fuel oil than the eggs of P. hawaiensis; < 10% of the test eggs hatched in the 4 ppm WSF compared with 66% of P. hawaiensis eggs at the same concentration. The toxicity of fuel oil to the two amphipod eggs is therefore dependent on the concentration and duration of exposure on the one hand, and on the developmental stages and probably the nature of the egg case on the other.